Pithecellobium clypearia 多酚纳米脂质体的制备、表征、体外消化作用及其抗溃疡性结肠炎活性的评估

时间:2026年3月16日
来源:Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects

编辑推荐:

溃疡性结肠炎治疗的新型脂质体递送系统PCBPL-Lips通过薄膜 hydration法制备,具有高包封效率(89.31±1.09%)、稳定粒径(124.51±7.61nm)和良好生物相容性(溶血率<5%,细胞存活率>80%)。体外实验显示其抗氧化活性保持完整并显著增强抗炎效果(降低TNF-α水平),体内实验证实可有效改善结肠结构、减少体重损失及脾指数。该研究为天然多酚的纳米递送系统开发提供了新策略。

广告
   X   

传聚王|强鹏|倩华张|世华韩|凌勇曾|嘉荣苏|贵新梁|子豪陈|娟郭|永光毕|玉实龚|少凡谭|怀成秦
中国东莞市清溪医院内分泌科,523641

摘要

皮特塞洛比姆·克莱皮里亚(Pithecellobium clypearia Benth)多酚(PCBPL)具有强大的抗氧化和抗炎特性,使其成为治疗溃疡性结肠炎(UC)的潜在药物。然而,由于其水溶性差、稳定性低和生物利用度有限,这些多酚的临床应用受到阻碍。为了克服这些限制,通过薄膜水化法制备了皮特塞洛比姆·克莱皮里亚多酚脂质体(PCBPL-Lips)。所得的PCBPL-Lips表现出89.31 ± 1.09%的高包封效率、平均粒径为124.51 ± 7.61纳米,以及-31.62 ± 2.37毫伏的ζ电位。透射电子显微镜观察显示其颗粒分布均匀、形态呈球形且表面光滑。稳定性评估表明,PCBPL-Lips在各种pH值、温度和离子强度条件下均保持稳定。体外消化研究表明其具有缓释特性,表明其可能具有持久的治疗效果。生物相容性评估显示溶血率低于5%,细胞存活率高于80%,说明其安全性良好。体外活性测定表明,脂质体包封显著增强了PCBPL的抗氧化活性和抗炎效果。在溃疡性结肠炎的小鼠模型中,PCBPL-Lips缓解了临床症状,减少了体重损失,增加了结肠长度,降低了脾指数和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并改善了结肠组织结构。本研究表明,脂质体包封显著提高了PCBPL的稳定性、生物利用度和治疗效果,为其在炎症性肠病治疗中的应用提供了有前景的策略。

