基于通用Xpert MTB/RIF Ultra检测方案的多国舌拭子结核病评估：一项前瞻性诊断准确性研究

尽管结核病诊断技术已取得进展，传统痰基检测的局限性仍导致大量病例无法获得病原学确诊。本研究旨在评估舌拭子采样联合Xpert MTB/RIF Ultra（Ultra）检测用于结核病诊断的准确性，探索非侵入性替代方案的应用价值。研究人员于2023年6月26日至2024年2月15日在8个国家基层卫生中心和医院连续纳入疑似肺结核或至少存在1项结核病危险因素且筛查阳性的12岁及以上（依研究联盟要求为18岁及以上）参与者，采用标准化舌拭子采集与处理流程，以痰液体或固体培养（主要参考标准）和痰Ultra检测（次要参考标准），采用Wilson评分法计算灵敏度与特异度及95%置信区间（CI），组间比较采用Fisher精确检验，以p<0.05为差异有统计学意义。最终纳入分析的1844例参与者中，按主要痰培养参考标准，389例肺结核阳性、1455例阴性；人群平均年龄43岁（12~90岁），女性占47.2%、男性占52.7%，分别来自越南（21.7%）、印度（9.0%）、南非（23.2%）、菲律宾（14.7%）、尼日利亚（7.5%）、赞比亚（5.5%）、乌干达（9.5%）和秘鲁（9.0%）。舌拭子Ultra检测的总体灵敏度为65.6%（95% CI 60.6~70.3），特异度为98.5%（95% CI 97.7~99.1）；未感染HIV人群的灵敏度高于HIV感染者（68.4% vs 50.0%，绝对差值18.4个百分点[95% CI 3.3~33.4]）；以痰Ultra为参考标准时，灵敏度为75.4%（95% CI 69.0~78.8）；舌拭子Ultra灵敏度优于痰涂片显微镜检查。不同中心无效或错误结果率为0~16%。研究表明，舌拭子是极具潜力的结核病快速检测样本类型，虽灵敏度中等但特异度高，后续需优化Ultra检测流程并开发适配舌拭子的检测试剂，其推广可提升无法留痰人群的结核病诊断可及性，助力全球结核病消除目标实现。

本研究发表于《The Lancet Microbe》，针对当前结核病防控的核心瓶颈——痰基检测的生物安全风险高、操作复杂、部分人群无法留痰等问题，首次开展大规模多国前瞻性诊断准确性评估，验证舌拭子作为非侵入性样本的实用价值。

研究人员依托三大结核病诊断研究联盟，在越南、印度、南非、菲律宾、尼日利亚、赞比亚、乌干达、秘鲁8个国家的基层医疗机构连续纳入疑似肺结核人群，采用统一标准化流程完成舌拭子采集、处理与Xpert MTB/RIF Ultra（Ultra）检测，以痰培养为主要参考标准、痰Ultra检测为次要参考标准，通过分层统计与亚组分析明确检测性能特征。

关键技术方法包括：多国多中心前瞻性队列设计，覆盖8个高负担国家共1844例符合入组标准的参与者；采用统一标准化舌拭子采集与处理方案，规避既往研究的操作异质性；双参考标准体系，分别以痰培养（病原学金标准）和痰Ultra（临床常规标准）作为对照；统计学分析采用Wilson评分法计算灵敏度与特异度置信区间，Fisher精确检验进行亚组差异比较。

研究结果部分，各板块结论如下：

背景：全球2023年估算新增结核病患者820万例、死亡125万例，仅62%的肺结核患者获得病原学确诊，低资源地区确诊率更低。分子检测是精准诊断与耐药识别的核心手段，但痰基检测存在生物安全风险、前处理复杂、儿童、HIV感染者及症状轻微者难以留痰等局限，亟需替代样本类型。

研究发现：纳入分析的1844例参与者中，舌拭子Ultra检测总体灵敏度为65.6%（95% CI 60.6~70.3）、特异度为98.5%（95% CI 97.7~99.1）；痰涂片阳性者灵敏度达91.1%，显著高于涂片阴性者的38.3%；灵敏度随痰Ultra半定量负荷升高从极低组的29.7%提升至高组的98.8%，整体优于痰涂片显微镜检查的49.2%；HIV感染者灵敏度较未感染者降低18.4个百分点；以痰Ultra为参考标准时，灵敏度升至75.4%；不同国家与联盟间性能存在差异，4个中心无效或错误率达5%~16%。

解读：这是首个采用统一方案的多国舌拭子Ultra评估研究，特异度高但未达到WHO非痰标本低复杂度分子检测80%的灵敏度目标，性能异质性与样本处理环节相关。灵敏度不足限制了其作为首选诊断工具，但可作为无法留痰人群的补救方案，尤其适用于HIV感染者与儿童。舌拭子检测接受度高，结合新型低成本近即时检测平台有望替代基层涂片显微镜检查，推动社区筛查。研究中出现的仪器压力相关错误可通过优化样本液化方案解决，目前正在进一步验证。

讨论与结论：舌拭子分子检测具备明确临床应用潜力，即使使用适配痰液的Ultra试剂，性能仍优于传统涂片。后续需优化处理流程、探索更高释放效率的拭子类型，并研发专用低资源友好型检测平台。对于无法获得合格痰标本的人群，舌拭子Ultra检测应作为“无检测”场景的替代方案纳入诊疗路径，逐步扩大结核病诊断覆盖范围，支撑全球终结结核病流行目标的实现。