血流动力学剪切应力是塑造内皮表型并促成血管疾病发生发展的基础性生物力学线索。尽管 KLF2 和 KLF4 等流动反应性转录因子已得到充分认识，但机械力如何汇聚至表观转录组机制以调控 RNA 命运，仍未被完全阐明。新近证据表明，N6-甲基腺苷（m6A）修饰是调控非编码 RNA 稳定性和内皮功能的动态调节因子，然而其如何整合进入剪切依赖性重塑过程，尚未得到系统性探讨。该综述综合了关于剪切应力与 m6A 调控机器相互作用的现有证据，并讨论表观转录组对编码 RNA 与非编码 RNA 的调节如何可能促进内皮可塑性。在这一更广泛的框架内，KLF2/4–METTL3–H19 通路被作为代表性机制模块提出，用以说明流动反应性转录程序如何可能与 RNA 甲基化过程及读者蛋白介导的转录本调控发生交叉。文中还讨论了此类相互作用对内皮-间充质转分化、屏障完整性、血管生成以及血管疾病的潜在意义，包括动脉粥样硬化、肺动脉高压和糖尿病性微血管病。这一整合性视角突出了机械-表观转录组串扰在血管生物学中的新兴作用，并指出了未来研究方向。
1 Introduction
本文围绕血流动力学剪切应力如何通过表观转录组层面塑造内皮细胞命运展开综述。文章首先指出，血流动力学剪切应力是决定内皮细胞（ECs）时空异质性的核心生物力学信号。内皮细胞通过感知血流物理属性而调整其表型，从而在维持血管稳态和推动疾病进展中发挥关键作用。层流剪切应力（LSS）与振荡剪切应力（OSS）可分别诱导保护性或病理性内皮表型，其中 KLF2 和 KLF4 被视为经典的流动敏感性转录因子。现有研究虽已部分揭示剪切应力下游转录程序，但机械线索如何整合进入转录后调控层，尤其是 RNA 修饰通路，以最终决定内皮命运，仍存在明显知识缺口。
文章进一步引入 N
6-甲基腺苷（m
6A）作为真核细胞内最普遍且高度动态的 RNA 内部修饰。m
6A 能够调节 RNA 剪接、输出、稳定性、定位及翻译，并已被证实与心血管疾病和炎症性疾病密切相关。在血管背景下，m
6A 信号失衡与内皮炎症、动脉粥样硬化及血管重塑相关。然而，目前多数研究聚焦单个 RNA 靶标或特定修饰酶，尚未将这些发现纳入统一的机械转导框架。特别是，血流动力学力量是否会在全局层面重塑内皮 m
6A 图谱，以及这种重塑如何与经典流动反应性转录通路交汇，仍界定不足。
作者随后概述 m
6A 调控系统由甲基转移酶“写入器”、去甲基化酶“擦除器”和“读者”蛋白共同构成。METTL3 依赖的 m
6A 沉积已被报道可促进内皮炎症激活与致粥样硬化功能障碍；此外，m
6A 还可调控长链非编码 RNA（lncRNA），增加了内皮基因调控的复杂性。文中以 H19 为例指出，METTL3 介导的 m
6A 修饰可增强 H19 稳定性并促进炎症信号和动脉粥样硬化进展。基于此，作者提出 m
6A 对编码与非编码 RNA 的联合调控可能构成内皮中的机械反应性调节层，并以 KLF2/4–METTL3–H19 轴作为概念性模型，用于整合机械转导与 RNA 水平调控。
2 Shear stress–driven KLF2/4 transcriptional programming
本节系统总结剪切应力驱动的 KLF2/4 转录程序。文章指出，剪切应力是内皮细胞感知并转导为基因调控程序的主要生物力学信号，Kruppel-like factor 2 和 4（KLF2、KLF4）则是维持内皮稳态和血管完整性的中心性转录调控因子。在生理条件下，LSS 促进 KLF2/4 表达上调，激活一系列抗炎、抗氧化和增强屏障功能的基因，如 eNOS（NOS3）、THBD 和 CLDN5；相反，常见于血管分叉等紊乱流区域的 OSS 会抑制 KLF2/4 表达，进而促进促炎信号、通透性升高以及向间充质样表型偏移，包括内皮-间充质转分化（EndMT）。这种转录差异构成了血管健康与疾病中内皮空间异质性的分子基础。
