典型兽用抗生素对番茄毒性机制差异的多组学关联分析:从生理抑制到代谢重编程

时间:2026年5月21日
来源:Journal of Hazardous Materials

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杨慧燕|谢一克|王浩宇|孙洪达|李先旭|姚向峰|丁佳|王倩|吕慧娟|本杰明·L·特纳|孙书娟|王军山东农业大学资源与环境学院,中国山东省泰安市,271018摘要兽用抗生素的广泛使用通过动物粪便污染土壤,导致植物吸收并造成环境损害。目前,关于各类抗生素的毒理学机制的研究仍然不足。因

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杨慧燕|谢一克|王浩宇|孙洪达|李先旭|姚向峰|丁佳|王倩|吕慧娟|本杰明·L·特纳|孙书娟|王军
山东农业大学资源与环境学院,中国山东省泰安市,271018

摘要

兽用抗生素的广泛使用通过动物粪便污染土壤,导致植物吸收并造成环境损害。目前,关于各类抗生素的毒理学机制的研究仍然不足。因此,本研究以番茄为实验对象,选择了三种代表性的抗生素——氯四环素(CTC)、恩诺沙星(ENR)和泰乐菌素(TYL),通过14天和28天的暴露实验系统评估它们的差异毒性及其相关的代谢机制。在个体水平上,抗生素显著抑制了番茄幼苗的生物量积累和光合作用,其中ENR对鲜重的抑制率最高为37.4%,对植株高度的抑制率为26.7%。相比之下,CTC对叶面积的抑制率为28%,对SPAD指标的抑制率为25.1%。此外,抗生素暴露还引发了番茄幼苗的氧化应激,其中TYL引起的SOD活性最高,达到18.3%。在根际微环境中,优势菌门Bryobacter的数量显著减少,同时细菌群落结构发生变化,网络复杂性增加,模块性降低。在抗生素压力下,微生物群落表现出不同的代谢反应:CTC增强了脂质代谢,ENR提高了碳水化合物代谢,TYL激活了核苷酸代谢。总之,抗生素通过抑制植物生长和破坏根际微生物组带来全球生态风险。这些物质的类别特异性毒性需要实施针对性的风险管理策略。

引言

在现代集约化畜牧业中,抗生素被广泛用作饲料添加剂以促进动物生长和预防疾病[1]。近年来,全球兽用抗生素的消费量稳步增加,其中高达88%通过粪便和尿液以原形排出[2],[3]。这一现象导致大量未吸收的抗生素进入环境,并在生态系统中持续存在。许多研究表明,环境中的抗生素残留物仍具有生物活性[4],如果处理不当,这些残留物可能通过灌溉和降水进入土壤生态系统,并被植物根部吸收。一旦被吸收,它们可以在土壤-植物系统中迁移、转化和积累,最终扰乱植物的生理过程[5]。通过食物链的营养传递,这些污染物有可能在体内积累,最终对人类健康构成风险。
四环素(TCs)、喹诺酮类(QN)和大环内酯类(MLs)因其成本效益和广谱抗菌特性而在畜牧业和家禽生产中得到广泛应用。然而,这些抗生素在环境中的高持久性导致其在土壤中的残留浓度高达mg·kg−1[6],[7]。抗生素残留物的高浓度对陆地生态系统,特别是土壤-植物系统,构成了显著的生态风险。这一问题引起了越来越多的科学关注,并成为环境和农业科学领域的重要研究重点。先前的研究表明,抗生素暴露会对植物产生一系列不良影响[8],[9],[10]。例如,10mg/L的TCs抑制了黑麦草和小麦的细胞生长,减少了光合色素的含量,并破坏了细胞膜的完整性,最终导致植物氧化损伤[11];800nM/L的QN通过抑制psbD活性降低了水稻的光合作用[12];400μg/L的MLs抑制了藻类的叶绿素生物合成,导致光合作用减弱和生长性能下降[13]。此外,抗生素的环境残留物通过改变根际微生物群落的结构和代谢产物的组成,对植物的生长和发育产生负面影响[14],[15],[16]。在现代饮食系统中,植物是人类和动物的基本食物来源。因此,研究抗生素在番茄幼苗中的生态毒性效应至关重要,不仅有助于评估其在农业土壤中的生态风险,还能为了解各类抗生素的植物毒性机制提供关键的科学见解。
CTC、ENR和TYL代表了三类使用率较高且环境持久性强的兽用抗生素(TCs、QN和MLs)。它们的结构稳定性、低水溶性和对土壤颗粒的强亲和力导致形成了持久的环境残留物,从而频繁被检测到[17],[18]。CTC和ENR在土壤中具有很强的吸附性,移动性低,衰减缓慢,半衰期从几十天到几个月不等。相比之下,TYL在环境中相对不稳定,通常在土壤中的半衰期仅为几天。尽管如此,这三种化合物都容易被微生物降解[19],[20]。相关研究表明,20mg/L的CTC降低了细胞内钙水平,从而改变了蛋白质合成的模式和程度,最终抑制了拟南芥的生长,并产生了其他毒性效应[21];40mg/L的ENR导致小麦根部氧化损伤,干扰了信号传导和激素调节,显著抑制了根部生长[22];100mg/L的TYL显著降低了土壤微生物的多样性和相对丰度,对土壤微生物群落产生了不利影响[23]。尽管已经进行了大量关于各种抗生素毒性的研究,但目前的研究主要集中在单个抗生素对植物生理参数的影响上。系统比较不同抗生素类别的毒性效应的研究仍然有限,将植物水平反应与根际微环境变化相结合的研究更为罕见。
作为重要的经济蔬菜作物,番茄幼苗对土壤中存在的化学污染物具有高度敏感性。因此,它们被广泛用作评估环境污染物生态毒性效应的模型植物。目前,大多数研究主要通过有限的常规指标来阐明抗生素的毒性机制。这些指标通常包括番茄幼苗的生长抑制、叶绿素含量的变化[24]以及抗生素暴露后根际微生物群落结构的变化[25]。全面研究不同抗生素类别的差异植物毒性,并同时考察它们对植物生理反应、根际微生物群落结构和代谢谱的影响仍然非常缺乏。因此,进行多层次实验以阐明植物对污染物的综合生理、微生物和代谢反应至关重要。这种方法对于系统理解典型兽用抗生素的植物毒性效应至关重要。
因此,本研究旨在通过综合生理学、生物化学和多组学方法,系统评估三种代表性兽用抗生素(CTC、ENR和TYL)对番茄幼苗的差异植物毒性。通过比较植物功能特征、氧化应激反应和能量代谢,阐明它们对根际微生物群落结构和代谢谱的类别特异性影响,并构建一个将植物生理与根际微环境动态联系起来的综合毒性反应网络,这一多维框架提供了对抗生素污染生态毒性风险的系统理解,并为安全蔬菜生产的风险管理策略奠定了科学基础。

