摘要
目的：垂体激素FSH（卵泡刺激素）和卵泡颗粒细胞激素抑制素B在卵泡发育直至排卵的过程中起着重要作用。我们假设FSH和抑制素B在卵泡期的至少一部分时间内通过振荡反馈机制进行相互作用。
方法：对四名女性的整个排卵周期内的每日血清FSH和抑制素B水平进行了测量。通过经阴道超声检查确定了主导卵泡（DF）的最后一天的时间以及其破裂的第二天。将血清FSH和抑制素B的水平以排卵抑制素B峰值所在的第0天为基准进行索引，该峰值在三个周期中出现在DF破裂当天，在一个周期中出现在DF的最后一天。将各周期中不同时间点的血清FSH和抑制素B水平与功能数据分析（fda）结果对齐，以生成标准化的日特定水平，从而有意义地比较FSH和抑制素B随周期时间的变化。
结果：标准化日特定FSH和抑制素B水平的曲线之间存在关联。当FSH曲线相对于抑制素B曲线向前移动1天时（此时曲线“同相”），FSH和抑制素B之间的正相关达到最大；同样，当抑制素B曲线相对于FSH曲线向前移动1天时（此时曲线“反相”），负相关达到最大。在卵泡早期阶段，FSH和抑制素B之间可以观察到振荡性的正负反馈，这种反馈在DF选择大约发生的第-8天后似乎发生了变化。
结论：通过fda分析单个周期中抑制素B和FSH之间的关系，有可能消除多周期平均所带来的模糊性。这项探索性研究揭示了在卵泡早期阶段可能存在FSH和抑制素B的振荡性反馈机制（“FSH<->B”（即FSH上调抑制素B，抑制素B下调FSH）），并且这种机制随着周期的进展而发生变化。我们推测，振荡机制可能在从发育中的卵泡群中选择主导卵泡的过程中起作用。
1 引言
控制月经周期中卵巢窦状卵泡动态和主导卵泡（DF）选择的激素机制尚未完全阐明。某些原始卵泡的逐步发育被认为是由内分泌、旁分泌和自分泌因素共同作用的结果，这些因素调控卵泡细胞的增殖、生长、分化和凋亡（1, 2）。前窦状卵泡（约0.1–0.2毫米）独立于黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）进行发育。当卵泡直径达到约0.2–0.4毫米时，卵泡的颗粒细胞周围开始形成一个充满液体的腔（称为窦状腔）；一群对FSH有反应的卵泡会逐渐增大，这一过程可以通过超声检查观察到。这群卵泡最终会发展成一个“主导卵泡”（DF），其直径约为10毫米，而其他从属卵泡则会退化（1–5）。目前的DF选择模型认为，必须维持一定的FSH阈值才能刺激窦状卵泡群的生长和发育，直到卵泡期的中期（2, 3, 6）。月经开始后，达到这一中期所需的时间可能会有所不同。当DF在这个卵泡期达到适当的成熟度时，FSH水平会下降到一个阈值以下，但DF会继续增大并经历大约7天的激素变化，直到排卵。简而言之，DF是在FSH水平逐渐下降的情况下，在排卵前约7天形成的。实验表明，DF的独特性及其对垂体促性腺激素水平的影响、卵泡期的长度以及排卵的时间都得到了证实（7, 8）。
FSH分泌的主要负调节因子是卵巢激素抑制素A和抑制素B（3, 9–12）。抑制素A和抑制素B属于转化生长因子-β超家族，作为卵巢激素，它们发挥自分泌、旁分泌和内分泌调节作用（10, 12）。抑制素A和抑制素B各自由一个共同的α亚基组成，该α亚基通过二硫键与两个高度同源的β亚基βA和βB连接，分别形成α−βA（抑制素A）和α−βB（抑制素B）（13–16）。抑制素A和抑制素B都能抑制FSH水平：在抑制素A敲除的小鼠中FSH水平升高，在抑制素A水平升高的转基因小鼠中FSH水平降低（17）。FSH是卵巢卵泡发育的核心调节因子，而激活素是由βA和βB组成的二聚体，它们能增强FSH的转录和垂体分泌（12, 18, 19）。目前的观点认为，抑制素在其相应的垂体受体水平上与激活素的作用竞争，从而减少FSH的转录（9, 12）。
