摘要：绿原酸(CGA)可通过抗氧化、抗菌及促细胞迁移作用辅助糖尿病创面愈合，但其稳定性差、膜通透率低限制了其在慢性糖尿病中的应用。为此，研究人员采用一锅法(one-pot method)将萘基修饰二苯丙氨酸(Naphthalene-modified diphenylalanine, N-FF)与透明质酸(Hyaluronic acid, HA)混合，制备了一种可注射复合水凝胶，能够负载CGA递送至炎症创面并实现缓释给药，从而促进糖尿病创面愈合。研究人员通过流变学及形貌表征，以及体外生物相容性评价对该水凝胶进行了评估。结构上，该水凝胶呈现均匀的纳米纤维网络，赋予其增强的机械强度和稳定的载药能力。在小鼠创面模型中，治疗12 d后其可将创面面积缩小至7.99% ± 0.73%，与生理盐水组相比，肉芽组织增生、胶原沉积及微血管密度均增加。综上，上述结果表明该肽基复合水凝胶可促进局部血管生成及血管成熟，从而加速慢性糖尿病创面的愈合进程。该系统代表了一种开发生物活性敷料的有前景策略。尽管如此，其潜在分子机制尚待完全阐明，且在临床转化前需在大型动物模型中进行进一步验证。
论文解读：负载绿原酸(CGA)的萘基二苯丙氨酸/透明质酸(N-FF/HA)可注射肽基复合水凝胶促进糖尿病创面愈合的研究
一、研究背景与意义
糖尿病足溃疡(Diabetic Foot Ulcers, DFUs)等难治性糖尿病创面因血管生成受损、微环境失调及过度氧化应激，常停滞于炎症期无法进入增殖与重塑阶段。传统敷料仅提供被动物理覆盖，无法主动调控创面微环境。绿原酸(Chlorogenic Acid, CGA)虽具抗氧化、抗菌及促迁移活性，但存在稳定性差、膜通透率低及体内快速代谢等问题。短肽水凝胶特别是二苯丙氨酸(Diphenylalanine, FF)衍生物可通过π–π堆积和氢键自组装形成三维网络，与天然多糖透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)复合可获得更优机械性能与生物相容性。本研究在前期确定萘基修饰FF(N-FF)与HA最佳质量比1:4(w/w)基础上，构建负载CGA的可注射N-FF/HA复合水凝胶，旨在解决CGA局限并实现糖尿病创面的促愈合调控。该研究成果发表于《MedComm – Future Medicine》。
二、主要关键技术方法
研究人员采用一锅法将N-FF溶液与含CGA的HA溶液混合制备N-FF/HA-CGA复合水凝胶；通过试管倒置法与加热浴评估成胶性与热稳定性(相转变温度)；利用透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)观察纳米纤维网络与多孔形貌；以高效液相色谱(HPLC)测定载药率与pH 7.4下的体外累积释放曲线；通过旋转流变仪测定储能模量(G')与损耗模量(G")进行频率扫描流变学分析；采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测人皮肤成纤维细胞(Human Skin Fibroblasts, HSFs)与材料共培养后的细胞活力以评价体外生物相容性；建立链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)诱导的I型糖尿病小鼠背部全层圆形(直径10 mm)皮肤缺损模型，随机分为生理盐水(NS)、HA、N-FF/HA、游离CGA及N-FF/HA-CGA组，每3天给药，观察创面闭合率、体重及脏器系数；取创面组织行苏木精–伊红(Hematoxylin and Eosin, H&E)染色、Masson三色染色及CD31与α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)免疫组织化学染色评估再上皮化、胶原沉积与血管新生；取主要脏器行H&E染色与血清谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase, AST)、血尿素氮(Blood Urea Nitrogen, BUN)、肌酐(Creatinine, CRE)检测评估体内生物安全性；数据以均值±标准差(SD)表示，p<0.05为差异显著。
三、研究结果
2.1 Assessment of Thermal Stability and Injectability of Peptide-Based Composite Hydrogels（肽基复合水凝胶的热稳定性与可注射性评估）