章节片段

材料与试剂

本实验使用了由农友种苗(中国)有限公司提供的Millennium番茄种子。抗生素CTC、ENR和TYL均具有优质纯度,购自上海源业生物技术有限公司。丙酮(优质纯度)和乙醇(95%纯度)均购自国药集团。
实验用的盆栽土壤取自山东农业大学实验站农田的表土层(0–20cm)。

兽用抗生素对番茄生长发育的影响

番茄幼苗的表型反应直接反映了抗生素的生态毒性。总体而言,与对照组相比,所有处理组的鲜重(图1a)都受到了不同程度的抑制。在不同阶段中,ENR在14天时的抑制率最高,为37.4%。相比之下,TYL在28天时的抑制率更高,为42.1%。植株高度(图1b)的趋势与鲜重相似

结论

本研究结果表明,CTC、ENR和TYL都对番茄幼苗产生了生态毒性效应,尽管其潜在机制存在显著差异。在个体水平上,这三种抗生素均显著降低了番茄幼苗的生物量积累和光合作用能力,同时引发了氧化应激。分子对接结果提供了与观察到的表型反应一致的假设性分子解释。

环境意义

兽用抗生素的广泛使用通过粪便将大量残留物引入土壤,威胁作物安全和人类健康。本研究采用多组学方法评估了抗生素在番茄幼苗中的毒性。结果表明,生长抑制与氧化应激、根际微生物群落变化和特定代谢重编程有关。我们的发现为评估与抗生素相关的作物产量风险提供了新的框架

CRediT作者贡献声明

王军:撰写 – 审稿与编辑、监督、资源获取、概念化。孙书娟:撰写 – 审稿与编辑、监督、资金获取。本杰明·L·特纳:撰写 – 审稿与编辑、监督。吕慧娟:研究。王倩:研究。丁佳:研究。姚向峰:研究。李先旭:研究。孙洪达:研究、概念化。王浩宇:研究、概念化。谢一克:研究,

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文工作的竞争性财务利益或个人关系。

致谢

本研究得到了中国国家重点研发计划(2024YFD1701103)、国家自然科学基金(U2106212、U2006212、42177024、42407041)和泰安市“双十工程”(2024JSGG10)的支持。

注释

作者声明没有竞争性财务利益。

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