多项研究发表了以排卵周期中黄体生成素（LH）峰值为基准的日特定血清抑制素B和抑制素A平均水平；在这些研究中，假定的排卵日（第0天）是LH峰值后的第二天（20–25）。日特定抑制素B水平的平均值特征为：a) 从月经第一天开始增加，在第-9天到第-7天达到峰值；b) 在第-2天达到最低点；c) 在第0天出现第二个峰值；d) 排卵后水平降低，并在下次月经开始前再次上升。相比之下，日特定血清抑制素A水平的平均值特征为：a) 卵泡早期阶段水平较低；b) 从DF选择时（约第-7天）开始上升；c) 在排卵早期和中期阶段水平较高。此外，发育中卵泡液中的抑制素B和抑制素A浓度与排卵前的血清水平一致（3, 25–29）。卵泡液中的抑制素B浓度在卵泡直径约为9–11毫米（即选定的DF大小）时达到峰值，随后随着卵泡直径的增大而急剧下降。相比之下，卵泡液中的抑制素A浓度相对较低，直到卵泡直径达到约9–10毫米时才开始上升。总之，卵泡期的激素时间序列如下：FSH峰值 -> 抑制素B峰值/FSH水平较低 -> DF出现 -> 抑制素A水平上升（3, 30, 31）。这一时间序列表明，在卵泡早期阶段，抑制素B是FSH的主要负调节因子，直到卵泡中期选择DF为止。抑制素B不仅在卵泡期的第一个阶段抑制FSH水平，而且FSH也会增加抑制素B的水平。在100 IU的FSH注射后36小时，FSH能够刺激抑制素B水平的升高（32）。多项研究通过选择性地改变卵泡期的不同阶段的FSH水平（这些研究以GnRH缺乏的女性为受试者，并在正常女性中使用GnRH拮抗剂）表明，FSH水平会上调抑制素B的水平，这种调控发生在卵泡早期到中期（33–35）。FSH对抑制素B的调控发生在抑制素A上升之前，而抑制素A的上升则发生在DF选择之后。此外，卵泡早期阶段的抑制素B水平是由处于不同发育阶段的较小卵泡分泌的FSH调节的抑制素B共同作用的结果（3, 35）。
上述结果表明，在排卵周期的卵泡期可能存在某种形式的FSH和抑制素B的正负反馈机制。上述提到的正负调节相互作用“FSH<->B”引入了一个重要概念：激素系统的振荡动态（36）。垂体-靶组织激素水平的时间函数可以通过负反馈机制最好地理解为振荡模式（36–38）。可以假设，FSH诱导抑制素B和抑制素B抑制FSH的信号传递可能不是瞬时发生的，因此会导致水平的振荡。为了验证卵泡期间FSH和抑制素B之间是否存在振荡关系，我们采用了功能数据分析（fda），该方法可用于将受试者数据视为时间的函数（39, 40）。
2 材料与方法
2.1 受试者、经阴道超声检查和每日血清样本
关于四名受试者及其四个周期的详细信息，包括用于确定DF最后一天和破裂第一天的24小时间隔的经阴道超声检查，以及每日血液采样，已在先前的研究中发表（41）。这里的受试者S1、S2、S3和S4分别对应于先前研究中的1Y1、2Y1、4Y1和6Y1（41）。总结如下：从日历第一天（CD1）开始，每天上午8:30至11:30采集四名受试者的血清样本，共四个排卵周期，这些受试者的年龄在27-32岁之间，BMI在18.6-26.2之间，周期长度为25-28天。共收集了105份血清样本；只有两个样本缺失，分别是S1周期的第-15天和S3周期的第-11天。该研究获得了TTUHSC机构审查委员会（A23-4337）的批准，批准日期为2023年4月13日。这些周期的血清雌二醇（E2）、LH和孕酮（P）水平已在先前的研究中报告（41），并使用Panhandle生殖研究实验室的Abbott Architect ci4100平台进行检测。血清FSH水平也在此研究中进行了批量检测。在预计排卵前7天开始每天上午10:00至中午进行经阴道超声检查，通常持续到DF破裂的第二天。经阴道超声检查和数据存储使用的是TTUHSC Amarillo妇产科部门的Phillips EPIQ 7超声机（41）。
2.2 将日特定血清抑制素B和FSH水平以排卵中期抑制素B峰值所在的第0天为基准进行索引
