随着全球人口老龄化进程加速，骨关节炎(Osteoarthritis, OA)已成为临床最常见的肌肉骨骼疾病，被列为致残第四大原因。这种以关节软骨退变、骨赘形成为特征的慢性退行性疾病，不仅给患者带来巨大痛苦，还造成沉重的社会经济负担。目前临床治疗手段主要以缓解症状为主，无法阻止疾病进展，许多终末期患者最终只能接受关节置换手术。因此，探寻新的治疗靶点和开发有效的干预策略迫在眉睫。
在这一背景下，人间充质干细胞(human Mesenchymal Stem Cells, hMSCs)因其具有多向分化潜能，特别是向软骨细胞分化的能力，以及抗炎和免疫调节特性，成为细胞治疗策略的研究热点。增强hMSCs的软骨向分化能力被认为是软骨再生和OA治疗的可行策略。然而，hMSCs的软骨向分化过程极其复杂，受到蛋白质、基因、RNA及细胞因子等多重机制调控，其中转录因子SOX9作为SRY相关HMG盒蛋白家族成员，在调控软骨细胞增殖分化中起着核心作用。
近年来，长链非编码RNA(long non-coding RNAs, lncRNAs)作为长度超过200个核苷酸的非编码RNA分子，被发现在软骨生物学中扮演重要调控角色。尽管已有研究表明某些lncRNAs可通过竞争性内源RNA(competing endogenous RNA, CeRNA)机制间接影响SOX9表达，但基因组邻近lncRNAs是否直接调控SOX9表达仍待深入探索。基于此，研究人员开展了本项研究。
关键技术方法包括：收集50例OA患者软骨标本进行基因表达分析；通过慢病毒感染建立Linc01152稳定敲低/过表达的hMSCs细胞系；采用阿尔新蓝/番红O染色评估软骨分化；构建裸鼠软骨缺损模型进行体内修复验证；通过RNA测序、Western blotting和双荧光素酶报告基因检测分析NF-κB信号通路活性。
Linc01152与SOX9在软骨形成和临床OA标本中呈负相关
研究人员首先在OA患者临床标本中发现，SOX9在骨关节炎侧(PC)组织中的表达显著低于相对正常侧(NC)，而位于SOX9基因反义链的Linc01152则呈现相反表达趋势。线性回归分析显示，两者表达水平呈显著负相关(Y = -37.29X + 22.91, r = -0.3435, p = 0.0146)。在hMSCs软骨分化过程中，SOX9表达随时间推移逐渐上升，而Linc01152水平逐步下降，进一步证实了这一负相关关系。亚细胞定位分析表明Linc01152与SOX9主要定位于细胞质。
Linc01152通过靶向SOX9抑制hMSCs的软骨分化
功能实验表明，Linc01152过表达显著抑制软骨形成，而其敲低则增强软骨表型。分子水平上，Linc01152过表达导致SOX9及其下游软骨标志物(SOX5、SOX6、COL9A1、COL2A1、聚集蛋白聚糖和COMP)表达下调，敲低则产生相反效果。拯救实验证实，同时沉默SOX9可完全逆转Linc01152敲低带来的促软骨分化效应，表明SOX9是Linc01152调控软骨分化的关键介质。
Linc01152敲低促进体内软骨修复
动物实验显示，移植Linc01152沉默hMSCs的裸鼠在4周后软骨缺损几乎完全修复，而对照组仍存在明显缺损。micro-CT分析表明，实验组骨体积分数(BV/TV)、骨矿物质密度(BMD)和小梁骨数量(Tb.N)显著增加，小梁分离度(Tb.Sp)降低。组织学检查进一步证实实验组软骨基质沉积增强，SOX9表达显著上调。
Linc01152沉默软骨细胞中炎症信号通路的参与
转录组测序发现Linc01152敲低导致571个基因上调和403个基因下调，KEGG富集分析显示差异基因显著富集于NF-κB等炎症相关通路。Western blot验证Linc01152敲低显著抑制IKKα/β磷酸化，降低p-p65/p65和p-IκBβ/IκBβ比值。双荧光素酶报告基因检测证实NF-κB转录活性被显著抑制。
激活NF-κB信号通路可逆转Linc01152敲低的效果
LPS激活NF-κB信号可显著逆转Linc01152敲低带来的促软骨分化效应，番红O染色和软骨标志基因表达均恢复至对照组水平。机制上，LPS处理恢复了IKKα/β磷酸化水平，表明NF-κB通路是Linc01152的下游效应器。
本研究首次揭示Linc01152通过直接负调控SOX9表达抑制软骨分化，其沉默可促进软骨修复，机制与NF-κB信号通路抑制密切相关。这些发现不仅深化了对lncRNAs在软骨生物学中作用机制的理解，更重要的是为OA治疗提供了新的潜在靶点。尽管Linc01152与SOX9之间的精确调控机制以及NF-κB通路的具体作用方式仍需进一步探索，但本研究无疑为开发基于lncRNAs的OA治疗策略奠定了重要理论基础。
该研究论文发表于《Osteoarthritis and Cartilage》期刊，为骨关节炎的发病机制研究和治疗靶点开发提供了新的视角和方向。
