鉴于对重组FSH分子的兴趣日益增加,研究比较了它们与纯化FSH的效果。Gutierrez-Reinoso等人(2025年)评估了bscrFSH在新的哺乳期奶牛SOV方案中的效果,比较了每24小时给药四次与每48小时给药两次、总剂量为240 μg的两种方案。接受四次注射的奶牛在第8天的卵巢结构更多(14.4 ± 1.2 vs. 12.8 ± 0.9),可移植胚胎更多(6.0 ± 0.5 vs. 5.2 ± 0.2),未受精卵子更少(0.1 ± 0.0 vs. 0.3 ± 0.1)。尽管存在这些差异,17β-雌二醇、FSH、LH和P4的循环浓度并未受到处理的影响。这些结果表明,四次给药的bscrFSH方案有效,且所需处理次数少于传统的六到八次纯化FSH注射方案,同时两次给药方案也能诱导出满意的超排卵反应,进一步降低了成本和处理难度。基于bscrFSH取得的进展,正在开发新的缓释制剂以减少注射次数并简化反刍动物超排卵期间的管理。在我们团队最近的一项研究中,Frata等人(2025年)比较了常规pFSH(225–450 IU)分八次给药与单次给药LA-rbFSH(125–200 μg)在牛和杂交牛及小母牛中的超排卵效果,发现总结构和可移植胚胎数量没有差异。然而,LA-rbFSH导致未受精卵子的比例更高(4.5% vs. 0%),而pFSH导致更多退化的胚胎(25% vs. 18.4%)。此外,值得注意的是,在同一奶牛身上重复四次LA-rbFSH处理并未影响超排卵反应或胚胎数量。Da Silva等人(2025年)报告称,在同步方案的第4天给予100 μg LA-rbFSH可以增加胚胎产量(5.0 vs. 2.8)和囊胚率(40.6% vs. 31.1%),与接受卵子采集用于体外受精的Gir牛(Bos indicus)对照组相比。因此,这些结果表明,LA-rbFSH不仅与传统pFSH方案同样有效,还减少了动物处理。Perecin等人(2025年)评估了使用重组牛生长激素(rBST)或LA-rbFSH对Nelore小母牛和奶牛的卵泡分布、胚泡(GV)阶段和跨膜投影(TZP)密度的影响,发现两种方案都能从小卵泡中获取更多COC,而LA-rbFSH增加了大卵泡中的卵子回收率以及GV3阶段的卵子比例。在奶牛中,rBST也促进了从小卵泡中回收COC;然而,在GV阶段分布或TZP密度方面没有显著差异。这些结果表明,重组激素可以策略性地选择以调节GV阶段的富集并改善体外成熟方案。这些发现凸显了重组促性腺激素,特别是bscrFSH和LA-rbFSH作为猪垂体来源产品的有前景的替代品的优势。此外,它们基于牛FSH序列开发,与rhFSH和LA-rhFSH不同(Viana等人,2024年;Khodadadi等人,2022年)。尽管仍存在一些局限性,包括需要优化剂量和给药方案以及大规模田间研究的有限可用性,但重组FSH在不同生产环境中的生物性能相当甚至更优(表1),同时提供了单次给药的可能性,从而减少了处理程序,最小化了动物压力。此外,细胞生物技术的进步,特别是使用CHO细胞系,使得这些分子的大规模生产成为可能,并有望在中长期内降低成本。因此,使用rFSH是开发更高效、标准化和可持续辅助生殖方案的有希望的工具,特别是为了满足对安全和可重复生殖生物技术的日益增长的需求,同时将对动物管理的影响降到最低。
**3.1 在反刍动物中使用reCG的研究** 随着基因表达和细胞培养技术的进步,已经开发出多种策略来生产具有与天然分子相当生物活性的功能性reCG。在不同的动物模型中进行了剂量-反应和现场研究(表2)。Villarraza等人(2021)在野外条件下评估了奶牛和母牛中的reCG,并将其性能与纯化eCG进行了比较,结果因剂量和方案而异。在非发情期奶牛中,140 IU剂量取得了最佳效果,妊娠率为45%,与eCG(42.9%)无差异。在非发情期的哺乳杂交肉牛中,140 IU reCG和400 IU eCG产生了相似的主导卵泡直径,并且两者都提高了排卵率;然而,reCG组的排卵发生得更早。在另一项针对安格斯奶牛(产后最多90天)的试验中,140 IU reCG或400 IU eCG获得了相同的妊娠率(58%),均显著高于其他处理组和对照组。总体而言,这些发现表明reCG有潜力替代eCG用于TAI。
