电刺激下的火蚁（Solenopsis invicta，膜翅目：蚁科）会释放化学信号，吸引寄生蜂伪歼蝇（Pseudacteon decapitating，双翅目：Phoridae）

摘要
我们之前已经确定，受到电刺激的火蚁会释放外分泌腺体产物，例如毒液、招募信息素和警报信息素。我们假设，受电刺激的火蚁工蚁释放的外分泌腺体物质可能会吸引火蚁的寄生蝇类。生物实验表明，在野外条件下，受到电刺激的工蚁确实会吸引寄生蝇类。随后，我们使用寄生蝇（Pseudacteon tricuspis）的大规模饲养箱在实验室中进行生物实验，以确定哪些腺体物质以及其中的活性成分能够吸引寄生蝇。火蚁毒囊的粗提物在10分钟的时间评估点显示出显著增加对寄生蝇的攻击性，而纯化的毒液生物碱则对寄生蝇没有影响。杜福尔腺（招募信息素的来源）没有引起寄生蝇的活跃或吸引。然而，下颚腺提取物（警报信息素的来源）能够激活并吸引寄生蝇。此外，之前识别出的来自下颚腺的吡嗪类警报信息素被证实是具有活性的成分。这一点通过特定的警报信息素生物实验得到了证实，这些实验显示了预期的短暂吸引特征，并且通过直接使用合成的火蚁警报信息素也得到了验证。利用火蚁的警报信息素可能有助于在野外检测寄生蝇的存在，并在大量生产过程中增加攻击或寄生率。

引言
已知有超过40种Pseudacteon属的寄生蝇能够寄生于美洲的Solenopsis saevissima和Solenopsis geminata蚂蚁种群（Plowes 2009, Patrock 2009）。一旦雌性寄生蝇找到宿主，它们会在宿主上方盘旋，直到准确定位。然后它们会迅速将一枚卵注入蚂蚁的胸部（Porter 1998）。这枚卵在几天内孵化，幼虫会迁移到蚂蚁头部，在那里生长2-3周，之后会切断宿主的头部并在空的头壳中化蛹。
多项研究已经探讨了寄生蝇用来定位蚂蚁宿主的化学物质。寄生在Paraponera clavata巨蚁身上的寄生蝇会被受伤或战斗中的蚂蚁释放的下颚腺警报信息素所吸引（Feener et al. 1996）。叶切蚁的寄生蝇Neodohrniphora elongata主要依靠视觉线索，但踪迹信息素可以增强其攻击动机（Gazal et al. 2009）。在欧洲寄生于Lasius蚂蚁上的Pseudacteon属寄生蝇则被宿主毒腺释放的蚁酸所吸引（Maschwitz et al. 2008）。相比之下，Pseudacteon brevicauda寄生蝇会被其宿主Myrmica rubra的下颚腺中的多种成分所吸引（Witte et al. 2010）。已知寄生在火蚁身上的Pseudacteon tricuspis寄生蝇会被在野外受到干扰并可能释放警报信息素的火蚁所吸引（Morrison and King 2004）。Chen和Fadamiro（2007）证实P. tricuspis会被火蚁的化学物质所吸引，并认为吸引物的来源是蚂蚁的胸部，排除了招募信息素作为宿主定位线索的可能性。然而，他们测试的是活性较弱但商业上可获得的（E, E)-\(\:\propto\:\)-farnesene，而不是高活性的（Z, E)-\(\:\propto\:\)-farnesene（Alonso and Vander Meer 1997）。Sharma和Fadamiro（2013）表明，火蚁毒液生物碱和警报信息素的组合比单独使用任一物质更能吸引寄生蝇（Pseudacteon tricuspis, P. obtusus, 和 P. curvatus）。Ngumbi和Fadamiro（2015）发现合成的警报信息素及其异构体会吸引四种Pseudacteon属物种：P. cultellatus, P. curvatus, P. obtusus, 和 P. tricuspis。
先前的研究已经证明，受到电刺激的火蚁工蚁会释放外分泌腺体产物，例如毒液、招募信息素和警报信息素（Vander Meer et al. 2002）。本研究的第一个目标是确定寄生蝇是否会对在野外条件下受电刺激的工蚁释放的挥发性物质作出反应。然后，我们利用寄生蝇在实验室饲养攻击箱中的宿主寻找行为作为工具，来确定吸引寄生蝇到火蚁宿主体内的半化学物质的来源和性质。