文章还归纳了 KLF2/4 对剪切应力敏感性的上游机制。PECAM1–VE-cadherin–VEGFR2 复合体被描述为经典机械信号转导枢纽，可将细胞外机械力转化为包括 Src 家族激酶在内的胞内级联信号；机械敏感性离子通道 Piezo1 则可通过剪切诱导的膜形变触发 Ca
2+ 内流并激活 KLF2/4 转录。此外，流动还可动态重塑增强子区域染色质可及性，从而进一步调控 KLF 因子的时空表达。
作者特别强调，不同实验体系中 KLF2/4 对流动的响应并不完全一致。例如，KLF4 在部分研究中表现出显著的层流诱导，而在另一些模型中则仅呈现温和或延迟性反应，提示其可能部分属于继发性而非即时性流动反应因子。Piezo1 的激活也具有情境依赖性。此类差异提示，需要建立更整合的解释框架，以说明不同流型和机械感受路径如何汇聚至 KLF2/4 激活。
在此基础上，文章提出一个重要推论：KLF2/4 的作用可能不仅限于蛋白编码基因转录调控，还可能延伸至表观遗传和表观转录组程序。由于 KLF4 已知可与 HDACs 和 p300 等染色质调节因子相互作用，作者据此提出可检验假说，即 KLF2/4 可能调控 m
6A 甲基转移酶 METTL3 的表达、定位或催化活性，从而成为机械力重编程表观转录组的关键接口。
3 Mechanical regulation of the m
6A epitranscriptomic machinery
本节聚焦机械力对 m
6A 表观转录组机器的调控。文章指出，除转录重编程外，越来越多证据支持血流动力学力量，尤其是层流与紊乱/振荡流，可重塑内皮 m
6A 图谱；此外，基质刚度和周期性牵张等其他机械刺激也已在机械敏感场景中被证明与 m
6A 调控相关，并可能参与血管重塑过程。
作者总结，LSS 与 OSS 可差异性调节 METTL3 及其他潜在“写入器”组分的表达与活性，进而在流动依赖方式下改变 RNA 甲基化谱。全基因组 m
6A 图谱研究进一步显示，紊乱流可诱导内皮细胞发生转录本特异性的甲基化变化，并与炎症基因激活相关联。这表明机械刺激对 m
6A 的影响并非局限于单一靶标，而可能涉及更大范围的表观转录组重塑。
除甲基转移酶外，文章还指出“擦除器”同样参与 m
6A 动态平衡。FTO 和 ALKBH5 的表达会受到炎症和代谢线索影响，而这些因素常与异常血流动力学环境并存，因此机械应力可能通过改变甲基化与去甲基化之间的平衡，影响 RNA 命运。
“读者”蛋白层面，YTH 结构域蛋白和 IGF2BP 家族决定 m
6A 修饰 RNA 的稳定性、翻译效率和亚细胞定位。尽管机械力直接调控“读者”重分布的证据仍有限，但流动引起 RNA 结合蛋白表达改变的观察支持如下观点：生物力学信号可能不仅调控 m
6A 标记的安装，也会调控其功能解释过程。综合来看，机械刺激可在“写入”“擦除”“读取”等多个层面作用于 m
6A 调控网络，从而为血流动力学影响内皮表型提供多层级机制基础。
4 From transcription to epitranscription—METTL3-mediated m
6A installation and H19 fate
本节重点讨论由 METTL3 介导的 m
6A 写入及其对 H19 命运的影响。文章指出，在经典 DNA–转录–蛋白轴之外，RNA 修饰已成为决定细胞命运的重要调控层。m