排卵事件——或者更准确地说，排卵过程——被定义为DF最后一天和DF破裂第二天之间的24小时间隔；这一间隔通过血清P水平得到了验证。先前研究中（41）的1Y1、2Y1、4Y1和6Y1周期（分别对应于S1、S2、S3和S4）的出版日0天是DF破裂且P水平上升至>2 ng/ml的那一天。然而，在这里，第0天是指排卵中期抑制素B峰值出现的那一天。这样做是为了优化fda计算；此外，已发表的研究表明，排卵中期抑制素B峰值标志着排卵日（20–25）。对于S1、S2和S4周期，排卵中期抑制素B水平与DF破裂和血清P >2.0 ng/ml的时间点一致。然而，在S3周期中，抑制素B峰值出现在DF的最后一天。有趣的是，S3周期在DF最后一天的血清P水平为2.4 ng/ml，这表明DF已经处于破裂和黄体化的过程中，因此抑制素B达到了峰值。
2.3 抑制素B和抑制素A的检测
血清样本在-80°C下保存，直到在TTU Lubbock分校化学工程系的Harvinder Singh Gill实验室进行批量检测。抑制素B水平使用来自美国德克萨斯州Webster的Ansh Labs LLC的酶联免疫测定试剂盒进行检测。这些试剂盒通过检测α亚基来特异性捕获相应的βB亚基。
2.4 功能数据分析
功能数据分析是指一组工具，包括对齐、比较和统计建模，用于研究表示为一维函数、曲线形状和图像的复杂现代数据对象（39, 40）。在本研究中，FSH和抑制素B是时间的函数，即FSH(t)和B(t)，其中时间是以排卵抑制素B峰值所在的第0天为基准的周期天数。由于不同周期中窦状卵泡的数量和发育阶段不同（1–5），至少在卵泡早期阶段，FSH和抑制素B的水平被认为是不同步的。为了提取有意义的摘要统计信息——即FSH(t)和B(t)的摘要曲线——最大的挑战之一是对齐步骤（42）。使用变形函数进行fda对齐可以减少由于相位变化导致的曲线特征的横向位移。为了完成这些计算，我们使用了Srivastava和Klassen（39）最近开发的动态时间变形算法，并在R包“fdasrvf”中实现了弹性fda（43）。一旦FSH和抑制素B曲线对齐，由于测量是在相同的时间点进行的，就生成了横截面平均日特异性和标准化的横截面平均日特异性曲线。标准化的横截面曲线如下：（时间点t的FSH或抑制素B水平 - 该周期FSH或抑制素B的平均水平）/标准差）。这里将标准化的横截面平均日特异性曲线（水平）称为FSH和抑制素B的“标准化平均日特异性”曲线（水平）。从24小时血液采样中，计算出的FSH和抑制素B的标准化平均日特异性曲线似乎相位相差1天。通过将FSH曲线向前移动1天并与抑制素B曲线进行相关性分析（即FSH(t+1)与B），测试了FSH对抑制素B水平的正向影响（FSH滞后1天）。相反，通过将抑制素B曲线向前移动1天并与FSH曲线进行相关性分析（即B(t+1)与FSH），测试了抑制素B对FSH水平的抑制作用（抑制素B滞后1天）。这些曲线之间的相关性使用经典的皮尔逊、肯德尔和斯皮尔曼相关系数（44）进行计算。
3 结果
3.1 四个个体周期的日特异性血清FSH和抑制素B水平
四个受试者提供了排卵周期S1、S2、S3和S4的每日血液样本。FSH和抑制素B的血清水平显示在图1中，并索引到抑制素B的排卵高峰。已发表的抑制素B特征显示，在假定的排卵时间（20-25天）出现这一高峰。为了优化这些水平的fda，将这些水平索引到这个排卵抑制素B高峰。排卵事件——卵子的释放——发生在DF的最后一天到下一个DF超声塌陷之间的24小时间隔内。对于周期S1、S2和S4，抑制素B的高峰出现在DF塌陷当天；而在S3中，抑制素B的高峰出现在DF的最后一天。有趣的是，对于周期S3，在DF的最后一天测量的血清孕酮水平已经显著升高至2.4 ng/ml，这可能表明卵子即将释放。