方法和材料
**野外评估寄生蝇对受电刺激火蚁工蚁的吸引**
选择了一个拥有P. tricuspis蝇种群的野外地点（佛罗里达州盖恩斯维尔市Hogtown Creek；北纬29.6396°，西经-82.3945°），以评估受电刺激的火蚁在其自然栖息地中吸引寄生蝇的能力。培养皿（直径6厘米）装有两个独立的电栅格（约4厘米见方），由2毫米宽的铜带制成。两个栅格以一定的间距排列，使得行走的火蚁工蚁有很大概率同时触碰到这两个栅格，从而闭合电路。标准电源线被焊接在培养皿中两个独立铜带栅格的末端，并用一小块有机玻璃固定到位（图1）。对照培养皿与实验培养皿大小相同，但没有电栅格。实验培养皿和对照培养皿的内外表面都涂有Fluon™，以防止火蚁进出培养皿。电力通过电压逆变器将汽车电池的12 V直流电转换为110 V交流电，并通过Variac电压调节器（ISE，俄亥俄州克利夫兰）调节至30 V。长延长线将电力输送到实验培养皿。实验培养皿和对照培养皿被放置在地面上的自然阴凉处（相距3-4米），不考虑 existing fire ant colonies 的位置。来自实验室饲养种群的火蚁工蚁（100-200只）被轻轻放入对照和实验培养皿中。记录下对照组和实验组培养皿中寄生蝇的活动数量（时间0点），然后通过开启电源30秒、关闭电源30秒的方式对实验组的火蚁工蚁进行电刺激，总共持续三分钟。在野外有经验的观察者同时位于实验组和对照组的位置。在电刺激序列结束后3分钟和8分钟时，记录培养皿中的寄生蝇数量。该实验在野外不同地点重复进行了八次。

图1
这张图片的替代文本可能是使用AI生成的。

**寄生蝇饲养箱生物实验**
**火蚁**
本实验中使用的所有火蚁均来自成熟的、具有单一女王的Solenopsis invicta Buren种群，这些种群从佛罗里达州盖恩斯维尔及其周边地区挖掘而来。实验前一个月，这些种群从土壤中分离出来并在实验室中建立。这些种群以蟋蟀、水和10%蔗糖为食物，饲养在塑料托盘（83×53×13厘米）中，托盘的内侧涂有Fluon™以防止蚂蚁逃跑。

**寄生蝇**
本研究中使用的Pseudacteon tricuspis蝇和饲养攻击箱由佛罗里达州植物工业部（DPI）的生物控制饲养设施生产和维护。该设施负责大规模饲养这些蝇类，以便在南部美国受火蚁侵扰的地区进行分布。寄生蝇在自动化攻击箱中饲养，这些攻击箱的设计类似于Vogt等人（2003）描述的用于饲养P. curvatus的箱子。每个攻击箱包含两排共七个托盘（图2A），每个托盘中有300到400只蚂蚁和1.2克幼虫。托盘的内侧涂有Fluon™以防止蚂蚁逃跑。每个托盘内有一个装置，由两个倒置的杯子组成，这些杯子通过机械装置连接，以摇摆的方式一个杯子上升，另一个杯子下降。工蚁会本能地将幼虫移到下降的杯子下方，但10分钟后两个杯子的位置会互换——上升的杯子移到托盘底部，暴露出之前的蚂蚁和幼虫（图2B）。因此，工蚁不断受到寄生蝇的攻击。大量的寄生蝇饲养箱消除了潜在的伪重复问题。饲养箱所在的房间保持在27±2°C的温度、60%的相对湿度和12:12的光照周期。

图2
这张图片的替代文本可能是使用AI生成的。

**寄生蝇饲养箱示意图**
用于在DPI大规模饲养寄生蝇的饲养箱。每个矩形托盘内装有火蚁工蚁和幼虫。两个装有黄色圆环的托盘分别接受对照处理。托盘上装有两个倒置的杯子，这些杯子会周期性地上下移动，使工蚁不断受到寄生蝇的攻击（图2B）。照片由Jeffery W. Lotz提供 - 佛罗里达州农业部及消费者服务部门，植物工业 Division，盖恩斯维尔。