**Villarraza等人(2021)** **杂交奶牛** 使用400 IU reCG的妊娠率显著低于400 IU eCG(12% vs. 58%)
**非发情期奶牛** FTAI后的妊娠率在100 IU reCG(33%)、140 IU reCG(45%)、200 IU reCG(30%)和400 IU eCG(42.9%)之间没有差异
**荷斯坦母牛** SOV后,2000 IU reCG增加了≥8 mm的卵泡数量、黄体数量和卵泡灌注,而2000 IU reCG与2500 IU eCG之间的黄体数量没有差异
**非发情期的哺乳杂交肉牛** FTAI方案期间的卵泡动态显示:主导卵泡直径没有差异;eCG处理组的排卵率更高(140 IU reCG:80%;400 IU eCG:71%),且排卵时间比eCG处理组更早
**哺乳安格斯奶牛** reCG处理组的妊娠率更高(105 IU reCG:54%;120 IU reCG:57%;140 IU reCG:58%;400 IU eCG:58%),与未处理对照组(41%)相比
**Cattaneo等人(2024)** **哺乳肉牛** FTAI后,reCG处理组的发情率和P/AI(受胎率)更高(105 IU:79.9%和53.5%;140 IU:76.9%和52.3%),与对照组(69.9%和44.4%)相比。FTAI后reCG(84 IU:38.6%;105 IU:37.1%;140 IU:36.2%)的P/AI也更高。84 IU reCG(54%)和300 IU reCG(59%)之间的P/AI没有差异,而105 IU reCG处理的奶牛的P/AI较低(41%)
**Carvalho等人(2026)** **奶牛** 两种剂量在FTAI后均提高了P/AI(105 IU reCG:45.2%;140 IU reCG:42%),与对照组(34.1%)相比。Rodríguez等人(2024) **初产和经产安格斯奶牛** 在Co-synch FTAI方案中,使用类似eCG的制剂(400 IU)处理后的发情表达高于未处理对照组(初产:68.9% vs. 45.0%;经产:75.5% vs. 68.8%)。在初产奶牛中,300 IU类似eCG的处理提高了受孕率(65.2%),与未处理对照组(48.3%)相比。同样,使用400 IU类似eCG处理的初产奶牛的黄体面积也增加了,且受孕率也更高
**Camozzato等人(2026)** **非发情期母羊** 105 IU reCG和400 IU eCG处理的母羊的卵泡生长更好。reCG的排卵率更高(88.9%和100%),与对照组(0%)相比。105 IU reCG的血清P4水平较低;季节转换期间的妊娠率和受孕率未受eCG处理影响
**Gretter等人(2025)** **Nellore奶牛** SOV后,100 μg LA-bscrFSH、100 μg LA-bscrFSH + 175 IU reCG或1.050 IU reCG处理组之间的排卵率和胚胎存活率相似;单独使用reCG的回收率较低;rFSH + reCG组合并未提高胚胎产量,reCG的效果与rFSH相当
**Bandeo等人(2025)** **水牛** 使用160 mg FSH和2500 IU eCG处理后获得了更高质量的卵子。使用FSH处理的水牛的胚胎产量更高,但与1050 IU reCG处理的水牛相比没有差异(1.5 vs. 1.05个胚胎/水牛/OPU)。reCG处理的卵裂率更高
**缩写说明:** eCG:马绒毛膜促性腺激素;类似eCG:类似eCG的糖蛋白;FTAI:固定时间人工授精;FTET:固定时间胚胎移植;IU:国际单位;LA-bscrFSH:长效重组牛促卵泡激素(bovine ripa-follitropin alpha);P4:孕酮;reCG:重组马绒毛膜促性腺激素。Cattaneo等人(2024)继续评估了在不同生产条件下reCG对妊娠率的影响,研究了其在基于雌二醇/孕酮的TAI方案中哺乳肉牛的效果。比较140 IU和105 IU时,使用reCG处理的奶牛显示出更高的发情表达和每次人工授精的妊娠率(P/AI)(105 IU:79.9%和53.5%;140 IU:76.9%和52.3%),与对照组奶牛(69.9%和44.4%)相比。在后续试验中,所有reCG剂量都倾向于提高P/AI(84 IU:38.6%;105 IU:37.1%;140 IU:36.2%;对照组:28.2%)。此外,reCG还与300 IU eCG进行了比较。接受84 IU reCG的奶牛的P/AI(54%)与eCG(59%)相当,均优于105 IU reCG组(41%)。总体而言,作者得出结论,reCG提高了哺乳肉牛的生育能力,尽管其效力与eCG相当,但过量使用reCG可能会降低P/AI。基于这些证据,后续研究进一步探讨了reCG剂量和方案持续时间对牛生育结果的影响。