图1 四个受试者在排卵周期S1、S2、S3和S4中的日特异性血清FSH和抑制素B水平。这些水平分别显示在[(A)顶部]和[(B)底部]。这四个周期都索引到第0天（粉红色垂直线），即抑制素B的排卵高峰，该高峰发生在DF的最后一天到下一个DF超声塌陷之间的24小时间隔内。对于周期S1、S2和S4，抑制素B的排卵高峰分别出现在DF塌陷当天，血清P水平分别为1.3 ng/ml（4.13 nmol/L）、0.7 ng/ml（2.23 nmol/L）和1.8 ng/ml（5.72 nmol/L），DF大小分别为21.8、28.0和26.9 mm。对于周期S3，抑制素B的排卵高峰出现在DF的最后一天（大小22.4mm），但P水平为2.4 ng/ml（7.63 nmol/L），表明DF已向黄体化发展并接近或处于破裂过程中。S1、S2、S3和S4的第0天抑制素B高峰水平分别为362.34、66.61、398.89和95.23 pg/ml。在这些周期的早期卵泡阶段，抑制素B显示出振荡模式，这种模式在预期可育窗口（红色框）内以相当线性的方式下降，最低点出现在第−2天。
抑制素B的排卵高峰水平范围为66.6–398.8 pg/ml。在所有周期中，排卵前的FSH高峰（范围为6.6–9.3 mIU/ml）出现在抑制素B排卵高峰前1天。
3.2 日特异性抑制素B和FSH水平的功能数据分析
个体周期的一个特征是早期卵泡阶段抑制素B的明显振荡模式，这种模式在周期中期结束；这在图1中有指示。通过检查早期卵泡阶段的FSH水平，也暗示了这一点，尽管程度较轻。考虑到由于窦状卵泡波的变化，抑制素B和FSH水平可能存在相位不同，因此使用fda来研究这一假设。图2展示了fda方法的应用示例，用于日特异性抑制素B水平。假设抑制素B和FSH之间的相互作用可能被周期间的相位不同因素所掩盖，但fda可以潜在地可视化这种关系。功能数据分析使用变形函数来捕捉原始曲线中的相位变化，并优化对齐曲线的拟合（39, 40, 42–44）。从这种方法得出的最终结果如下：a) 抑制素B和FSH的横截面平均日特异性水平；b) 标准化（归一化）的横截面平均日特异性FSH和抑制素B水平，这里简称为标准化平均曲线或标准化平均日特异性曲线。
图2 使用抑制素B水平对周期S1、S2、S3和S4进行功能数据分析（fda）的示意图。作为fda过程的一个例子：步骤1（顶部面板和图1）——首先获得周期时间的原始抑制素B水平；步骤2（中间面板）——然后使用排卵抑制素B高峰作为第0天（粉红色垂直线）对这些曲线进行对齐；步骤3（底部面板）——对齐曲线的平均值生成了横截面平均日特异性抑制素B曲线（蓝色）。fda的对齐步骤（称为“注册”）旨在同步由于随机变异性或噪声而可能被视为不同相位的随时间测量的曲线。这是通过每个曲线的单独时间变形（变形）以及随后优化目标函数（Fisher-Rao度量）来实现的，最终为整个曲线组提供“最佳”同步。这可以启发式地理解为允许曲线变形，直到达到组内的最大“相关性”（39）。
图3A-C分别显示了横截面平均日特异性抑制素B和FSH水平的特征曲线以及相应的标准化平均日特异性FSH和抑制素B水平。图3A、B中的虚线对应于构成特征曲线的横截面平均值的95%置信区间（实线）。这些置信区间是通过“非参数自助法”（百分位数方法）计算的，这种方法适用于小样本情况，从而提供了不确定性量化，因为每个平均值仅基于四个值（45）。
图3 使用fda对周期S1、S2、S3和S4的FSH和抑制素B水平进行功能数据分析。图1中的FSH和B曲线的fda处理在材料和方法部分有详细说明，并在图2中为抑制素B水平进行了说明。使用这种方法，确定了具有95%置信区间（虚线）的横截面平均日特异性FSH和抑制素B水平[(A)顶部和(B)中间]。为了比较目的，还确定了标准化的横截面平均（“标准化平均”）日特异性FSH和抑制素B水平（曲线）并一起显示[(C)底部]。通过将图4中的FSH和抑制素B曲线进行相关性分析，进一步探讨了早期卵泡阶段的振荡模式。
标准化平均抑制素B和FSH曲线一起绘制的关系表明，在第−8天之后呈现出周期性函数（图3C）。从大约第−7天到第0天的时间，即DF发展和最终排卵的时间，抑制素B和FSH的功能与早期卵泡阶段（第−14天到第−8天）明显不同。第0天之后，FSH和抑制素B的水平较低，与多个周期的已发表平均水平（20-25）一致。
