非错义MYH9变异在MYH9相关疾病中的临床和功能评估

摘要

背景

MYH9相关疾病（MYH9-RD）是一种常染色体显性遗传病，其特征是血小板减少、巨型血小板以及包括肾病在内的多种系统性疾病表现。虽然大多数致病性的MYH9变异为导致显性负效应的错义替换，但非错义变异（尤其是影响剪接的变异）的致病潜力仍不明确。

方法

从HGMD®数据库中筛选出被标记为“DM”（致病性变异）或“DM？”（可能致病性变异）的MYH9（NM_002473.6）变异。排除错义变异和无法分析的变异后，共选择了10个内含子或单碱基缺失变异。通过HEK293T细胞中的微型基因检测评估了这些变异的剪接效应，并将其与SpliceAI的预测结果进行了比较。同时查阅了相关临床信息。

结果

在三个变异中确认了异常剪接现象：c.3838-2A>G、c.5765+2T>A和c.5765+2T>G。c.3838-2A>G变异导致第29外显子的框内跳跃，属于非截短型变异；而后两个变异则导致在最终外显子中插入了一个包含提前终止密码子的隐匿性50 bp外显子，这种外显子能够逃避无义介导的降解。这些具有剪接异常的变异与MYH9-RD表型相关，产生的异常蛋白质可能具有显性负效应。其余七个变异未显示出剪接异常，并且是在非MYH9-RD背景下报告的，这表明它们的致病性证据有限。SpliceAI的预测结果与实验结果一致。

结论

本研究提供了系统性的证据，证明某些异常剪接的MYH9变异可导致具有显性负效应的MYH9-RD。相反，之前被标记为“DM？”的几个变异未显示出功能或临床相关性，这支持了将它们视为良性或意义不明确的观点。将计算机预测与实验验证相结合有助于更好地解读变异，并对MYH9-RD的临床管理具有指导意义。