乳糜泻患者血清中WNT信号通路抑制剂Dickkopf-1与硬化蛋白水平升高

背景：乳糜泻（Celiac disease, CD）是一种自身免疫性肠病，WNT信号通路在成年肠上皮维持中发挥重要作用。目的：评估CD患者与健康对照者体内两种WNT拮抗剂——Dickkopf-1（Dkk-1）和硬化蛋白（sclerostin）的水平差异。方法：这项病例对照研究共纳入43例病例与45例对照。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清Dkk-1、硬化蛋白、瓜氨酸及甲状旁腺激素（Parathyroid Hormone, PTH）水平；采用高效液相色谱法（HPLC）测定维生素D3水平。结果：研究发现CD患者体内两种WNT拮抗剂均显著升高（Dkk-1，p<0.0001；硬化蛋白，p=0.002）。此外，CD患者PTH（p<0.0001）与钙（Ca）（p=0.009）水平亦高于对照组。瓜氨酸水平与硬化蛋白（R=0.71）、PTH（R=0.53）及Dkk-1（R=0.29）呈正相关。受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，血清Dkk-1（AUC=0.83）、硬化蛋白（AUC=0.7）及PTH（AUC=0.91）可有效区分CD患者与对照者。结论：乳糜泻患者体内Dkk-1、硬化蛋白及骨调节因子PTH水平升高，且与作为肠上皮细胞质量潜在标志物的瓜氨酸水平相关。这些结果共同表明Dkk-1与硬化蛋白在乳糜泻发生发展中具有重要意义，但仍需进一步研究探索其潜在的诊断与治疗应用价值。

该研究发表于《Immunity, Inflammation and Disease》。乳糜泻是一种由遗传易感个体摄入麸质引发的自身免疫性疾病，全球患病率约1%，现有唯一有效治疗手段为严格终身无麸质饮食。疾病确诊依赖临床病理结合，包括病史、抗组织转谷氨酰胺酶抗体检测及十二指肠活检MARSH评分，早期诊断对预防营养缺乏与胃肠道恶性肿瘤风险至关重要。WNT/β-连环蛋白信号通路对肠道上皮稳态维持与隐窝修复具有核心调控作用，其拮抗剂Dkk-1与硬化蛋白除参与骨代谢调节外，还被证实具有免疫调节功能。目前关于这两种WNT拮抗剂在乳糜泻发病中作用的研究尚不充分，因此研究人员开展此项研究，旨在探讨其与乳糜泻患者肠黏膜损伤及自身炎症的关联。

研究人员采用病例对照研究设计，样本来源于伊朗戈尔甘Sayyad Shirazi医院胃肠病与肝病研究中心既往项目，共纳入43例经十二指肠活检确诊的20~65岁乳糜泻患者，以及45例经活检排除乳糜泻的同期内镜中心就诊者，两组年龄、性别匹配，均排除IgA缺乏症。生化指标检测采用ELISA法测定血清Dkk-1、硬化蛋白、瓜氨酸及PTH水平，HPLC法测定维生素D₃，分光光度法测定钙水平。统计分析采用Shapiro-Wilk检验数据分布，组间比较根据数据类型选用卡方检验、曼-惠特尼U检验或独立样本t检验，采用Spearman检验进行变量相关性分析，ROC曲线评估指标诊断效能，以p<0.05为差异有统计学意义。

研究结果分为三部分。第一部分为乳糜泻患者骨重塑因子PTH与钙水平升高。患者按MARSH评分分为绒毛无/轻度萎缩（2+3a级，占39.5%）与显著/完全萎缩（3b+3c级，占60.5%），两组血清瓜氨酸浓度无显著差异（p=0.6856）。血脂谱与维生素D₃水平组间无显著差异，但CD患者血清PTH（396.8±7.33 pg/mL vs 300.1±13.55 pg/mL，p<0.0001）与钙（9.66±0.26 mg/dL vs 8.54±0.33 mg/dL，p=0.0097）水平均显著高于对照组。第二部分为乳糜泻患者血清WNT拮抗剂Dkk-1与硬化蛋白升高。CD患者血清硬化蛋白（44.4±1.6 ng/mL vs 37.2±1.9 ng/mL，p=0.0027）与Dkk-1（26.77±0.8 ng/mL vs 21.55±0.8 ng/mL，p<0.0001）水平均显著上调。按MARSH评分分层分析显示，两种WNT拮抗剂水平在无/轻度萎缩与显著/完全萎缩患者间无显著差异，但重度萎缩患者血清抗组织转谷氨酰胺酶IgA更高（p=0.02），PTH水平更低（p=0.02）。第三部分为Dkk-1与硬化蛋白在乳糜泻诊断与分型中的临床意义。相关性分析显示Dkk-1与硬化蛋白呈正相关（R=0.6，p<0.0001），二者均与PTH呈正相关（Dkk-1：R=0.69；硬化蛋白：R=0.74，p均<0.0001）。瓜氨酸与硬化蛋白（R=0.71，p<0.0001）、Dkk-1（R=0.29，p=0.012）及PTH（R=0.53，p<0.0001）均呈正相关。ROC曲线分析显示Dkk-1（AUC=0.83，截断值24.7 ng/mL，灵敏度80%，特异度73%）、硬化蛋白（AUC=0.7，截断值44.7 ng/mL，灵敏度65%，特异度60%）与PTH（AUC=0.91）均可有效预测乳糜泻，但三者均无法区分MARSH评分亚型，仅抗组织转谷氨酰胺酶IgA可鉴别显著/完全萎缩与无/轻度萎缩患者（AUC=0.76，截断值129.5 unit/mL，灵敏度75%，特异度70%）。

讨论部分指出，乳糜泻患者血清硬化蛋白、Dkk-1、PTH与钙水平升高与既往类风湿关节炎、克罗恩病相关研究结论一致，支持WNT拮抗剂在炎症性疾病中的免疫调节作用。既往研究显示乳糜泻患者瓜氨酸水平降低，但本研究未发现组间差异，可能与PTH通过上调内皮型一氧化氮合酶（eNOS）促进精氨酸转化为瓜氨酸有关，而非单纯反映肠上皮细胞完整性。钙吸收不良是未控制乳糜泻的典型特征，本研究中钙水平升高与PTH的正向调节作用相关。研究局限性包括样本量较小、未评估受试者骨密度，可能影响对WNT拮抗剂水平的综合判断。

结论部分总结，乳糜泻患者血清中两种WNT信号通路拮抗剂Dkk-1、硬化蛋白与骨调节因子PTH水平升高，且与作为肠上皮细胞质量潜在标志物的瓜氨酸水平直接相关，提示Dkk-1与硬化蛋白在乳糜泻发病机制中具有重要作用，未来需进一步研究其潜在的诊断与治疗应用价值。