与微好氧条件下硫酸盐还原增强相关的联盟级特征及微生物机制

时间:2026年6月1日
来源:Journal of Hazardous Materials

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李园园|曹英佳|胡振琪|李长江|阮梦颖|张珂|牛向义|朱一阳|田宇中国矿业大学环境与空间信息学院,徐州221116,中国摘要微好氧环境在富含硫酸盐的废物系统中普遍存在,但在微好氧而非严格厌氧条件下实现高效硫酸盐还原的机制仍不甚明了。本研究比较了来自煤矸石生境的八种富集微生物群落,

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李园园|曹英佳|胡振琪|李长江|阮梦颖|张珂|牛向义|朱一阳|田宇
中国矿业大学环境与空间信息学院,徐州221116,中国

摘要

微好氧环境在富含硫酸盐的废物系统中普遍存在,但在微好氧而非严格厌氧条件下实现高效硫酸盐还原的机制仍不甚明了。本研究比较了来自煤矸石生境的八种富集微生物群落,以确定影响硫酸盐还原性能的物理化学、结构和微生物因素。在14天的培养过程中,硫酸盐还原表现出明显的三阶段动力学特征,第6天后这些群落分为高绩效组和低绩效组。高绩效群落表现出更高的生物量积累、更快的还原环境建立速度、更小的pH波动范围、更低的电导率、更小的聚集体尺寸以及更接近中性的ζ电位。X射线光电子能谱分析显示,生物沉淀物中同时存在SO42−、SO32−、S2O32−、S22−和S2−,表明其硫氧化还原特征是混合的,而非单一的末端硫化物形式。微生物群落分析表明,高硫酸盐还原性能与较低的α多样性、更强的网络中心性以及肠杆菌属克雷伯菌属的优势有关。功能上,高绩效群落富含参与硫酸盐吸收、激活和有机硫转运的基因,而低绩效群落则表现出与含硫氨基酸生物合成相关的较强信号。硫中间体与硫转运/激活基因呈正相关,但与生物合成基因呈负相关,这表明混合硫氧化还原特征可能与硫的获取/激活过程有关。总体而言,高效的硫酸盐还原与具有生物量增长、快速氧化还原缓冲、紧凑聚集体结构和协调硫代谢再分配的群落特征相关。这些发现为在氧气波动的污染环境中设计稳健的硫酸盐还原微生物组提供了机制解释。

引言

硫酸盐还原是自然和工程环境中关键的厌氧呼吸过程,对硫循环、金属固定、碱度生成以及富含硫酸盐系统的氧化还原演变具有重要调控作用[1]。特别是在受采矿影响的环境中,硫酸盐还原微生物尤为重要,因为它们可以将硫酸盐转化为硫化物,消耗酸性物质,并促进溶解金属以难溶硫化物的形式沉淀,从而为酸性废物和含硫酸盐废水的处理提供了有前景的途径[2]。因此,硫酸盐还原微生物组被广泛认为是处理酸性矿井排水、矿渣渗滤液和其他含硫废水的重要生物资源[3]。
尽管具有这种潜力,但由于长期以来的假设认为高效硫酸盐还原需要严格厌氧条件和典型的硫酸盐还原细菌的优势,实际应用硫酸盐还原群落常常受到限制[4]。然而,在许多现实系统中,氧气侵入难以避免。煤矸石堆、浅层沉积物、废物储存库和处理反应器通常会经历氧化还原条件的波动、间歇性曝气以及微尺度的氧化-还原界面[5]。越来越多的证据表明,这些环境中的硫循环并非仅由典型的硫酸盐还原菌控制,而是由代谢多样的群落共同作用,其中典型和非典型分类单元通过交叉喂养、氧化还原缓冲和中间硫转化共同影响硫的转化[6]。这种更广泛的生态观点意味着,在微好氧条件下发生的硫酸盐还原可以更好地理解为群落层面的涌现特性,而不仅仅是单一系统发育类群的功能[7]。
另一个重要的复杂性在于,硫酸盐还原很少是简单的从硫酸盐到硫化物的单向转化。实际上,微生物的硫代谢通常涉及多种中间体,包括亚硫酸盐、硫代硫酸盐、多硫化物和零价硫,其产生和转化反映了电子转移的深度、方向和效率[8]。最近的研究表明,在异化硫代谢过程中,硫中间体可以被主动生成和循环利用,即使在以硫酸盐还原为主的系统中,硫氧化还原网络也可能保持动态[9]。因此,仅评估末端硫化物的产生可能会忽略关于电子如何分配以及在非理想环境条件下硫酸盐还原性能如何稳定的关键机制信息[10]。
同时,硫酸盐还原群落的性能不仅受硫代谢本身的影响,还受微生物相互作用发生的物理化学和结构环境的影响。碳供体供应、pH值、氧化还原电位和铁的可用性都已知会影响硫酸盐还原活性,但这些因素可能主要是通过群落层面的组织作用而非直接的热力学效应来发挥作用的[11]。特别是,细胞外聚合物(EPS)、胶体稳定性和聚集体结构可能强烈影响细胞间的接近程度、底物扩散、矿物成核和局部电子转移,从而调节硫还原功能的表达[12]。然而,这些结构因素在当前的硫酸盐还原机制模型中整合得还不够充分,尤其是在微好氧条件下[13]。同样,高性能群落中硫激活、硫同化、中间硫转化和非典型优势分类单元的各自作用也尚未得到充分研究[14]。
这些知识空白对于基于煤炭的固体废物和富含硫酸盐的采矿环境的生物修复尤为重要,在这些环境中,氧气波动、异质底物和复杂的Fe–S相互作用是普遍存在的特征[15]。在这种条件下,关键的科学问题不再是硫酸盐还原是否能够发生,而是哪些因素决定了硫酸盐还原群落在微好氧压力下是否能够高效、结构稳定和功能协调[16]。要回答这个问题,需要将时间性能动态与硫价特征、EPS化学性质、胶体组织、群落结构和硫代谢遗传潜力联系起来,在一个统一的分析框架内进行探讨[17]。
在本研究中,我们在微好氧条件下富集了八种天然微生物群落,并系统地比较了它们的硫酸盐还原性能、物理化学轨迹、生物沉淀物、EPS特性、胶体性质、群落组成、共现模式和硫代谢潜力。我们的目标是确定促进硫酸盐还原的关键驱动因素,并阐明这些因素如何与微生物群落组织和硫处理机制耦合。我们假设,在微好氧条件下的高硫酸盐还原性能不能仅通过典型硫酸盐还原菌的富集来解释,而是源于生物量积累、氧化还原缓冲、紧凑聚集体组织、硫激活/转运和中间硫转化的协调优化。通过将功能性能与分类学、地球化学和分子证据相结合,本研究旨在为理解并在氧气波动环境中设计硫酸盐还原微生物组提供更机制化的框架。

