摘要
叶酸（维生素B9）是人类健康必需的微量营养素，尤其是在怀孕期间。适配体作为一种用于检测小分子的理想识别元件已经得到了广泛应用，这一点通过许多天然核糖开关得到了证明。尽管已经报道了针对叶酸的RNA适配体，但由于DNA适配体具有更好的化学稳定性和易于修饰的特性，其在生物传感应用中的开发仍然非常具有吸引力。在这里，我们采用了一种基于文库固定的筛选策略来分离出一类高亲和力的叶酸DNA适配体。等温滴定量热法（ITC）测量结果显示其解离常数为640 nM。基于选定的适配体（FA1），我们通过将5′-FAM标记的适配体与短淬灭剂标记的互补链杂交，开发了一种信号开启型、链置换荧光生物传感器。该传感器在筛选缓冲液中的检测限（LOD）为8.5 nM，在10%血清中的检测限为31 nM。选择性研究表明，对于结构相关的化合物（包括鸟嘌呤、腺嘌呤、茶碱、黄嘌呤和咖啡因）几乎没有响应。四氢叶酸只有在较高浓度下才能产生可测量的信号；然而，ITC实验确认没有直接结合，这表明观察到的响应可能是由于其氧化成叶酸所致。这些结果为叶酸的DNA适配体在基础研究以及临床监测和食品强化质量控制等应用领域提供了可靠的选择。
图形摘要
通过捕获SELEX技术，我们分离出一种对叶酸具有亚微摩尔亲和力的DNA适配体，显示出优异的选择性。利用这种适配体，我们开发了一种用于叶酸检测的发光荧光生物传感器。
利益冲突
作者声明没有利益冲突。
