甲型流感病毒双螺旋核糖核蛋白复合物（RNP）负责执行病毒基因组RNA（vRNA）的转录和复制，在病毒生命周期中起着至关重要的作用。RNP的形成发生在病毒感染细胞的细胞核内，而参与这一过程的核结构域仍不清楚。来自日本的研究人员发表在ASM Journal上的一项研究报告表明核仁是功能性RNP形成的一个重要部位。研究人员用几种显微技术揭示了病毒核糖核蛋白复合物的主要成分——病毒核蛋白（NP）暂时停留在核仁中，核仁是核糖体核糖核酸/蛋白质的组装场所，它的形成依赖于核仁定位信号。NP上核仁定位信号（NoLS）的突变可阻断双螺旋RNP的形成，导致病毒RNA合成能力的丧失，而NoLS的异位融合使NP突变体形成功能性双螺旋RNP。此外，病毒感染细胞的核仁破裂会抑制NP组装成双螺旋RNPs，导致病毒RNA合成复制显著减少。这个发现证明了核仁是RNP形成和病毒复制的重要位置，NP迁移到核仁是功能性RNP形成的关键步骤，显示了核仁在流感病毒生命周期中的重要性。
甲型流感病毒是单链负义RNA病毒。病毒基因组RNA（vRNA）片段以核糖核蛋白复合物（RNP）形式存在，包含多个核蛋白、由PB2、PB1和PA亚基组成的RNA依赖RNA聚合酶复合物。核糖核蛋白复合物RNP负责转录和复制vRNAs。在转录过程中，vRNA被转录成带有5′-帽端和3′-聚腺苷酸尾的mRNA；而在复制过程中，vRNA 被复制为 cRNA 复制中间体，而cRNA作为一个模板来产生更多的vRNAs。这些复制过程伴随着RNP组装，新生的vRNA和cRNA的5′端与一个新合成的病毒聚合酶复合物相连，依次被多个NP包被并分别组装成双螺旋vRNPs和cRNPs.
与大多数RNA病毒不同，甲型流感病毒是在感染细胞的细胞核内转录并复制其基因组的，因此，甲型流感病毒的转录、复制和RNP的形成严重依赖于宿主的核机制。由于NP定位于核仁，研究人员猜想 NP 组装成双螺旋 RNP 依赖于核仁。于是研究人员采用了几种微观和生化方法来研究核仁在功能性RNP形成中的重要性——包括使用缺乏核仁定位信号的NP突变体，以及导致细胞核仁破裂的化合物。
核仁 NP 定位对功能性 RNP 形成的重要性。
RNP中只有NP具有一个核定位信号，一个核仁定位信号（NOLS）。为了研究核仁 NP 定位对 RNP 形成的重要性，研究人员构建了两个 NoLS 突变 NP：一个在NoLS 中具有丙氨酸取代的 NP NoLSmut，仅定位在核质中，另一个是反向突变 NoLS-NP NoLSmut，其融合了完整的 NoLS。 NP NoLSmut 的氨基末端，促进其核仁定位。实验结果表明，NP的核仁定位对于病毒RNA的转录和复制都至关重要。
核仁破坏对功能性 RNP 形成的影响。
考虑到核仁 NP 定位对于正确 RNP 形成的必要性，核仁结构破坏将严重影响 RNP 形成。为了验证这一假设，研究人员使用了选择性 RNA 聚合酶 I (Pol I) 抑制剂 CX5461。 CX5461 通过 Pol I 活性抑制引起核仁破坏。实验结果表明，核仁对于将 NPs 正确组装成功能性双螺旋 RNPs 是必需的。
进一步实验分析证明了甲型流感病毒功能性双螺旋 RNP 的形成依赖于 NPs 的核仁迁移。研究结果强调了核仁在流感病毒生命周期中的重要性。有必要进一步研究导致 RNP 形成的核仁内宿主因子，以了解 RNP 形成的详细机制，这将有助于开发针对流感病毒的新型抗病毒药物。
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