Carvalho等人(2026)在荷斯坦奶牛中进行了两项实验,评估了reCG的有效性。在第一项实验中,使用400 IU reCG或140 IU reCG处理的荷斯坦奶牛在FTAI后的妊娠率更高(36.8% vs. 37.2%),与未处理组(27.8%)相比。在第二项实验中,使用105 IU reCG处理的荷斯坦和荷斯坦×Gir奶牛的妊娠率没有显著差异(45.2% vs. 42%)。与之前的结果一致,这些数据加强了eCG和reCG之间的等效性。Rodríguez等人(2024)证明,类似eCG的糖蛋白的使用提高了牛的生殖性能。在用5天Co-Synch方案同步的安格斯奶牛中,该处理提高了初产(68.9% vs. 45.0%)和经产(75.5% vs. 68.8%)奶牛的排卵和TAI妊娠率。初产奶牛的受孕率也增加了(65.2% vs. 48.3%),以及BCS ≤ 4的经产奶牛(47.7% vs. 34.8%)。此外,类似eCG的处理还增加了初产奶牛的黄体面积,并倾向于提高血清孕酮浓度。Camozzato等人(2026)在季节性非发情期的南巴西母羊中进行的研究表明,使用eCG(400 IU)或reCG(105 IU)处理的母羊的卵泡生长更好。reCG组的排卵率更高(88.9%和100%),而对照组没有排卵。eCG和reCG处理组的黄体面积和血液灌注相似,但血清孕酮浓度在eCG组显著更高。在第二项实验中,eCG(95.27%)和reCG(88.97%)组的发情表达增加,而对照组(78.22%)则没有。然而,自然交配后的妊娠(46.53% vs. 50%)和受孕(51.45% vs. 56.78%)率在两组之间没有差异。这些结果表明,即使在季节性非发情期,reCG也能产生与eCG相当的生理反应;然而,需要进一步的研究来评估其在深度非发情条件下的影响。除了TAI应用外,最近的研究还强调了reCG在SOV和ET中的有效性。Rodrigues等人(2025)报告称,在ET受体中,比较reCG(105或140 IU)与纯化eCG(300 IU)时,排卵率和受孕率相似(分别为47%、55.1%和46.8%),初产Nelore奶牛的反应更高。关于体内胚胎生产,2000 IU reCG在超排卵期间增加了荷斯坦母牛的大卵泡数量和黄体数量。然而,2000 IU的reCG和2500 IU的eCG诱导的卵泡数没有显著差异(Villarraza等人,2021年)。Gretter等人(2025年)评估了rFSH(100 μg rFSH)、reCG(1050 IU reCG)及其组合(100 μg rFSH + 175 IU reCG)在Nelore母牛的SOV(超数排卵)方案中的效果,发现各组的排卵率(rFSH:59%;rFSH + reCG:56%;reCG:56%)以及大卵泡和成熟卵泡的数量相似。各组之间的可存活胚胎数量(rFSH:4.3个;rFSH + reCG:4.1个;reCG:3.9个)和胚胎存活率也相当,表明reCG在产生胚胎方面与rFSH相当有效。rFSH和reCG的组合并未提高胚胎产量,这进一步证实了单独使用任一促性腺激素都能获得类似的胚胎结果。总体而言,这些发现表明reCG是ET(体外受精)和SOV(超数排卵)项目中传统eCG和FSH的一个可行替代品,尽管仍需更广泛的评估以优化其应用。除了在牛和羊中的观察结果外,Bandeo等人(2025年)还比较了水牛在取卵(OPU)前使用pFSH、reCG和eCG的治疗效果,发现卵泡总数、卵母细胞或受精卵的数量没有差异。使用pFSH和eCG可以获得更高质量的卵母细胞,而使用pFSH处理的水牛的胚胎产量更高,但与使用reCG处理的水牛相比没有显著差异(每头水牛每次取卵产卵数分别为1.5个和1.05个)。然而,reCG处理后的胚胎裂变率更高。总体证据表明,eCG和reCG在诱导卵泡生长和排卵方面起着关键作用,有助于生殖程序的成功。reCG在不同物种和方案中的稳定表现突显了其生物效率和适用性。持续的研究对于优化剂量和评估长期生育结果至关重要。
Vitória Leite Di Domenico、Fabiane Pereira de Moraes和Natália Ávila de Castro进行了文献回顾并撰写了手稿初稿;Fernando Caetano de Oliveira和Diogo Magnabosco提供了总体监督并共同编辑了手稿;Fernando Caetano de Oliveira和Bernardo Garziera Gasperin编辑并审阅了最终版本的手稿。