从卡斯塔诺普西斯·卡拉西福尔米斯（Castanopsis calathiformis）中提取的未鉴定的三萜类鞣花单宁及其潜在的抗增殖和降血糖活性

广西特有植物Castanopsis calathiformis叶中分离出九种三萜ellagic acid衍生物，其中六种为首次发现。通过综合光谱分析和电子圆二色谱确定结构，发现新型三萜骨架和三苯甲酰基取代特征。药理活性显示多数化合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性显著（IC50 22.8-73.3 μM），部分对肺癌、结肠癌等癌细胞有抑制作用。

王雅峰|鲍英荣|何瑞杰|庞娜|刘张斌|杨秉元|李贵勤|黄永林

中国广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所植物功能植物化学与可持续利用重点实验室，桂林，541006，中国

摘要

含有二苯酰基团的三萜类鞣花单宁是Castanopsis属植物的特有成分。从Castanopsis calathiformis中分离出了九种三萜类鞣花单宁，包括六种未描述过的三萜类鞣花单宁（1–6）和三种已知类似物：23,24-二-O-没食子酰-2α,3β,23,24-四羟基奥莱烷-12-烯-28-酸 28-O-β-D-吡喃糖苷（7）、castanopsinin F（8）、3,24-(S)-六羟基二苯酰-23-O-没食子酰-2α,3β,23,24-四羟基乌尔斯-12-烯-28-酸（9）。化合物1–2和4含有三苯酰基团而非二苯酰基团。化合物5和6具有独特的三环笼状结构。通过综合光谱分析确定了它们的结构，电子圆二色光谱数据和电子圆二色计算进一步确认了其绝对构型。生物活性评估显示，化合物1–4、8和9表现出较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性，IC₅₀值介于22.8至73.3 μM之间，超过了阳性对照物阿卡波糖（IC₅₀ = 1616.0 μM）。此外，化合物1、4和6还对五种人类肿瘤细胞系（包括A549（肺癌）、HCT116、HeLa、HepG2和MCF-7）具有抗增殖活性，其中化合物4对MCF-7细胞系表现出轻微的抗增殖作用。

引言

萜类化合物是结构最多样化的天然产物，具有复杂的多环骨架和多个立体中心。三萜类鞣花单宁是萜类化合物的天然衍生物，是一类含有三萜和鞣花单宁基团的特殊代谢物（Khanbabaee和Van Ree，2001）。三萜类鞣花单宁是由三萜与单宁（包括没食子酰基和独特的六羟基二苯酰基（HHDP）等基团）酯化形成的。有趣的是，大多数含有没食子酰基的三萜类化合物来自壳斗科（Fagaceae）植物，而多种含没食子酰基的三萜类化合物仅从Castanopsis属植物中分离得到（Kim等，2020；Ni等，2024）。Castanopsinins是一种新型的三萜类鞣花单宁，含有HHDP基团，是Castanopsis属植物的特征性特殊代谢物，也可能是其化学分类标记物（Ageta等，1988）。根据现有的植物化学研究，Castanopsinins仅从以下Castanopsis物种中分离得到：Castanopsis cuspidata（Thunb.）Schottky（Ageta等，1988）、Castanopsis hystrix Hook. f. & Thomson ex A. DC.（Chen等，1993）、Castanopsis fissa（Champ. ex Benth.）Rehder & E. H. Wilson in Sarg.（Huang等，2011）、Castanopsis fargesii Franch.（Wang等，2018）、Castanopsis sieboldii（Makino）Hatus. ex T. Yamaz. & Mashiba（Kim等，2020）、Castanopsis eyrei（Champ. ex Benth.）Hutch（Yang等，2022）。

萜类化合物和单宁都表现出显著的生物活性（Koch，2019；Koczurkiewicz等，2015）。在广泛的生物实验中，许多代表性化合物被发现具有抗病毒、抗菌、酶抑制和抗肿瘤活性（Cheng等，2025；Cosme等，2025；Koczurkiewicz等，2015；Sakurawi等，1996；Xiao等，2025）。三萜类鞣花单宁的独特结构使其比其母体化合物具有双重优势，可能产生协同效应。三萜类鞣花单新的结构和广泛的生物活性促使我们继续在Castanopsis属植物中寻找更多此类化合物。C. calathiformis属于Castanopsis属，富含鞣花单宁（Bao等，2024；CAS，1998）。尽管存在这些特征性的特殊代谢物，但关于C. calathiformis提取物的生物活性和化学成分的报告相对较少。为了进一步研究该植物中结构有趣或具有生物活性的三萜类鞣花单宁，我们对其提取物进行了研究。

结构解析

使用石油醚提取C. calathiformis叶片的80% MeOH提取物，得到水相部分。通过各种色谱柱从水相部分分离出九种三萜类鞣花单宁，其中化合物1–6为未描述过的化合物，化合物7–9为已知化合物，分别为23,24-二-O-没食子酰-2α,3β,23,24-四羟基奥莱烷-12-烯-28-酸 28-O-β-D-吡喃糖苷（7）（Kim等，2020）、castanopsinin F（8）（Kim等，2020）、3,24-(S)

结论

总结来说，从C. calathiformis叶片中分离出了六种未描述过的（1–6）和三种已知的（7–9）三萜类鞣花单宁。在C. calathiformis中鉴定出这些未描述的三萜类鞣花单宁，进一步丰富了这类Castanopsis属特有化合物的结构多样性。尽管从Castanopsis属植物中分离出了多种含没食子酰基的三萜类化合物，但本研究是首次分离出黄烷酰酯的实例。

一般实验程序

光学旋转测量使用JASCO P-2000仪器（Jasco Corp.，东京，日本）进行。红外光谱使用Thermo Nicolet Nexus 470 FT-IR光谱仪（MA，美国）获得。电子圆二色光谱使用JASCO J-820光谱仪测量。¹H（500 MHz）和¹³C NMR（125 MHz）光谱使用Bruker Avance 500 MZ光谱仪测量，以TMS作为内标，耦合常数以赫兹为单位。高分辨率质谱（HRESIMS）使用Acquity UPLC-I Class UHPLC系统（Waters，米尔福德）获得。

CRediT作者贡献声明

王雅峰：撰写 – 审稿与编辑、初稿撰写、验证、方法学研究、数据管理。鲍英荣：数据可视化、正式分析、数据管理。何瑞杰：验证、正式分析、初稿撰写、研究、数据管理。庞娜：研究、正式分析。刘张斌：方法学研究。杨秉元：研究。李贵勤：研究。黄永林：撰写 – 审稿与编辑、验证、监督、项目管理

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文研究的财务利益或个人关系。

致谢

我们感谢广西自然科学基金（编号：2025GXNSFBA069156）、广西重大科技项目（编号：GuikeAA22096020）、国家自然科学基金（编号：82060764）、广西重点研发计划（编号：GuikeAB22035019）以及桂林创新平台与人才计划（编号：20210102-3）的财政支持。作者还要感谢刘张斌博士和蒋晓华在核磁共振光谱和质谱分析方面提供的帮助。