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本研究针对肺纤维化中成纤维细胞-肌成纤维细胞分化的分子机制不明问题，揭示了组蛋白H3K9乳酰化通过增强METTL3转录促进IncRNA Inc668的m6A修饰，YTHDC1相分离介导m6A-Inc668经SRSF3-ALYREF-XPO5复合体核输出，进而稳定宿主基因PICALM表达加剧纤维化的新机制，为肺纤维化治疗提供了新靶点。
肺纤维化作为一种致命的慢性肺部疾病，其核心病理特征——成纤维细胞向肌成纤维细胞的异常分化，一直是科学家们试图破解的谜题。尽管已知转化生长因子TGF-β1等因子参与这一过程，但隐藏在RNA层面的调控机制仍如雾里看花。尤其令人困惑的是，那些穿梭于细胞核与胞质之间的长链非编码RNA（lncRNA），它们如何突破核膜屏障、又在纤维化中扮演何种角色？这项由滨州医学院附属医院团队发表在《Cell Death and Disease》的研究，首次揭示了RNA修饰与相分离现象协同调控lncRNA核输出的精妙机制。
研究人员运用了多种前沿技术：通过BLM诱导的小鼠肺纤维化模型和TGF-β1刺激的人胚肺成纤维细胞（MRC-5）建立体外分化模型；采用m6A甲基化RNA免疫沉淀（MeRIP）和染色质免疫沉淀（ChIP）揭示组蛋白H3K9乳酰化对METTL3的转录调控；结合荧光原位杂交（FISH）和核质分离实验追踪Inc668的亚细胞定位；利用荧光漂白恢复（FRAP）和截突变体验证YTHDC1相分离特性；通过RNA pull-down和免疫共沉淀（Co-IP）解析SRSF3-ALYREF-XPO5复合体组装机制。
"高度表达的Inc668促进肺纤维化过程中的成纤维细胞-肌成纤维细胞分化"章节显示，在TGF-β1刺激下，全长1139bp的Inc668表达显著上调，且呈现从核内向胞质的转位现象。功能实验证实，干扰Inc668可抑制α-SMA、COL1A等纤维化标志物表达，而过表达则促进细胞增殖迁移，提示其促纤维化作用。
"YTHDC1协助METTL3促进Inc668的N6-甲基腺苷修饰"部分揭示了表观遗传调控级联：组蛋白H3K9乳酰化富集于METTL3启动子区增强其转录，进而催化Inc668第555位腺苷6A修饰。YTHDC1不仅识别该修饰，还通过结合METTL3形成正反馈循环，显著延长Inc668半衰期。特别值得注意的是，A555C点突变可完全破坏YTHDC1与Inc668的结合，凸显该位点的核心地位。
研究最精彩的发现体现在"Inc668的核输出依赖YTHDC1相分离"部分。免疫荧光捕捉到YTHDC1在TGF-β1刺激下形成动态核凝聚体，1,6-己二醇处理可使其解体。截断YTHDC1的274-294氨基酸无序区（IDR）后，其相分离能力丧失，且无法挽救YTHDC1敲低导致的Inc668核滞留。这首次证明lncRNA的核输出需要读者蛋白的相分离特性作为"分子胶水"。
"相分离YTHDC1通过SRSF3-ALYREF-XPO5转运复合体促进Inc668核输出"章节描绘了完整的输出通路：YTHDC1液滴招募剪接因子SRSF3，后者与核转运受体ALYREF、输出蛋白XPO5形成"核孔列车"。当YTHDC1相分离受阻时，SRSF3与XPO5的核定位及ALYREF的核质穿梭均发生紊乱，导致Inc668滞留核内。
在机制下游，"Inc668通过增强PICALM mRNA稳定性促进肺纤维化"的实验证实，胞质Inc668能稳定其宿主基因PICALM的mRNA，促进肌成纤维细胞转化。动物实验显示，腺病毒介导的Inc668干扰可改善BLM模型小鼠的肺功能参数和纤维化程度，而患者血液中Inc668水平与疾病严重程度正相关。
这项研究开创性地将三个前沿领域——RNA修饰、相分离和lncRNA生物学有机衔接：首先阐明H3K9乳酰化-METTL3-m6A-Inc668的转录调控轴；其次揭示YTHDC1相分离作为lncRNA核输出的"分子开关"；最后解析Inc668-PICALM的促纤维化通路。这不仅为理解lncRNA时空动力学提供了新范式，更提示靶向YTHDC1相分离界面或可成为治疗肺纤维化的新策略。正如研究者强调，该发现为开发基于RNA修饰和相分离调控的精准疗法奠定了理论基础。
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