**生物实验过程**
在实验之前，先对两个饲养箱部分（图2A）中的寄生蝇数量进行预计数，一个用于对照组，另一个用于实验组。如果某一组的寄生蝇数量偏向一侧或观察到其他异常，则终止实验，并选择另一个饲养箱进行评估。饲养箱在24小时内不会被重复使用两次。计数寄生蝇需要两名或更多有经验的支持人员，因为计数时间分别在测试材料引入后的2分钟、5分钟和10分钟。毒囊内容物（生物碱+）
按照Vander Meer等人（2002年）的方法，解剖了五十个毒囊（包括腺体和储液囊），并将每个毒囊提取到相同的500微升己烷中。对于每次对Phorid蝇的评估，取125微升的提取物（相当于12.5只工蚁的量），在氮气缓慢流动的情况下将其浓缩至30微升（样本未允许完全干燥）。记录下攻击Phorid蝇的数量，然后将全部30微升的测试材料放置在直径为3.5厘米的Whatman #1滤纸圆圈上，让溶剂自然蒸发（约30秒）。同时，在另一个相同的滤纸圆圈上也加入30微升己烷，并让溶剂自然蒸发。处理组和对照组滤纸圆圈立即放入直径为6厘米的培养皿中，并放置在攻击盒内的相应位置。在处理组和对照组放入攻击盒后的2分钟、5分钟和10分钟时，记录攻击Phorid蝇的数量。实验重复进行了4次。

纯化毒囊生物碱
从1.4公斤的S. invicta工蚁中分离出毒囊生物碱（约140万只工蚁或大约7个成熟蚁群）。将蚂蚁提取到己烷中，通过Buchner漏斗进行真空过滤，收集的己烷蒸发后小心地加入到一个大型的硅胶柱中（参见Vander Meer等人1988年的方法）。该柱子依次用己烷、氯仿和甲醇进行洗脱。通过薄层色谱板检测洗脱过程中的每个组分，并使用磷多钼酸（PMA）喷雾（5%乙醇溶液）进行有机化合物的检测，随后用电热枪小心加热。例如，当化合物通过PMA检测不再被洗脱时，就更换洗脱溶剂。气相色谱（GC）显示甲醇组分中含有大量的火蚁毒囊生物碱。通过真空蒸发去除甲醇后，向残渣中加入己烷（400毫升），摇动形成溶液。己烷溶液用200毫升2 N HCl/甲醇（1:1）溶液在分离漏斗中洗涤三次，合并分离出的水相。含生物碱HCl盐的酸性水溶液用10% NaOH调至碱性（将HCl盐转化为游离生物碱）。将所得混合物用200毫升氯仿在分离漏斗中萃取三次，合并氯仿洗涤液并使用无水硫酸钠干燥。合并后的干燥氯仿萃取物通过GC-质谱分析，发现其成分与预期的火蚁哌啶毒囊生物碱一致。上述过程重复了两次，GC分析结果与第一次相同后，将三次氯仿萃取物合并并蒸发至恒重，得到S. invicta毒囊生物碱（约4克）。

制备毒囊生物碱样品，以评估其对Phorid蝇的影响，方法是将生物碱制成约3只工蚁当量的甲醇溶液（30微克/20微升甲醇）。在记录攻击Phorid蝇的数量后，立即用注射器将20微升生物碱溶液滴在直径为3.5厘米的滤纸圆圈上（置于6厘米培养皿中）。使用另一注射器在第二个培养皿的滤纸圆圈上加入20微升甲醇。让生物碱处理组和甲醇对照组自然干燥，然后将两个培养皿分别放置在攻击盒内。在处理组和对照组放入攻击盒后的2分钟、5分钟和10分钟时，记录攻击Phorid蝇的数量。

火蚁警报信息素，摇晃的工蚁
先前研究表明，工蚁会释放警报信息素（Vander Meer等人2002年）。将大约25只工蚁分别放入两个20毫升的闪烁瓶中。在将瓶子放入攻击盒进行生物测定之前，摇晃其中一个瓶子。之后立即打开瓶盖，并将瓶子分别放置在对照组和处理组的攻击盒中。在放入攻击盒后的1分钟记录攻击Phorid蝇的数量。实验重复了10次，每次使用不同的工蚁。在第一次实验的基础上进行了重复实验，但此次对照组和摇晃过的工蚁瓶子在放入攻击盒前被打开4分钟。在放入攻击盒后的1分钟记录攻击Phorid蝇的数量。实验重复了10次，每次使用不同的工蚁。