章节片段

样品收集和微好氧富集群落的建立

从中国黄河流域不同采矿区的八个代表性煤矸石堆中收集了新鲜表土,包括鄂尔多斯(Erdos)、太原(TY)、朔州(SZ)、神木(SM)、银川(YC)、焦作(JZ)、吴海(WH)和枣庄(ZZ)(图1)。在每个地点,从煤矸石堆20–50厘米深度处无菌采集多个子样本,充分混合后形成一个复合样本。样本在干冰上运输,并在24小时内进行处理。
每个

硫酸盐还原的时间动态及相关物理化学参数

在14天的培养过程中,八种富集群落的硫酸盐还原表现出明显的三阶段动力学特征(图2a):第1–3天为滞后阶段,第4–7天为快速增加阶段,第10–14天为平台期。硫酸盐还原率(SRR)排序如下:S-Erdos(45.68%)> S-TY(34.32%)> S-SZ(34.14%)> S-SM(33.47%)> S-YC(23.69%)> S-JZ(19.55%)> S-WH(19.11%)> S-ZZ(12.97%)。为了进行描述性比较,选择了最终SRR值最高的四种群落,即S-Erdos

微好氧条件下的硫转化特征和氧化还原演变

硫酸盐还原是一个多步骤的电子转移过程,涉及硫酸盐依次转化为亚硫酸盐、硫代硫酸盐、多硫化物/单质硫,最终形成硫化物。因此,生物沉淀物中硫价态的分布可以综合反映电子转移的深度和硫转化途径[51]。
本研究通过XPS分析发现,所有群落中同时存在SO42−、SO32−、S2O32−、S22−和S2−(图3a–h),表明

结论

本研究表明,通过群落层面的适应,即使在微好氧条件下也能实现高效的硫酸盐还原,而不仅仅依赖于典型的厌氧硫酸盐还原细菌。高性能群落的特征是更快的生物量积累、更早的还原微环境建立、更小的pH波动范围和更紧凑的聚集体结构,表明微好氧条件下的硫酸盐还原受到

环境意义

我们的发现挑战了传统观点,即高效硫酸盐还原需要严格厌氧条件和典型硫酸盐还原细菌的优势。相反,在微好氧条件下,高效的硫酸盐还原可以由具有氧化还原缓冲、硫激活、群落中心性和紧凑聚集体结构的合作群落实现。这些见解对于氧气波动的环境(如煤矸石堆、产酸废物储存库等)具有高度相关性

CRediT作者贡献声明

胡振琪:撰写 – 审稿与编辑、监督、资源管理、项目管理、资金获取、概念构思。曹英佳:撰写 – 审稿与编辑、验证、软件使用、方法学研究、数据分析、数据管理。李园园:撰写 – 初稿撰写、可视化处理、验证、方法学研究、数据分析、数据管理、概念构思。牛向义:数据分析。张珂:数据分析。阮梦颖:

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

致谢

本研究得到了国家重点研发计划(批准号2023YFE0122300)和中国国家重点研发计划(编号2019YFC1805003和2020YFC1806503)的支持。

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