3.3 功能数据分析显示在卵泡阶段FSH和抑制素B之间存在变化的振荡相互作用
通过在同一图表上移动FSH和抑制素B曲线（图4A、B），进一步研究了FSH和抑制素B之间的正负反馈循环的可能性，即FSH<->B。顶部图表（图4A）显示了将标准化平均日特异性FSH曲线向前移动1天（FSH(t+1)）与标准化平均日特异性抑制素B曲线进行比较；相反，底部图表（图4B）显示了将标准化平均日特异性抑制素B曲线（B(t+1)）向前移动1天（B(t+1)）与FSH曲线进行比较。鉴于血清测量是基于24小时的，这些移动检验了FSH对抑制素B的正向上调效应可能在1天后显现，反之，抑制素B对FSH的负向抑制效应可能在1天后显现，从而形成振荡模式。令人惊讶的是，在这种叠加之后，FSH(t+1)曲线在整个周期内跟踪了抑制素B曲线，表明FSH具有上调作用。相比之下，抑制素B和FSH之间的振荡模式在大约第−8天到第−7天之间发生变化，表明抑制素B具有下调作用。对于整个周期（第−13天到第+9天），FSH(t+1)与抑制素B的皮尔逊、肯德尔和斯皮尔曼系数分别为0.95（P<0.001）、0.77（<0.001）和0.92（<0.001）。对于第−13天到第−8天之间的振荡模式，发现抑制素B(t+1)与FSH之间的强负相关；相应的皮尔逊、肯德尔和斯皮尔曼系数分别为−0.86（P 0.02）、（−0.73，P 0.05）和（−0.89，P 0.03）。总体而言，数据表明存在潜在的FSH<->B机制，即正负反馈循环，在DF选择期间发生了质的变化。
图4 将标准化平均FSH曲线向前移动1天（FSH(t+1)与标准化平均抑制素B曲线进行比较，以及将标准化平均抑制素B曲线向前移动1天（B(t+1)与标准化平均FSH曲线进行比较[(A)顶部和(B)底部]。通过将FSH曲线向前移动1天（即FSH(t+1)）相对于抑制素B曲线，检验了FSH对抑制素B的正向调节作用。在周期的所有阶段，标准化平均水平的曲线有相当大的重叠，表明FSH在整个排卵周期内上调抑制素B，并且这种FSH效应在1天间隔内是可证明的。相反，通过将抑制素B曲线向前移动1天（即B(t+1)），检验了FSH对抑制素B的负向调节作用。随着B(t+1)相对于FSH的移动，在早期卵泡阶段表现出振荡的正负模式，这种模式在大约第−8天后发生了质的变化。第0天（粉红色垂直线）是排卵抑制素B高峰，发生在DF的最后一天（1/4周期）或DF塌陷当天（3/4周期）。
4 讨论
4.1 通过fda的探索性研究：FSH<->B：在卵泡阶段变化的FSH和抑制素之间的正负振荡反馈循环
许多研究分析了排卵前FSH和抑制素B之间的相互作用，但通常是在平均FSH和平均抑制素B之间的线性关系这一层面上。这些研究令人信服地表明，至少在卵泡阶段，FSH上调了抑制素B（32-35）。抑制素B作为FSH的负调节因子的重要作用也被提出（3, 31）。然而，FSH和抑制素B之间的振荡相互作用研究得不够充分。之前有一项研究在单一天（CD 5）对五名正常女性进行了研究，每10分钟采血一次，持续6小时，并测量血清FSH和抑制素B水平（46）；时间序列分析显示抑制素B水平存在60-70分钟的周期性，同样，FSH水平也呈现出每60分钟的脉冲模式。在本研究中，我们调查了四个个体的排卵周期，其中血清FSH和抑制素B的水平以抑制素B峰值所在的那一天为基准进行索引。在4个周期中的3个周期里，这个抑制素B峰值是卵泡发育（DF）崩溃的第一天，在另一个周期里则是DF的的最后一天；这一时间段涵盖了排卵事件。早期卵泡阶段抑制素B和FSH水平的明显锯齿状波动（见图1）被认为是由于卵泡发育的相位不同所致。我们采用的功能数据分析（FDA）方法来分析FSH和抑制素随时间的变化。通过这种方法，标准化的平均日特异性FSH和抑制素B水平显示，在DF选择之前的第-8天之后，FSH和抑制素B之间出现了波动。我们从24小时采样中获得的结果并不排除FSH和抑制素B波动频率更高（即振荡函数结构更精细）的可能性，尤其是在更短的时间间隔内。关于为什么在排卵前的中期FSH和抑制素B的振荡模式会发生变化，目前只能进行推测。可能是因为此时E2和抑制素A水平的上升在抑制FSH方面起了主导作用。E2和/或抑制素A的抑制作用可以解释为什么在第-6天到第-3天之间标准化平均FSH和抑制素B水平的吻合度较低（见图4A），尽管曲线的斜率相似，表明FSH对抑制素B水平仍有一定的正向影响。
