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关于细胞周期研究的一个问题是，尽管人们都认为在S期促进复制蛋白的磷酸化能激活DNA的复制，但磷酸化蛋白的详细生物效应很难确定。Araki and colleagues在Nature上的报道提供了一些证据表明芽殖酵母中促进复制蛋白Sld2依赖CDK（cyclin-dependant kinase）的磷酸化对于染色体的复制是必需的。
Sld2是一个染色体DNA复制早期需要的蛋白质，它有六个可能的CDK磷酸化位点，将其中的任何一个突变对酵母来说都是致死的。
Araki and colleagues首先在电泳分析中，确定了Sld2的迁移率不同的两个条带，迁移率较低的是非磷酸化的条带，他们发现非磷酸化的条带在S期早期存在，随后消失。他们在体外分析中确定Sld2能被S期CDK所磷酸化。
研究者接着用磷酸化位点突变的Sld2进行研究，看看它对于染色体DNA复制是否是必需的。他们发现将其中任何一个位点突变与正常Sld2的功能一样，将所有6个位点全部突变则功能丧失，这说明Sld2的6个被磷酸化位点功能是冗余的。位点全部突变的Sld2电泳迁移率不再出现两个条带。这些说明磷酸化对于Sld2的正常功能是重要的。
在染色体DNA复制开始的时候，Sld2与Dpb11形成复合物。研究者发现磷酸化位点全部突变的Sld2不能再与Dpb11形成复合物，这说明Sld2的磷酸化确实对其功能是非常重要的。
在裂殖酵母中drc1是与Sld2非常同源的蛋白因子，它是否也与Sld2类似，需要磷酸化才能行使正常的功能呢？
相关文章及链接：
ORIGINAL RESEARCH PAPERS
Masumoto, H. et al. S-Cdk-dependant
phosphorylation of Sld2 essential for chromosomal DNA replication in budding
yeast. Nature 415, 651-655 (2002) |
Article |
PubMed |
ISI |
FURTHER READING
Kamimura, Y. et al. Sld2, which
interacts with Dpb11 in Saccharomyces cerivisiae, is required for chromosomal
DNA replication. Mol. Cell. Biol. 18, 6102-6109 (1998) |
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ISI |
Kelly, T. J. & Brown, G. W. Regulation of chromosome replication. Annu. Rev. Biochem. 69, 829-880 (2000) | PubMed | ISI |
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