6A 作为最常见且动态可调的内部修饰，不仅存在于 mRNA，也广泛存在于 lncRNA。在内皮细胞中，其对血流动力学应答的精细调节功能尚处于起步认识阶段。
作者总结，METTL3、METTL14 与 WTAP 组成的“写入器”复合物负责安装 m
6A 标记，FTO 和 ALKBH5 负责去除，而 IGF2BP 与 YTHDF 家族则负责解释这些标记。现有较强证据支持 METTL3 直接调控 H19 稳定性：METTL3 介导的 m
6A 可增强 H19 稳定性并促进内皮炎症激活。另有中等强度证据表明，振荡剪切应力会改变血管 m
6A 图谱；同时，H19 含有多个保守 m
6A 基序，其稳定性和定位可受 m
6A 依赖性调控。
相较之下，KLF2/4 与 METTL3 之间的直接联系证据仍然有限。尽管 KLF4 可与染色质调节因子相互作用，但 KLF2/4 是否在剪切应力下直接转录激活 METTL3，或调节其定位，目前尚无直接实验证实。因此，文中明确将 KLF2/4–METTL3 连接视为基于间接证据提出的机制假说，而非已被验证的线性通路。
作者提出数种并非互斥的调控情景：其一，KLF2/4 可能在特定剪切条件下直接作用于 METTL3 启动子或增强子区域；其二，KLF2/4 可能通过中间信号级联、染色质重塑复合体或代谢调控因子，间接影响 METTL3 活性及甲基供体可用性。要区分直接占位与间接调控，仍需专门实验验证。
在机制层面，文章强调“读者”竞争是决定 H19 命运的关键基础。IGF2BP 蛋白倾向于稳定 m
6A 修饰转录本，而 YTHDF2 则招募降解机器促进其降解；二者间的拮抗性竞争形成了一个 m
6A 依赖性开关，使 H19 在不同剪切环境下被稳定或降解。作者进一步指出，这一竞争并非随机过程，而可能受到局部蛋白化学计量比、翻译后修饰、亚细胞区室化以及核糖核蛋白复合体耦联等多重因素共同塑造。基于此，未来需结合 KLF2/4 ChIP-seq、METTL3 启动子报告、MeRIP-seq 以及针对 H19 m
6A 位点的 CRISPR 定点去甲基化等策略，验证机械力是否真实重塑 H19 的 m
6A 景观，并厘清该轴在线粒度和病灶易感区中的状态变化。
5 Broader m
6A targets of METTL3 in endothelial biology
本节将 H19 放回更广泛的 METTL3 靶标背景中考察。文章指出，虽然 H19 是说明剪切反应性框架下 m
6A 依赖性 RNA 命运控制的理想模型，但 METTL3 在内皮细胞中调控的并非单一转录本，而是广泛的转录组靶谱。例如，METTL3 依赖的 m
6A 信号与肺内皮细胞炎症激活以及黏附分子 ICAM1 调控有关；此外，METTL3 还可通过调控血管生成相关 microRNA 参与血管生成过程。这些研究共同支持 METTL3 是内皮细胞中的广谱表观转录组调节因子。
作者进一步比较了不同 RNA 类别在 METTL3 调控下的功能模式。蛋白编码 mRNA 往往通过稳定性或翻译效率变化介导效应；microRNA 则通过协调性转录后调控塑造血管生成网络；而 lncRNA，如 H19，则可能作为整合节点，将 m
6A 依赖的稳定性控制与 RNA–蛋白互作网络耦联起来。由此，H19 可被视为代表性的“分子开关”，但内皮表型的形成更可能是多靶标 m
6A 程序共同作用的结果，而非单一转录本输出。
6 H19 as a representative m
6A-Regulated node in endothelial plasticity and disease linkage
本节聚焦 H19 作为 m