合成吡嗪类警报信息素
火蚁警报信息素被鉴定为2-ethyl-3,5-dimethylpyrazine（Vander Meer等人2010年）。这种信息素作为混合物在市场上出售，其中还包含2-ethyl-3,6-dimethylpyrazine异构体（Aldrich Chemical Co，密尔沃基，威斯康星州，美国）。将合成吡嗪混合物溶解在矿物油中，浓度为每10微升矿物油含5微克吡嗪。矿物油可以减缓高挥发性吡嗪的释放速度。

统计分析
所有统计分析和图形表示均使用GraphPad Prism 10.1.2软件完成。对于Phorid蝇对电刺激火蚁工蚁吸引力的野外评估，对照组未观察到任何Phorid蝇，因此使用Wilcoxon符号秩（非参数）检验进行统计分析。对于Phorid蝇饲养箱中的生物测定结果，对照组和处理组的数据被视为配对数据，使用双尾t检验比较平均生物测定反应。所有数值均以平均值±标准误差（SE）报告。

结果
在野外评估区域内，未观察到火蚁蚁群附近有Phorid蝇。注意不要干扰蚁群，因为已知蚁群会吸引Phorid蝇（Morrison和King 2004年）。在大多数情况下，Phorid蝇在电刺激周期开始后两分钟内出现在处理组的培养皿附近。对照组培养皿中装有静止的工蚁，没有Phorid蝇被吸引。图3显示了电刺激后3分钟时，处理组吸引的Phorid蝇数量显著多于非电刺激组（Wilcoxon符号秩检验，t = 3.191，df = 7，P = 0.0153；电刺激停止后8分钟时也是如此（Wilcoxon符号秩检验，t = 5.384，df = 7，P = 0.0010，N = 8）。

图3
**图像的替代文本可能是使用AI生成的。**

**野外评估：Phorid蝇对电刺激火蚁工蚁的吸引力。**展示了电刺激后3分钟和8分钟时，对照组和处理组攻击Phorid蝇数量的平均增加情况（平均值±标准误差，* = P < 0.01；** = P < 0.001）。

**火蚁毒囊提取物和纯化毒囊生物碱对Phorid蝇激活的影响**
电刺激工蚁会导致毒液的释放，主要是大量毒囊生物碱（Vander Meer等人2002年）。图4A显示了Phorid蝇对解剖出的火蚁工蚁毒囊提取物的反应。在电刺激后2分钟和5分钟时，含有毒囊提取物的处理组和溶剂对照组培养皿中攻击Phorid蝇的数量没有显著差异（双尾t检验，t = 1.492，df = 3，P = 0.2324；t = 1.492，df = 3，P = 0.2324）。然而，在电刺激后10分钟时，处理组的攻击Phorid蝇数量显著增加（t = 14.123，df = 3，P = 0.0259）。在另一个实验中，对大规模工蚁提取物中的纯化生物碱也对其对Phorid蝇的影响进行了类似评估（图4B）。将纯化生物碱及其溶剂对照组在放入攻击盒后的2分钟、5分钟和10分钟进行比较。使用双尾t检验，在任何时间点处理组的Phorid蝇数量与对照组没有显著差异（2分钟：t = 0.2928，df = 3，P = 0.7888；5分钟：t = 0.3333，df = 3，P = 0.7608；10分钟：t = 0.9258，df = 3，P = 0.4228）。

图4
**图像的替代文本可能是使用AI生成的。**
**A）显示了电刺激后2分钟、5分钟和10分钟时，含有毒囊提取物的处理组和溶剂对照组培养皿中攻击Phorid蝇数量的变化（平均值±标准误差，N = 4）。只有10分钟时的评估结果与对照组有显著差异（*；P < 0.03，NS = 无显著差异）。**
**B）显示了含有纯化毒囊生物碱的处理组培养皿中攻击Phorid蝇数量的变化（平均值±标准误差，N = 4）。**

