丹参中三种丹参酮的体外和体内抗结核分枝杆菌活性比较以及口服隐丹参酮在小鼠体内的疗效研究

摘要

结核病（TB）仍然是一个重大的全球健康威胁，尤其是由于多重耐药（MDR）的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，简称M.tb）。尽管近年来出现了新的结核病治疗药物和更短的疗程，但仍需要针对耐药性和细胞内细菌的更多化学化合物。从丹参（Salvia miltiorrhiza）中提取的丹参酮类化合物是一种具有潜在抗结核活性的天然产物。我们系统地比较了三种主要的丹参酮类化合物——丹参酮I（TAN）、二氢丹参酮I（DTI）和隐丹参酮（CTS）对M.tb H37Rv以及一系列耐药临床分离株的抑制作用。测定了这些化合物的体外最低抑菌浓度（MIC），并在感染了M.tb的THP-1巨噬细胞中通过48小时处理后的菌落形成单位（CFU）计数来评估其细胞内活性。此外，还在急性小鼠结核病感染模型中进行了进一步研究，方法是从感染后14天开始每天口服给予CTS（剂量为25毫克/千克体重），持续28天。所有三种丹参酮类化合物均能抑制敏感性和耐药性M.tb的体外生长，其MIC范围在5–20微米之间，其中DTI的体外MIC最低（为5微米）。在感染48小时的THP-1巨噬细胞中，10微米浓度的CTS（1×MIC）使细胞内CFU减少了约1.00 Log₁₀。在相同条件下，10微米浓度的TAN使CFU减少了0.14 Log₁₀（1×MIC），20微米浓度的TAN使CFU减少了0.52 Log₁₀（2×MIC），而DTI的细胞内活性最低（10微米浓度下仅减少了0.17 Log₁₀）。在小鼠实验中，口服CTS显著降低了肺部和脾脏中的细菌负荷，并改善了肺部组织病理学状况。主要丹参酮类化合物在体外对敏感性和耐药性M.tb均显示出可测量的抑制作用，但它们的体外和细胞内活性特征有所不同。CTS在体外、细胞内和体内实验中均表现出一致的抗结核活性，这为进一步研究其作用机制、药代动力学优化以及联合用药方案评估提供了依据。