6A 调控节点在内皮可塑性和疾病关联中的作用。文章指出，在所提出的剪切应力–KLF2/4–METTL3 轴中，H19 可能经历动态可调的 m
6A 修饰，从而成为连接表观转录组变化与内皮功能表型的枢纽。作者重点讨论了 H19 对三类内皮可塑性表型的影响，并将其与动脉粥样硬化（AS）、肺动脉高压（PAH）及糖尿病性微血管并发症联系起来。
首先，在 EndMT 方面，内皮细胞会丧失 CDH5 等内皮标志并获得 VIM、SNAI1 等间充质特征，导致屏障功能受损、迁移性增强和病理性重塑。H19 已被报道可通过竞争性内源 RNA（ceRNA）机制及 m
6A 依赖性稳定性控制参与 EndMT 调节。文中据此提出，剪切应力诱导的 H19 m
6A 图谱重塑可能通过改变其稳定性来调控 EndMT 的启动和进展，并与 KLF2/4 维持内皮静息状态的抗 EndMT 作用形成动态平衡。
其次，在屏障完整性方面，内皮稳态依赖紧密连接蛋白如 CLDN5、ZO-1 以及糖萼层的完整性。H19 被认为能够影响糖萼修饰酶并调节细胞骨架重排，从而改变细胞间连接稳定性。在紊乱流和高通透性环境中，H19 的表达与稳定性变化与跨内皮电阻（TEER）相关，提示 m
6A 介导的 H19 调控可能在机械应激下发挥屏障缓冲作用。
再次，在血管生成方面，H19 可通过 NO 生物利用度、tip/stalk 细胞命运决定及 VEGF 信号通路影响血管新生。在缺血或炎症环境中，H19 水平与芽生密度和迁移行为相关。作者认为，剪切敏感性的 m
6A 稳定化可能为 H19 的血管生成潜能提供一种时间依赖性的转录后微调机制，使血管生长与流动条件相协调。
最后，文章将上述三类表型输出与疾病联系起来：在动脉粥样硬化中，紊乱流区域 H19 稳定性下降可能促进 EndMT 并削弱屏障功能；在 PAH 中，H19 参与肺微血管重塑和异常血管生成；在糖尿病性微血管病中，异常剪切应力与高糖状态可能共同影响 H19 的 m
6A 依赖性稳定性，进而改变血管通透性与修复能力。总体而言，H19 被定位为机械力、表观转录组修饰与功能输出之间的主动整合器，而非被动 RNA 靶标。
7 Conclusion
结论部分提出一个整合性概念框架：剪切应力 → KLF2/4 → METTL3 → H19 → m
6A 读者竞争 → 内皮可塑性。该模型旨在将转录层面的机械转导与转录后 RNA 命运控制联结起来。文中强调，在这一框架中，层流响应性 KLF2/4 被假设为连接 METTL3 依赖性 m
6A 沉积与 H19 功能输出的上游接口，而 H19 的命运则由 IGF2BP 与 YTHDF2 等“读者”蛋白竞争性识别所决定。该调控节点并非简单二元开关，而更可能是在不同血流环境中动态微调 EndMT、屏障完整性和血管生成行为的连续性机制。
作者还概述了验证这一框架所需的实验路径，包括定义剪切条件下的 ChIP-seq 以检测 KLF2/4 在 METTL3 调控区的占位，时间分辨 MeRIP-seq 或 m
6A-seq 结合 RNA 稳定性分析以解析流动依赖甲基化动力学，位点特异性 CRISPR-m
6A 编辑以建立因果关系，以及 TEER、通透性分析和血管芽生实验以连接分子事件与功能输出。进一步结合单细胞和空间多组学技术，有望解析保护性与易损性血管区域中的内皮异质性。
在转化意义上，文章认为 H19 或相关转录本上的剪切敏感性 m
6A 特征可望成为内皮失调生物标志物，而调节“读者”竞争则可能成为恢复 RNA 稳态的新策略。不过，修饰特异性、流型异质性以及长期安全性仍是必须面对的挑战。整体上，本文以 KLF2/4–METTL3–H19 轴为代表，构建了机械生物学与表观转录组学交叉的新型血管调控视角。