**火蚁招募信息素对Phorid蝇激活的影响（Dufour腺体提取物）**
这些化合物具有多种功能。如果食物来源太大，单个觅食工蚁无法带回蚁群，它会在返回巢穴的路上留下化学痕迹，以吸引其他工蚁跟随这条痕迹找到食物来源。随着食物来源的减少，痕迹的吸引力也会减弱，直到食物和痕迹消失（Wilson 1962年）。在饲养箱生物测定中，火蚁招募信息素并未显著激活P. tricuspis Phorid蝇（图5），无论是在引入Dufour腺体提取物后的2分钟、5分钟和/或10分钟（双尾t检验，N = 4；2分钟：P = 0.5367，t = 0.6956，df = 3；5分钟：P = 0.3441，t = 1.121，df = 3；10分钟：P = 0.3101，t = 1.219，df = 3，N = 4）。NS = 无显著差异。**

图5
**图像的替代文本可能是使用AI生成的。**
**Dufour腺体在引入后2分钟、5分钟至10分钟对攻击Phorid蝇数量的影响与对照组无显著差异（NS = 4）。**

**火蚁警报信息素对Phorid蝇激活的影响（摇晃的工蚁和合成吡嗪警报信息素）**
火蚁的吡嗪警报信息素及其异构体在市场上可获得（Aldrich Chemical Co，圣路易斯，密苏里州）。两种异构体均能吸引Phorid蝇。摇晃的工蚁也能吸引Phorid蝇。在饲养箱生物测定中，摇晃的工蚁释放的火蚁警报信息素在打开摇动蚂蚁瓶子并放入相应处理组后的第一分钟内即激活了P. tricuspis Phorid蝇（图6A，P = 0.0078，双尾检验，t = 0.3.407，df = 9，N = 10）。当摇晃的蚂蚁瓶子打开后保持4分钟再放入饲养箱生物测定时，Phorid蝇未被激活（P = 0.4642，双尾检验，t = 0.7645，df = 9，N = 10）。然而，在生物测定中使用矿物油中的合成吡嗪警报信息素时，Phorid蝇在引入后2分钟和5分钟时被显著激活（P = 0.0288，双尾检验，t = 3.342，df = 4；P = 0.0009，双尾检验，t = 8.773，df = 4）。**

图6
**图像的替代文本可能是使用AI生成的。**
**摇晃的火蚁释放短暂性的警报信息素。**图6A显示了Phorid蝇对含有静止火蚁工蚁（对照组）或摇晃后测试的活跃（受惊）火蚁瓶子中挥发物的反应。图6B显示了在处理瓶中加入合成吡嗪警报信息素溶液（5微克吡嗪/10微升矿物油）后的结果。在2分钟和5分钟后，攻击Phorid蝇的数量显著增加（NS = 无显著差异；* = 0.03；** = 0.01；*** = 0.001）。**EAG（电位反应）的结果很有趣，但它们并不一定能够说明蚂蚁的功能。因此，行为学上的Y-Tube嗅觉测定法（Chen和Fadamiro 2007年）更为有趣。这些研究表明，P. tricuspis对活的S. invicta工蚁、整个工蚁身体以及工蚁胸部提取物有显著的吸引力，但对头部或腹部提取物以及追踪信息素成分E（E-α-法尼烯）则没有吸引力。作者推测，火蚁工蚁的胸部可能是P. tricuspis产生吸引物的来源。虽然这些数据不能排除火蚁吸引信息素在P. tricuspis宿主吸引中的潜在作用，但我们在这里报告的Dufour腺体的结果（图5）清楚地表明，火蚁吸引信息素并不会吸引P. tricuspis。随后有一项研究（Chen等人2009年）指出，火蚁的毒液生物碱（顺式和反式生物碱组分）能够吸引伪BT甲虫，并且能引起P. tricuspis触角的强烈EAG反应。

S. invicta的警报信息素被分离并鉴定为2,6-二甲基-3-乙基吡嗪（Vander Meer等人2010年）。这种挥发性吡嗪警报信息素来源于下颚腺。由于其高挥发性、工蚁的高敏感性以及下颚腺中该信息素的低浓度，分离和鉴定这种信息素需要花费了数十年的时间。市面上有一种包含火蚁警报信息素及其异构体的混合物。这种混合物在低于其他吡嗪类似物的浓度下，就能引起伪BT甲虫的显著EAG反应，从而支持了火蚁警报信息素在吸引伪BT甲虫到其宿主火蚁方面所起的作用（Sharma等人2011年）。然而，由于Chen等人（2009年）先前已经证明火蚁生物碱能够吸引伪BT甲虫，Sharma等人（2011年）提出这两种化学物质可能共同起作用。Sharma和Fadamiro（2013年）进一步提出了P. tricuspis利用火蚁警报信息素进行远距离吸引，而利用毒液生物碱进行近距离吸引的假设。这一观点在Chen和Fadimiro（2018年）关于伪BT甲虫宿主特异性和影响的综合综述中得到了重申。

