一种新型的Tie2xVEGF双特异性抗体融合蛋白，通过直接激活Tie2并中和VEGF，展现出更强的治疗效果

摘要

背景

激活内皮细胞中的Tie2信号通路已被视为改善眼部疾病中血管异常和通透性增强的潜在治疗策略。早期的治疗策略主要着眼于抑制Tie2的拮抗配体——血管生成素-2（Ang2），从而间接促进Tie2的激活。然而，越来越多的证据表明，仅通过阻断Ang2来间接激活Tie2并不足以提升治疗效果，这就凸显出需要使用Tie2激动剂。此外，由于仍需抑制由血管内皮生长因子（VEGF）引发的新血管形成，因此通过直接激活Tie2并同时中和VEGF，或许能够实现更好的治疗效果。

方法

通过互补决定区靶向突变文库进行噬菌体展示筛选，最终鉴定出一种亲和力优化的Tie2激活抗体MT-101。随后，将MT-101与五种不同的抗VEGF分子结合，制备出Tie2xVEGF双特异性抗体，并利用内皮细胞检测这些抗体在Tie2和VEGF信号通路中的作用。接着，在小鼠氧诱导性视网膜病变和激光诱导的脉络膜新生血管形成模型中，评估了由MT-101和VEGFR结构域构成的双特异性抗体MT-103的治疗效果，同时将其与抗VEGF药物阿柏西普以及Ang2xVEGF双特异性抗体进行比较。

结果

MT-101能够激活包括AKT-eNOS和ERK级联反应在内的Tie2信号通路，在氧诱导性视网膜病变和激光诱导的脉络膜新生血管形成模型中的治疗效果与阿柏西普相当。通过对比五种不同的Tie2xVEGF双特异性抗体，我们选出了效力最强的MT-103，它是通过将VEGFR1/2结构域与MT-101结合而制成的。在视网膜内皮细胞中，MT-103在抑制VEGF信号通路和降低细胞通透性方面的效力分别比Ang2xVEGF双特异性抗体高约4倍和5倍。此外，与阿柏西普相比，MT-103在激光诱导的脉络膜新生血管形成模型中能使新血管形成减少14%；而在氧诱导性视网膜病变模型中，则能将血管渗漏程度降低20%。同时，与Ang2xVEGF双特异性抗体相比，MT-103还能更有效地激活Tie2并增强周细胞的覆盖，从而实现更好的血管稳定作用。

结论

这些研究结果表明，结合直接激活Tie2与阻断VEGF的治疗策略，相比单独中和VEGF或同时抑制Ang2和VEGF，可能具有更优异的治疗潜力，是一种极具前景的治疗方案，值得进一步研究，以用于治疗多种眼部疾病。