起源发射因子的动态调节将CDK活性与休眠起源的激活联系起来

摘要

真核细胞拥有的潜在复制起点远多于实际使用的数量，但在S期（尤其是复制压力下）复制起点的激活频率是如何调节的，目前仍不清楚。在这里，我们发现了一种调控机制：周期蛋白依赖性激酶（CDK）的活性控制着复制起点激活因子TRESLIN和MTBP的丰度及其在染色质中的定位，从而促进休眠复制起点的激活。在S期抑制WEE1激酶会提高CDK的活性，这会阻止PCNA-CRL4^CDT2对TRESLIN的降解，并增强TRESLIN与MTBP在染色质中的结合。在CDK活性过高的情况下，这种增强的结合对于提高解旋酶的招募和DNA合成是必要的。我们确定了TRESLIN中参与其降解的特定序列，并表明TRESLIN的稳定化对于CDK驱动的复制起点激活是必要的，但还不够充分。复制压力以剂量和时间依赖的方式调节TRESLIN的降解过程：急性高剂量羟基脲会抑制CDK活性并减少染色质中结合的TRESLIN；而长期低剂量使用羟基脲则会伴随CDK活性升高以及TRESLIN-MTBP和CDC45在染色质中的结合增加。总的来说，这些发现揭示了复制起点使用的一个调控点，这对基因组稳定性及激酶抑制剂的治疗应用具有重要意义。