猫杯状病毒（Feline calicivirus，FCV）主要与猫上呼吸道感染相关，但其亦可引发严重的多系统疾病，偶伴神经症状。尽管已有散在的神经受累报道，FCV的神经嗜性潜能仍不明确。本研究回顾性分析了67只临床疑似FCV感染（表现为神经、呼吸和/或全身性病变）的家猫中枢神经系统受累情况。采用针对病毒聚合酶基因部分片段的反转录聚合酶链反应（reverse‑transcription polymerase chain reaction，RT‑PCR）筛查脑组织，并对阳性样本进行部分基因组测序、组织病理学、免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）及原位杂交（in situ hybridization，ISH）检测。选取一例FCV阳性病例，利用透射电子显微镜（transmission electron microscopy，TEM）确证病毒在中枢神经系统的定位。结果显示，67只猫中检出4例（5.97%）FCV阳性，所有阳性病例均呈现血管周围套、胶质增生及神经元周围卫星现象等神经病变。IHC证实FCV衣壳蛋白广泛分布于多个脑区的神经元及胶质细胞中，舌与肠的神经节中亦检出病毒抗原；ISH在对应区域检测到病毒基因组。TEM在一例病例的胶质细胞内观察到完整病毒颗粒。尽管本研究在中枢神经系统组织中检出FCV，其与猫神经症状的因果关系仍需进一步验证，但这些结果明确表明FCV可定位于猫中枢神经系统。
《Veterinary and Animal Science》论文解读：猫杯状病毒中枢神经系统定位研究
研究背景与意义
猫神经系统疾病病因复杂，涵盖肿瘤性、特发性、炎性、退行性、创伤性及感染性等多种类型。在感染性病原中，除已明确具有神经致病性的猫细小病毒（Feline panleukopenia virus，FPLV）、猫免疫缺陷病毒（Feline immunodeficiency virus，FIV）等外，近年来猫杯状病毒（Feline calicivirus，FCV）也被认为可能与猫神经疾病相关。FCV属于杯状病毒科（Caliciviridae）水疱疹病毒属（Vesivirus），是一种无包膜单股正链RNA病毒，传统上主要引起猫上呼吸道感染，表现为口腔溃疡、结膜炎等症状。然而，其高突变率导致遗传多样性极高，能够演化出毒力更强的系统性毒株（virulent systemic FCV，VS‑FCV），引发死亡率高达60%的多器官衰竭。虽然VS‑FCV表现出广泛的细胞嗜性，但其能否侵入中枢神经系统（central nervous system，CNS）并直接导致神经病变，目前尚缺乏系统的病理学证据。鉴于此，研究人员开展此项研究，旨在探究FCV在自然感染病例中对CNS的侵袭与定位，明确其潜在的神经嗜性。
主要技术方法
研究人员采用回顾性队列研究设计，收集2018年至2021年间因临床疑似FCV感染（包括呼吸道、全身性水肿/溃疡或神经症状）死亡的67只家猫样本。通过RT‑PCR靶向FCV聚合酶基因（ORF1）保守区进行分子筛查，阳性样本进一步进行Sanger测序。为确定病毒在组织中的分布与细胞定位，研究采用了免疫组织化学（IHC）检测病毒衣壳蛋白，以及针对病毒基因组的原位杂交（ISH）技术。此外，利用透射电子显微镜（TEM）在超微结构水平观察病毒颗粒形态。为排除其他常见猫病毒（如FHV‑1、FPLV等）的共感染干扰，同步进行了多重PCR筛查。
研究结果
FCV在脑组织中的检测
在67例脑组织中，RT‑PCR检出4例（5.97%）FCV RNA阳性并经测序确认。其中3例为单一FCV感染，1例合并猫疱疹病毒‑1（Feline herpesvirus‑1，FHV‑1）感染。患猫年龄跨度从1个月至48个月，临床表现各异，仅1例呈现典型的VS‑FCV特征（急性呼吸困难、面部水肿、皮肤溃疡）。
FCV阳性脑组织的组织病理学发现
组织病理学分析显示，所有4例阳性病例均存在不同程度的神经病变。主要病理改变为胶质增生（4/4），部分病例伴有非化脓性脑炎。具体表现为脑干和大脑灰质的血管源性水肿、神经元周围卫星现象及暗神经元形成。
FCV在脑内的定位
IHC结果显示，在所有阳性病例的大脑皮层、小脑及脑干的神经元和胶质细胞质内均存在FCV衣壳蛋白的广泛表达。ISH进一步在2个病例中证实了病毒基因组RNA与上述蛋白信号在空间上的共定位，排除了抗原交叉反应的可能性。
病毒颗粒的超微结构鉴定
对病例4的脑组织进行TEM观察，在胶质细胞的胞质内发现了直径约35‑40 nm的电子致密病毒颗粒。这些颗粒呈二十面体对称结构，表面具有杯状病毒科特有的凹陷特征，从形态学上确证了FCV在神经细胞内的存在。
FCV在颅外器官的检测
除CNS外，研究人员还在面部皮肤、舌、肺、气管、胃肠道、脾及纵隔淋巴结等多器官中检出了FCV。值得注意的是，除在上皮细胞和内皮细胞外，病毒抗原还定位于舌的神经节及小肠的黏膜下和浆膜下神经丛，提示FCV具有侵袭外周神经系统的能力。
讨论与结论总结
讨论部分指出，本研究首次提供了FCV自然感染猫中枢神经系统的综合病理学、分子生物学及超微结构证据。尽管FCV在脑组织中的检出率相对较低（5.97%），但病毒确实能够突破血脑屏障或在神经组织内复制，定位于神经元和胶质细胞。研究人员强调，虽然发现了病毒与神经病变的共存，但由于病例数有限且存在混合感染（如FHV‑1），尚不能直接确立FCV感染与神经症状之间的因果关系。关于FCV如何进入CNS，研究推测除传统的经血行播散外，可能利用唾液酸等替代受体介导神经入侵，或通过外周神经逆行运输，因为已知的受体fJAM‑A在神经细胞中表达有限。此外，由于仅扩增了ORF1保守区，未进行全基因组测序，无法分析病毒神经嗜性的特定遗传标记。
结论
综上所述，本研究证实FCV可定位于自然感染猫的中枢及外周神经系统组织中。这一发现拓展了学界对FCV组织嗜性的认知。然而，受限于阳性病例数量及回顾性研究的性质，尚不能最终确立FCV感染与猫神经疾病之间的直接因果关系。因此，在猫神经疾病的鉴别诊断中，应将FCV视为一个潜在的非排他性致病因素。
