肿瘤相关蛋白酶激活的抗CD47抗体能够精确维持巨噬细胞的吞噬能力，同时对健康组织的影响极小

摘要

(背景)

CD47在许多癌细胞上高表达，并作为先天免疫检查点发挥作用。它与巨噬细胞上的信号调节蛋白α（SIRPα）结合，使癌细胞能够逃避吞噬作用。尽管抗CD47抗体（αCD47 Ab）已被用于恢复吞噬能力，但由于CD47在正常细胞上的广泛表达，在抗体治疗过程中会出现显著的毒性反应，如贫血、血小板减少和败血症。

方法

为了减轻这些副作用，我们使用自体铰链区域作为基于空间障碍的抗体锁，并通过基质金属蛋白酶底物肽（即MMP-2）将其连接到轻链和重链的N端，以覆盖αCD47 Ab的互补决定区（CDR），从而生成Pro-αCD47 Ab。这种抗体锁仅在蛋白酶过度表达的疾病区域被选择性去除，从而减少非选择性的靶向效应。

结果

我们的结果显示，Pro-αCD47 Ab的结合能力比亲本αCD47 Ab弱225.9倍，但在经过MMP-2处理后能够完全恢复其结合功能。值得注意的是，Pro-αCD47 Ab对红细胞的结合亲和力降低了100.2倍，对中性粒细胞的结合亲和力降低了83.7倍，从而最大限度地降低了血液系统毒性的风险。此外，体内异种移植研究证实，Pro-αCD47 Ab能够实现与亲本抗体相当的剂量依赖性和近乎完全的肿瘤抑制效果，同时保持了稳定的全身安全性，这通过动物体重的稳定得以证明。此外，还成功证明Pro-αCD47 Ab可以在临床肿瘤标本中被内源性MMP-2激活，特别是在三阴性乳腺癌（TNBC）样本中显示出有希望的激活效果，从而恢复了其结合CD47的能力。

结论

总之，我们开发了一种蛋白酶激活的Pro-αCD47 Ab，它可以避免与正常组织的不良相互作用，从而解决了限制临床疗效的最具挑战性的问题。这一进展可能通过提高治疗效果和改善整体治疗质量，为患者提供更好的医疗护理。