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本研究针对癌症免疫逃逸难题，通过筛选发现CDK4/6抑制剂palbociclib与III型Dearing株溶瘤病毒(Rt3D)联用可显著增强内质网应激(UPR)和干扰素(IFN)信号通路。该组合通过激活RIG-I/MDA5介导的RNA感知机制，上调HLA抗原呈递并诱导内源性逆转录病毒(ERV)表达，从而促进肿瘤细胞免疫原性死亡。研究为开发新型联合免疫疗法提供了理论依据，相关成果发表于《Nature Communications》。
癌症治疗领域长期面临肿瘤免疫逃逸的挑战，传统疗法往往难以有效激活抗肿瘤免疫应答。溶瘤病毒(Oncolytic Virus, OV)作为新兴治疗手段，能特异性感染肿瘤细胞并通过多种机制诱导细胞死亡，但其单药疗效有限。同时，细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂如palbociclib虽能阻滞细胞周期，但如何协同激活抗肿瘤免疫仍待探索。英国癌症研究所等机构的研究团队在《Nature Communications》发表重要成果，揭示了palbociclib与III型Dearing株呼肠孤病毒(Rt3D)联用的协同抗癌机制。
研究团队采用高通量筛选、转录组测序(RNA-seq)、蛋白质组学、流式细胞术和免疫肽组学等技术，结合人源化小鼠模型和临床样本分析。关键实验包括：小分子文库筛选鉴定协同组合；流式检测HLA分子表达；免疫荧光观察钙网蛋白(CRT)外露；ELISA定量干扰素分泌；以及基于Kaede转基因小鼠的免疫细胞追踪系统。
研究结果部分：
"Palbociclib增强III型Dearing株呼肠孤病毒(Rt3D)的抗癌效果和病毒防御反应"：通过80种小分子筛选发现palbociclib能显著增强Rt3D在BRAFV600E突变黑色素瘤细胞系A375中的细胞毒性。转录组分析显示联合治疗显著上调干扰素刺激基因(ISG)表达，蛋白水平验证了"病毒防御反应"相关蛋白的富集。
"Rt3D-palbociclib诱导的干扰素信号增强抗原加工机制和免疫原性"：联合治疗上调HLA I/II类分子表达，促进标准蛋白酶体向免疫蛋白酶体转换。免疫肽组分析鉴定出63个肿瘤-睾丸抗原(CTA)肽段，其中MAGEA4来源肽段显著增加。同时检测到ATP和HMGB1释放等免疫原性细胞死亡(ICD)标志物升高。
"Rt3D-palbociclib增加免疫细胞活化状态"：在免疫健全小鼠模型中，联合治疗显著增加肿瘤浸润CD8+ T细胞和NK细胞中CD69和颗粒酶B的表达。通过Kaede-mCherry双标记系统证实，联合治疗促进树突状细胞(DC)的CD86和PD-L1表达上调。
"Rt3D-palbociclib增加RNA传感器表达和JAK/STAT依赖性内源性逆转录病毒(ERV)表达"：联合治疗下调组蛋白和DNA甲基转移酶表达，同时上调RIG-I(DDX58)和MDA-5(IFIH1)。RNA干扰证实RIG-I对联合治疗的细胞毒性至关重要。筛选发现MLT1C49等5种ERVs表达显著上调，且依赖JAK/STAT信号。
"Rt3D-palbociclib增强内质网应激"：蛋白组学显示联合治疗显著上调UPR相关蛋白。siRNA敲低实验证实PERK-eIF2α-ATF4和IRE1α-XBP1通路的关键作用。caspase-4抑制剂能部分挽救联合治疗诱导的细胞死亡。
"内质网应激增强RNA传感器驱动的干扰素反应"：非病毒工具化合物(如thapsigargin和poly I:C)验证了UPR与RNA传感通路的交叉对话。IRE1α抑制剂STF-083010可降低IFNβ产生，而PERK抑制剂GSK2656157则增强IFNβ表达。
研究结论指出，CDK4/6抑制剂palbociclib能通过双重机制增强Rt3D疗效：一方面作为ER应激增敏剂，通过UPR通路促进肿瘤细胞死亡；另一方面增强dsRNA传感通路，上调干扰素应答和抗原呈递。这种协同作用导致：1)染色质重塑和ERV表达；2)免疫蛋白酶体转换和肿瘤抗原呈递；3)DC活化和T细胞浸润增加。该研究首次在肿瘤细胞中证实UPR与PRR信号通路的交叉对话，为开发基于CDK4/6抑制剂与溶瘤病毒的联合免疫疗法提供了新思路。
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