细菌性脓毒症是由宿主对感染的免疫应答失调引起的危及生命的全身性疾病，是全球死亡的主要原因之一。本研究设计了一种仿生杂化脂质-聚合物纳米载体（VCM-LIN-P2O NPs），通过整合亚油酸（LIN）与聚（2-乙基-2-恶唑啉）（P2O），实现对ADAM10与TLR2受体通路的双重靶向。该工程化纳米平台通过同时结合ADAM10与TLR2抑制过度炎症反应，并确保万古霉素（VCM）在感染部位的靶向递送。研究人员首先通过分子对接分析LIN竞争性结合ADAM10与TLR2的潜力，并利用微量热泳（MST）验证，证实LIN可下调由ADAM10与TLR2激活相关的炎症。优化后的VCM-LIN-P2O NPs表现出理想的理化特性、优异的生物相容性及高达48小时的缓释性能。在体外实验中，该纳米载体相比游离VCM抗菌活性更强，并在脂多糖（LPS）刺激的巨噬细胞中显示出显著的抗氧化与抗炎作用。在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）诱导的小鼠脓毒症模型中，VCM-LIN-P2O NPs显著清除主要器官及血液中的细菌，同时明显降低肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-18水平，减轻器官损伤。结果表明，VCM-LIN-P2O NPs是一种具有潜力的多功能纳米平台，可用于靶向抗生素递送及有效治疗脓毒症。
研究背景
细菌性脓毒症是全球死亡率最高的疾病之一，其病理机制涉及宿主免疫应答失调、细菌毒素刺激及多器官损伤。尽管抗生素是主要治疗手段，但耐药性问题日益严重，且脓毒症复杂的病理生理过程常需要联合抗炎与抗氧化治疗，患者依从性降低。传统药物递送系统在靶向性和多重功能整合方面存在局限，尤其是针对脓毒症中ADAM10与TLR2介导的炎症通路缺乏有效的双重调控策略。因此，开发能够同时实现靶向抗菌与免疫调节的多功能纳米平台具有重要意义。该研究发表于《Journal of Materials Chemistry B》，提出了一种基于亚油酸的仿生脂质-聚合物杂化纳米颗粒（HLPNs），用于脓毒症治疗。
主要技术方法
研究人员采用分子对接与微量热泳（MST）验证亚油酸（LIN）与ADAM10及TLR2的结合亲和力；利用纳米沉淀法制备VCM-LIN-P2O NPs，并通过动态光散射（DLS）与透射电子显微镜（TEM）表征其粒径、电位与形态；采用高效液相色谱（HPLC）测定载药量与包封率；通过体外细胞实验评估生物相容性、抗菌活性、抗氧化及抗炎作用；在MRSA诱导的小鼠脓毒症模型中，通过细菌负荷检测、细胞因子分析及组织病理学评价其体内疗效。
研究结果
分子对接
结果显示LIN可与ADAM10及TLR2形成稳定的疏水与氢键相互作用，结合能分别为−5.8 kcal·mol−1 与−7.9 kcal·mol−1 ，优于天然配体。
体外结合验证
MST分析表明LIN对ADAM10的Kd 为0.58396 μM，对TLR2的Kd 为48.02 nM，结合力显著高于α-溶血素、肽聚糖与脂磷壁酸。
纳米颗粒制备与表征
优化后的VCM-LIN-P2O NPs粒径约141.8 nm，PDI 0.219，ζ电位−19.3 mV，包封率53.9%，载药量10.92%。TEM显示其为均匀球形结构。
生物相容性与稳定性
细胞存活率高于75%，溶血率低于3%，在4 ℃与室温下物理稳定性维持90天。
体外释放与抗菌活性
VCM-LIN-P2O NPs可持续释放48小时，对MRSA的最小抑菌浓度（MIC）在48与72小时保持稳定，且杀菌动力学显著优于游离VCM，并能破坏细菌细胞膜。
抗氧化与抗炎活性
DPPH自由基清除率达35.88%，可降低LPS诱导的线粒体ROS水平，显著抑制TNF-α与IL-1β的分泌。
体内疗效
在小鼠脓毒症模型中，VCM-LIN-P2O NPs将血液细菌负荷减少90.97%，完全清除心脏细菌，并显著降低各器官的细菌数量；血浆TNF-α、IL-1β与IL-18分别下降12.8倍、3.4倍与4.14倍；组织学分析显示肝、肾、心、肺结构显著恢复。
讨论与结论
研究证实LIN可作为双重靶向配体，通过竞争性结合ADAM10与TLR2阻断炎症信号通路，并与P2O协同增强抗菌与免疫调节效果。VCM-LIN-P2O NPs兼具良好的理化特性、生物安全性与多功能疗效，在脓毒症治疗中显示出超越游离VCM的优势。未来需进一步优化制剂的可放大性与长期稳定性，并开展系统的药代动力学、免疫原性与毒理学研究，以推进临床转化。
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