肝脏表达的抗菌肽（LEAPs）是一类富含半胱氨酸残基的血液来源抗菌肽（AMPs）（Howard等人，2010年）。根据二硫键的数量，它们被分为两种类型：肝脏表达的抗菌肽1（LEAP1）和肝脏表达的抗菌肽2（LEAP2）（Krause等人，2000年；Krause等人，2003年）。LEAP1含有八个保守的半胱氨酸残基，形成稳定的β-折叠结构，而LEAP2含有四个保守的半胱氨酸残基，生成两对二硫键（Wang等人，2024年）。LEAP1后来在人类尿液中被发现，并被重新命名为hepcidin，它是研究最广泛的抗菌蛋白之一（Liang等人，2013年）。相比之下，关于LEAP2的研究相对较少（Liang等人，2013年）。
LEAP2于2003年首次在人类血液超滤液中被发现（Howard等人，2010年；Krause等人，2003年）。由于其在疾病状态下血浆中的含量增加，它被归类为抗菌肽（Francisco等人，2020年；Sakai等人，2021年）。作为第二种从血液中提取的人类抗菌肽，LEAP2在肝脏中合成并以多种剪接变体形式分泌到血液中以对抗病原体（Krause等人，2003年）。LEAP2基因包含三个外显子和两个内含子，其结构特征包括一个信号肽、一个前肽和一个从前体蛋白切割而来的成熟肽（Henriques等人，2010年；Howard等人，2010年；Sosinski等人，2025年）。人类LEAP2的前体蛋白由77个氨基酸残基组成。最初的22个氨基酸（残基1至22）作为信号肽，而残基23至37在翻译后修饰过程中被去除，最终形成成熟的LEAP2肽（残基38至77）（Liu等人，2023年；Sosinski等人，2025年）。早期研究表明LEAP2在抗菌免疫防御中起着关键作用，可清除多种病原体，包括Bacillus subtilis、Bacillus megaterium、Micrococcus luteus和Neisseria cinerea（Henriques等人，2010年；Yu等人，2024年）。最近的研究发现，小鼠（Mus musculus）的LEAP2可作为胃饥饿素受体—生长激素分泌促进受体1a（GHSR1a）的拮抗剂，抑制胃饥饿素-GHSR1a相互作用及随后的生长激素分泌（Cornejo等人，2021年；Ge等人，2018年）。此外，LEAP2还调节成纤维细胞生长因子和活化素信号通路，影响胚胎发育，并在其他物种中调节单核细胞/巨噬细胞（MO/MФ）的极化（Chen等人，2019年；Thiébaud等人，2016年）。这些发现表明LEAP2不仅在免疫防御中起重要作用，还可以作为代谢调节因子，尤其是在胃饥饿素信号通路中。
与哺乳动物类似，LEAP2在软骨鱼类、硬骨鱼类、两栖动物、爬行动物和鸟类中也是保守的（Chen等人，2019年；Chen等人，2023年；Ishige等人，2016年；Liang等人，2013年；Liu等人，2020年；Thiébaud等人，2016年；Wang等人，2024年）。在哺乳动物中保守的-RXXR-切割基序在硬骨鱼类中也得到保留，反映了该区域的进化稳定性（Krause等人，2003年；Zhang等人，2004年）。与哺乳动物只有一个LEAP2同源物不同，大多数硬骨鱼类至少有两种LEAP2异构体，有些物种甚至有三种（Liu等人，2023年；Xu等人，2011年；Yang等人，2014年）。尽管LEAP2是在二十多年前发现的，其哺乳动物中的作用越来越清楚，但由于可用研究模型的限制，硬骨鱼类LEAP2的研究进展相对缓慢。LEAP2被认为是硬骨鱼类先天免疫对抗病原体的关键组成部分，其表达与免疫反应紧密相关，并作为多种免疫因子的调节因子（Liu等人，2010年）。尽管鱼类中的LEAP2异构体多样，但大多数研究表明它们参与了抗菌反应（Sosinski等人，2025年），这表明抗菌活性在进化过程中是保守的。例如，普通鲤鱼（Cyprinus carpio）在感染Vibrio anguillarum后皮肤中的LEAP2表达增加，表明其在硬骨鱼类黏膜屏障防御中可能发挥作用（Yang等人，2014年）。然而，不同鱼类物种之间的LEAP2表达模式存在显著差异。例如，金鲷鱼（Trachinotus ovatus）的LEAP2在肝脏中的表达量最高，在肠道中的表达量最低，而大黄鲷鱼（Larimichthys crocea）的肠道转录水平高于肝脏（Lei等人，2020年；Li等人，2014年）。这些发现强调了LEAP2结构和功能的进化保守性以及物种特异性适应性。
先前的研究表明LEAP2在抗菌免疫防御中起作用（Chen等人，2019年；Wang等人，2024年；Zhu等人，2025a），然而，对其家族成员之间抗菌活性的比较研究仍然很少。作为全球重要的淡水养殖物种，LEAP2家族成员在巨口黑鲈（Micropterus salmoides）中的抗菌活性尚不清楚。因此，在本研究中，我们使用巨口黑鲈作为模型，对其两种LEAP2家族成员LEAP2和LEAP2 Like（LEAP2L）的抗菌活性和机制进行了比较分析，以阐明它们在先天免疫防御中的功能差异。我们首先对LEAP2和LEAP2L在脊椎动物物种中的保守性进行了分析，以研究它们的进化保留情况。随后进行了全面的结构、电荷分布和疏水性分析，以阐明它们的理化性质。基于这些基础分析，我们进一步比较了它们的抗菌活性、杀菌动力学和作用机制。最后，我们在体内验证了它们的抗菌效果，并评估了它们对Aeromonas hydrophila感染的保护作用，从而将体外的研究结果与生理相关性联系起来。结果揭示了早期脊椎动物LEAP2在抗菌免疫中的进化保守特征。