我们的结果并不支持Sharma和Fadamiro（2013年）关于毒液生物碱是近距离吸引物的观点，因为纯化的生物碱在被认为是近距离实验的条件下对伪BT甲虫没有产生影响（图4B）。这两种不同研究结果之间的差异可能是由于所使用的生物碱分离方法不同：Chen等人（2009年）采用了一种他们自行开发的方法来分析火蚁样本中的哌啶生物碱，例如将约5克工蚁浸泡在己烷中24小时，然后将提取物加入含有硅胶/己烷的Pasture吸管（分离柱）中，再用逐渐增加的丙酮与己烷的比例进行洗脱。最终得到了三个组分：#1是碳氢化合物；#2被称为顺式生物碱组分，#3是反式生物碱组分。这两组生物碱都被证明能够吸引伪BT甲虫（Chen等人2009年）。相比之下，我们通过酸化从工蚁己烷提取物中化学地去除了生物碱，并将生物碱的HCl盐分离到水层中，留下中性及酸性化合物，包括那些负责吸引伪BT甲虫的成分（图4A），从而留在了己烷提取物中。很可能Chen等人（2009年）中的顺式和反式哌啶组分中还含有其他未被检测到的、能够吸引伪BT甲虫的化合物。与此相关的是，Shi等人（2015年）报告称，从美国佛罗里达州收集的S. geminata工蚁的生物碱谱中只含有顺式和反式哌啶生物碱。然而，Vander Meer等人（2022年）指出他们的实验方法掩盖了多种重要的吡啶生物碱的存在。这支持了我们的观点，即在Chen等人（2009年）的研究中，顺式和反式哌啶组分可能还含有其他吸引伪BT甲虫的化合物。

我们的结果显示，在所有三个时间点，毒囊提取物都略微增加了对伪BT甲虫的攻击性，但只有在10分钟时，这种增加与对照组有显著差异（图4A）。有趣的是，在整个实验时间内，纯化的生物碱并没有吸引到伪BT甲虫（图4B）。因此，我们必须得出结论：尽管毒液生物碱可能引发EAD反应（Chen等人2009年），但它们并不参与P. tricuspis对宿主火蚁的吸引。然而，毒腺产生的非生物碱成分可能会影响伪BT甲虫对其宿主火蚁的吸引或识别，这一点值得进一步研究。毒液有多种用途——防御、猎物获取、巢穴清洁，以及蚁后在进行产卵时会在每个卵上涂抹毒液。未来的实验可以使用伪BT甲虫饲养箱作为生物测定工具，以指导毒囊提取物的化学分离，从而分离出可能负责轻微吸引伪BT甲虫的化合物（图4A）。

使用合成警报信息素的结果清楚地表明，其激活伪BT甲虫的能力超过了本研究中评估的任何其他外分泌腺提取物。警报信息素会在任何蚁丘/蚁群的干扰（如农场动物或农用设备）、蚁群间的领土冲突以及交配飞行开始时释放（Morrison和King 2004年）。

总之，一系列生物测定表明，受到电刺激的火蚁比未受刺激的火蚁更具吸引力。我们还发现，被物理震动的火蚁对伪BT甲虫也有很强的吸引力，但这种吸引力会随时间迅速消失，这表明火蚁警报信息素的作用是短暂的。我们确定毒囊和Dufour腺体的提取物对伪BT甲虫没有吸引力。这些生物测定提供的信息清楚地表明，下颚腺产生的警报信息素是P. tricuspis利用的主要化学信号来定位其宿主。这项研究的结果也有助于解释为什么Pseudacteon伪BT甲虫对宿主具有高度的特异性（Porter和Gilbert 2004年）。通过更好地了解与宿主吸引相关的机制，有可能改进野外采集、宿主特异性测试以及大规模饲养Pseudacteon伪BT甲虫作为火蚁生物控制剂的应用。