本研究的一个方面是展示了FDA在分析单个周期数据时的有效性。在考虑内分泌系统的定性数学建模时，一个重要的普遍观点是，单个受试者（即单个周期）的重要性，因为不同受试者/周期之间的分泌模式可能是不同步的（37, 47）。当不同受试者/数据集之间的分泌模式不同步时（如FSH和抑制素B的情况），功能数据分析可能是一种有用的方法来揭示有意义的关系（39, 40, 42, 43）。这里的概念是，在FSH的影响下，有一组相关的窦状卵泡以波浪的形式进行发育（1, 2）。抑制素B由发育中的卵泡的颗粒细胞分泌（3）。有几个变量共同作用于反馈振荡功能：首先，发育中的卵泡数量是可变的，大约有4到14个（2）；其次，它们的发育状态各不相同，而抑制素B的分泌水平与卵泡大小相关（3, 25–29）；第三，由于血流量的不同，单个窦状卵泡可能接收到不同水平的FSH，即存在一个可变的时间延迟因素（48, 49）。这些差异导致在DF出现之前的早期卵泡阶段，不同受试者之间的FSH和抑制素B水平出现不同相位。通过对四个周期的累积数据进行功能数据分析，我们能够正确地对齐相位并计算出标准化的平均曲线。
FSH和抑制素B的水平是通过不同的检测系统测定的，但使用FDA方法得到的FSH和抑制素B曲线之间存在相当高的相关性，这增强了此处描述结果的可靠性。然而，这项研究的一个局限性在于仅分析了四个周期。进一步的研究可能会揭示FSH和抑制素B曲线的更精细结构以及其他调控特征。有趣的是，先前有研究指出，在同一张图表上合并不同患者的波动激素数据（如E3G（雌酮-3-葡萄糖醛酸酯）和LH）存在问题，因为“不同患者之间的振荡相位会相互抵消”（50）。此外，作者认为促性腺激素和E2之间的振荡可能是“最适卵泡存活”的一个因素。这一点需要进一步探讨，同时还需要研究FSH和抑制素B之间的明显振荡行为。另外，下丘脑-垂体轴的设定点可能会随年龄变化而改变，这会影响振荡（51）。
4.2.1 振荡行为作为调节卵巢窦状卵泡波动态和DF选择的潜在机制
振荡功能——即随时间变化的周期性激素水平——可能是生理系统中传递信息的首选方式（36, 37, 47, 52）。FSH和抑制素B之间的振荡如何调节单个窦状卵泡的发育并最终形成DF超出了本研究的范围。假设来说，不同卵泡中FSH水平的振幅和频率的变化可能是DF选择的一个因素，尽管目前尚不清楚具体机制。FSH可能对非生殖组织（前列腺、脂肪组织、心脏、骨骼、免疫细胞）有重要影响，因此振荡行为在这些非典型组织中的信号传递中可能也很重要（53）。
本研究的另一个局限性在于没有对卵泡的大小和数量进行FDA分析，也没有将其与相应的FSH和抑制素B水平结合起来。通过连续超声检查确定的发育中窦状卵泡的大小和数量数据矩阵，以及随时间变化的FSH和抑制素B水平，可能会进一步揭示振荡调节的作用。这项初步研究的另一个局限性是仅分析了四个周期，并未研究同一女性体内FSH和抑制素B的变化性。此外，血液采样仅在早晨进行了一次，其他潜在变量（如压力和睡眠）也未被考虑在内。
总之，对四个个体周期的功能数据分析表明，在整个排卵周期中FSH水平会升高抑制素B的水平，尽管其他因素也会影响抑制素B的水平。此外，在DF选择之前的早期卵泡阶段，观察到FSH和抑制素B之间存在振荡关系。推测FSH和抑制素B之间的正负反馈循环特性可能在卵巢卵泡波的发育过程中起重要作用，从而导致DF的形成。
