摘要
背景
神经血管解耦是一种关键的但尚未得到充分认识的病理机制，它会加剧脑缺血性中风后的神经损伤。安宫牛黄丸（AGNHW）是一种传统的中药方剂，由于其多靶点的神经保护作用，在临床中已被用于中风的治疗超过两个世纪。然而，它改善缺血性损伤后受损的神经血管耦合的潜力仍很大程度上未被探索。
目的
本研究旨在阐明安宫牛黄丸在恢复神经血管耦合方面的治疗机制，重点关注嘌呤能P2X7受体（P2X7R）信号通路。
方法
在雄性C57BL/6小鼠中诱导了远端大脑中动脉阻塞模型。阻塞后1小时通过腹腔注射给予安宫牛黄丸。使用激光斑点对比成像技术评估了胡须刺激期间的皮层神经血管耦合情况。通过步态分析和握力评估功能恢复情况，同时通过苏木精和伊红染色检查组织损伤。在rAAV2/9-CaMKIIα-GCaMP6s小鼠中监测神经元活性，并在功能性充血期间使用双光子显微镜观察动脉血流动力学。通过RNA测序鉴定安宫牛黄丸的潜在作用靶点，随后利用分子生物学技术研究嘌呤能信号通路的作用，特别是P2X7R对神经血管耦合的调节作用。
结果
与对照组相比，安宫牛黄丸治疗显著增强了脑血流量反应，并在胡须刺激期间增加了曲线下面积，同时减轻了神经元损伤并改善了运动功能——表现为站立时间延长、受影响前肢的峰值压力升高以及握力增强。安宫牛黄丸还显著提高了缺血后的钙活性信号强度（ΔF/F₀）。此外，安宫牛黄丸通过促进动脉扩张、增加红细胞速度和在功能性充血期间提高红细胞流量来改善动脉血流动力学。它还改善了血脑屏障的完整性，并上调了紧密连接蛋白（ZO-1、occludin、claudin5）的表达。从机制上讲，安宫牛黄丸下调了P2rx7、P2ry12和Adora2a基因的表达，并通过减少ATP释放来抑制P2X7R的激活，从而抑制炎症细胞的浸润并减轻IL-1β、IL-18和TNF-α等炎症介质的分泌。值得注意的是，P2X7R信号通路的激活会消除安宫牛黄丸对脑血流量反应和血脑屏障完整性的保护作用。
结论
安宫牛黄丸通过抑制P2X7R驱动的嘌呤能-炎症级联反应，减轻了脑缺血后的神经血管解耦，改善了脑血流量反应和神经元活性。这些发现阐明了安宫牛黄丸保护神经血管功能的机制。