引言

溃疡性结肠炎(UC)是一种慢性复发性炎症性肠病,其特征是结肠黏膜持续发炎。其发病机制涉及遗传易感性、免疫失调、肠道微生物群失衡和环境因素[1],[2]。临床上,UC表现为腹泻、腹痛和血性黏液便。近年来,其全球发病率显著增加,发病年龄趋于年轻化,严重影响生活质量并增加了医疗负担[3],[4]。尽管目前的疗法如美沙拉嗪和糖皮质激素可以缓解症状,但长期使用常受到药物耐药性和全身副作用的限制,因此不太适合慢性管理[5]。因此,具有低毒性和高治疗潜力的天然化合物作为UC的替代或辅助治疗手段受到关注[6]。
皮特塞洛比姆·克莱皮里亚(Pithecellobium clypearia (Jack) Benth)(PCB)是一种广泛分布于中国南方和东南亚的传统药用植物。在民间医学中,它因抗炎作用、伤口愈合能力和治疗溃疡的效果而受到重视[7]。其活性成分中,皮特塞洛比姆·克莱皮里亚多酚(PCBPL)——包括酚酸、黄酮类和非黄酮类化合物——被认为是主要的功能成分。这些化合物具有多种药理作用,包括抗氧化、抗炎、抗菌和抗癌活性[8]。最近的研究表明,PCBPL可以调节炎症细胞因子的表达,从而在炎症性肠病,特别是溃疡性结肠炎(UC)中发挥治疗效果[9]。此外,其抗氧化活性有助于清除活性氧(ROS),减少氧化应激,并帮助维持肠道屏障的完整性,最终减轻黏膜损伤并促进炎症消退[10]。然而,与许多天然多酚一样,PCBPL也存在水溶性差、稳定性低和生物利用度有限的缺点,限制了其临床应用[11]。
纳米递送系统已成为提高多酚化合物治疗效果的有效策略。将其包封到纳米载体(如纳米颗粒、纳米乳液和基于脂质的系统)中可以增强稳定性和生物利用度[12],[13],[14]。其中,由磷脂双层组成的纳米脂质体具有高生物相容性和对亲水及疏水分子的双重装载能力[15],[16],[17]。这些系统可以提高溶解度,实现控释并降低毒性。胆固醇进一步增强了膜的刚性和结构完整性[18],[19]。先前的研究表明,脂质体包封可以显著改善多酚化合物的功能特性。例如,刘等人报告称,将桑黄菌(Sanghuangporus vaninii)多酚包封在脂质体中显著提高了其溶解度、生物稳定性和吸收效率[20]。类似地,戈尔等人发现,将沙棘多酚纳入脂质体后提高了生物活性并降低了毒性[21]。
先前的一项研究使用壳聚糖和牛血清白蛋白通过美拉德反应形成复合物,用于包封黄酮类化合物以改善溃疡性结肠炎[22]。没食子酸可以装载到特定的巯基粘附阴离子脂质体中,用于灌肠治疗溃疡性结肠炎[16]。槲皮素通过基于pH调节的膜水化方法进行包封,提高了其水溶性并防止了氧化[23]。然而,迄今为止,尚无系统研究探讨PCBPL的脂质体制剂及其在UC中的治疗潜力。在本研究中,首次使用薄膜水化法成功制备了装载PCBPL的脂质体(PCBPL-Lips)[24]。
系统优化了配方参数,以实现高包封效率和胶体稳定性。全面表征了PCBPL-Lips的物理化学性质、环境响应性、体外生物相容性以及抗氧化/抗炎活性。此外,在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC小鼠模型中评估了其治疗效果——这是PCBPL-Lips在肠道炎症中的首次临床前评估。这些发现为植物多酚在炎症性肠病治疗中的纳米递送提供了新的见解。

材料与试剂

PCB的新鲜叶子和枝条从中国广东省云浮市采集,并由广东药科大学中药资源鉴定中心进行了鉴定。2,2-二苯基-1-吡啶肼(DPPH)购自上海Aladdin Bio-Chem Technology有限公司。大豆卵磷脂和胆固醇购自上海Macklin生化有限公司。福建福州Phygene生物技术有限公司提供了相关试剂。

PCBPL的化学成分分析

液相色谱-质谱(LC-MS)分析鉴定出PCBPL中含有12种化合物(图1,表1),其中许多化合物具有显著的生物活性。没食子酸和甲基没食子酸通过清除自由基和抑制脂质过氧化具有强大的抗氧化作用[35]。表儿茶素和EGCG通过下调促炎细胞因子(如TNF-α和IL-6)表现出强抗炎和抗氧化效果[36]。

结论

本研究成功开发了一种皮特塞洛比姆·克莱皮里亚多酚(PCBPL-Lips)的脂质体制剂,以解决PCBPL水溶性差、不稳定性和生物利用度有限的问题。优化后的脂质体表现出理想的物理化学性质、优异的生物相容性和缓释特性。脂质体包封有效保持了PCBPL的抗氧化活性,并增强了其体外抗炎效果。

作者贡献声明

强鹏:撰写 – 审稿与编辑、撰写 – 原稿、软件使用、方法学设计、数据管理、概念构思。传聚王:撰写 – 审稿与编辑、撰写 – 原稿、软件使用、方法学设计、数据管理、概念构思。永光毕:项目管理、资金获取、概念构思。怀成秦:软件使用。少凡谭:撰写 – 审稿与编辑。玉实龚:数据管理。娟郭:验证、资金获取、正式分析。子豪陈:

利益冲突声明

作者声明不存在利益冲突。

致谢

作者感谢中国国家自然科学基金(编号12274096)、云浮中医药(南方医学)创新团队项目、针对特定人群的功能食品开发研究组(编号2024ZZ12)以及广东省农村科技特使项目(编号KTP20240943、KTP20240950)的财政支持。

生物通微信公众号
微信
新浪微博


生物通 版权所有