N-FF与HA混合后溶液由透明变为乳白色并形成稳定凝胶，可经26 G针头顺畅挤出且保持形状不堵塞。N-FF/HA及各CGA负载组相转变温度均>100°C(最高达118–119°C)，而CGA-HA溶液组无凝胶形成且在约30°C即呈液态。表明N-FF引入显著提升复合体系热稳定性与可注射性，CGA负载未破坏成胶性能，该水凝胶可适应不规则创面并兼容高温灭菌。
2.2 Morphology Characterization and Rheological Analysis of Peptide-Based Composite Hydrogels（肽基复合水凝胶的形貌表征与流变学分析）
TEM显示N-FF/HA-CGA呈相互连接的纳米纤维网络，区别于HA的蜂窝状；SEM显示N-FF/HA及CGA负载组较HA呈现明显多孔架构，CGA负载后孔径增大利于药物扩散。HPLC测定载药效率随CGA浓度递增而比例升高。体外释放显示N-FF/HA-CGA组呈初始突释后继以持续释放达8 h以上，累积释放量约为单纯HA/CGA组的3倍。流变学频率扫描显示N-FF/HA组G' > G"且对频率相对不敏感，具稳定弹性和类固体行为；低浓度CGA(0.01%–0.02%)使G'、G"略升，0.1%–0.2% CGA则因干扰网络使模量下降约20%–30%。表明该复合水凝胶具理想纳米纤维网络、良好载药缓释能力与适宜机械强度。
2.3 In Vitro Assessment of the Biocompatibility of Peptide-Based Composite Hydrogel（肽基复合水凝胶的体外生物相容性评估）
不同浓度N-FF(50–500 μg/mL)与HA(50–500 μg/mL)处理后HSFs存活率轻微下降但仍>80%；HSFs直接接种于N-FF/HA及N-FF/HA-CGA水凝胶表面共培养24 h后细胞活力>80%。表明该肽基复合水凝胶具良好体外生物相容性及低细胞毒性。
2.4 In Vivo Assessment of Peptide-Based Composite Hydrogels for Diabetic Wound Healing（肽基复合水凝胶体内糖尿病创面愈合效果评估）
治疗第6天N-FF/HA-CGA组创面面积缩至初始约49.44%±15.34%(NS组63.59%±11.11%)；第12天N-FF/HA-CGA组残余创面面积为7.99%±0.73%，显著低于NS组(16.57%±1.25%)与游离CGA组(11.64%±1.13%)。各组小鼠体重无显著波动，主要脏器系数无差异。H&E与Masson染色示N-FF/HA-CGA组表皮结构更规整、增厚，肉芽组织增多，胶原纤维致密沉积且呈平行束状排列；CD31与α-SMA免疫组化显示N-FF/HA-CGA组微血管密度与新生的毛细血管周细胞标记显著上调。表明N-FF/HA-CGA水凝胶通过促进肉芽组织形成、胶原沉积及血管生成加速糖尿病小鼠创面闭合。
2.5 In Vivo Biosafety Evaluation of Peptide-Based Composite Hydrogel in a Diabetic Mouse Model（糖尿病小鼠模型中肽基复合水凝胶的体内生物安全性评价）
主要脏器H&E切片未见病理异常或明显炎性浸润；血清ALT、AST、BUN、CRE水平各处理组与NS组无显著差异。表明N-FF/HA-CGA水凝胶在体内无明显肝肾毒性及系统性不良反应，具备良好体内生物安全性。
四、讨论总结与结论翻译
讨论指出该N-FF/HA-CGA可注射复合水凝胶兼具可注射性、高孔隙率纳米纤维网络及CGA缓释特性，可维持创面湿润环境、允许气体交换与营养运输，并通过CGA可能的M2型巨噬细胞极化及下调JAK2/STAT3通路间接促血管生成，同时上调α-SMA促进肌成纤维细胞分化与创面收缩。研究局限性包括使用I型糖尿病小鼠模型而非更常见的II型，且CGA及水凝胶调控血管生成与炎症消退的具体信号通路尚未完全阐明，胶原平行束状排列提示需关注远期瘢痕形成风险并延长观察时间点。
Conclusion（结论）：
在本研究中，研究人员成功开发了一种由短肽与HA组成的可注射复合水凝胶，用于慢性糖尿病创面的系统性治疗。该水凝胶通过持续释放绿原酸(CGA)在创面部位发挥多重协同效应：缓解氧化应激并调节炎症反应，从而重塑免疫微环境以促进愈合。在此基础上，该系统进一步促进再上皮化、胶原沉积、肌成纤维细胞分化及血管生成，加速创面闭合。这种"先免疫调节、后组织再生"的程序化策略在应对糖尿病创面血管生成障碍这一关键病理挑战方面极具前景。该体系在慢性糖尿病创面治疗中具有临床转化潜力，并为未来探索复合水凝胶在药物递送与创面愈合中的应用奠定了基础。
