代谢功能障碍相关脂肪肝病（MASLD）已成为全球性的健康负担，其疾病谱从单纯性脂肪变性进展为代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH），甚至肝硬化和肝癌。目前虽有Resmetirom等药物获批，但MASLD的复杂病因和代偿机制仍驱动着新靶点的探索。长链非编码RNA（lncRNA）因其组织特异性表达和疾病关联性备受关注，然而其在MASLD中的作用机制尚不明确。同时，线粒体功能紊乱是MASLD的核心病理特征，但调控线粒体能量代谢的关键分子开关仍有待揭示。
为此，研究团队通过转录组学分析高脂饮食（HFD）诱导的MASLD小鼠模型，发现了一个新型lncRNA——Wee1-AS。该RNA位于Wee1基因位点的反义链，在肝细胞中高表达，尤其在中央静脉周围区域，且其表达在高脂饮食刺激下显著上调。机制研究表明，Wee1-AS通过双重模式激活CDK1/CYCLIN B1复合体：其一，通过空间位阻抑制转录机器与Wee1启动子结合，降低Wee1转录；其二，直接结合CYCLIN B1并抑制其泛素化降解，稳定蛋白水平。激活的CDK1/CYCLIN B1复合体转运至线粒体，磷酸化ATP5A、SIRT3等底物，增强线粒体复合体I活性和脂肪酸氧化能力，从而缓解肝脏脂质堆积。
研究还发现WEE1抑制剂Adavosertib可模拟Wee1-AS的保护效应，改善HFD小鼠的线粒体功能和脂肪肝表型。此外，团队鉴定了人源同源物LNC106435.1，其敲低同样导致线粒体功能受损，且在MASLD患者肝组织中表达升高，提示其临床相关性。
关键技术方法
研究利用RNA测序筛选HFD小鼠肝脏差异表达的lncRNA；通过腺相关病毒（AAV）载体在体内过表达或敲低Wee1-AS；采用单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析肝细胞亚群表达谱；通过RNA Pull-down、染色质免疫沉淀（ChIP）和蛋白稳定性实验验证分子互作；使用线粒体功能探针（MitoTracker、TMRM）和氧消耗速率（OCR）检测线粒体代谢；利用临床肝组织样本进行免疫组化验证。
Wee1-AS的鉴定与表达特征
通过cDNA末端快速扩增（RACE）技术，团队发现Wee1-AS转录本较数据库注释更长，且编码潜能评分为负值，确认其非编码属性。其在HFD或西方饮食（WD）喂养的小鼠肝脏中表达显著升高，scRNA-seq显示其在肝细胞中富集，主要定位于细胞质。RNA荧光原位杂交（FISH）进一步显示Wee1-AS在中央静脉周围肝细胞中高表达，提示其与肝脏分区代谢调控相关。
Wee1-AS改善MASLD症状与线粒体功能
AAV介导的Wee1-AS过表达显著降低HFD或CDAA-HFD喂养小鼠的肝脏重量、血清ALT/AST水平及肝脂质含量，并缓解纤维化和炎症反应。RNA-seq分析显示，Wee1-AS调控基因富集于脂质代谢和细胞周期相关通路。线粒体功能实验表明，Wee1-AS过表达增强复合体I和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性，改善线粒体形态；而其敲低则降低线粒体膜电位，增加活性氧（ROS）积累，抑制脂肪酸氧化。
Wee1-AS调控CDK1活性与CYCLIN B1稳定性
Wee1-AS敲低促进RNA聚合酶II和TFIIB在Wee1启动子的募集，降低抑制性组蛋白标记H3K9me3，从而增强Wee1转录。蛋白水平上，WEE1在线粒体外膜富集，其过表达抑制CDK1活性（Y15磷酸化升高）。另一方面，Wee1-AS直接结合CYCLIN B1，抑制其泛素化降解，促进CDK1活化（T161磷酸化）。免疫共定位和线粒体分馏实验证实Wee1-AS增强CYCLIN B1的线粒体转运。
Adavosertib通过抑制WEE1改善MASLD
WEE1抑制剂Adavosertib（30 mg/kg）治疗5周后，HFD小鼠的肝脂质沉积和线粒体功能异常显著逆转，且该效应被WEE1过表达抵消。值得注意的是，Adavosertib可挽救Wee1-AS敲低导致的线粒体功能障碍，证明其作用依赖于WEE1-CDK1/CYCLIN B1轴。
人源同源物LNC106435.1的功能保守性
LNC106435.1与小鼠Wee1-AS具有50.59%序列同源性，定位于细胞质，其敲低同样上调WEE1表达并损害线粒体功能。公共数据库分析显示，LNC106435.1在MASH患者肝组织中表达升高，且WEE1/p-CDK1Y15/CYCLIN B1蛋白水平与疾病严重度正相关，凸显其临床意义。
结论与展望
本研究首次揭示Wee1-AS作为代谢感受性lncRNA，通过调控WEE1-CDK1/CYCLIN B1轴增强线粒体脂肪酸氧化，从而抑制MASLD进展。其作用机制涉及转录干扰和蛋白稳定性调控双重模式，为lncRNA参与细胞周期蛋白代谢重编程提供了新范例。Adavosertib的疗效提示靶向WEE1可能是MASLD的可行治疗策略，而人源LNC106435.1的保守功能则为其临床转化奠定基础。未来需进一步探索Wee1-AS上游调控因子及其在肝脏分区代谢中的时空特异性作用，并在大样本队列中验证LNC106435.1的预后价值。
