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突破PAM限制:一种基于粘性末端介导的CRISPR/Cas12a与RPA耦合的通用双链DNA检测方法及其在KRAS G12C单碱基突变检测中的应用
本研究开发了一种通用PAM-free的CRISPR/Cas12a检测平台,通过整合粘性末端介导的CRISPR/Cas12a与重组酶扩增(RPA),利用NlaIII酶切实现扩增产物精准切割,形成标准粘性末端,显著提升Cas12a活性。该方法灵敏度达40 aM,成功检测0.1%频发的KRAS G12C突变,与FastNGS结果一致,并实现单管检测策略,简化流程并降低气溶胶污染。
来源:Analytical Chemistry
时间:2025-11-12
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基于VQR、VRER和EQR变体的CRISPR-Cas9系统扩展PAM(广泛匹配)兼容性的设计规则
PAM识别机制研究表明,CRISPR-Cas9变体VQR/VRER/EQR的非标准PAM结合依赖直接接触与远程网络协同作用,D1135 V/E置换通过K1107和S1109稳定DNA结合,而单纯R→Q替换破坏结合裂隙和REC3动态,影响效率。摘要分隔符:
来源:The Journal of Physical Chemistry B
时间:2025-11-12
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综述:猪角膜组织与人畜共患病风险:当前证据的综述
角膜浑浊影响全球数百万患者,传统器官移植供体不足。猪角膜异种移植因解剖生理相似性成为替代方案,CRISPR/Cas技术通过基因编辑降低免疫排斥和病原体风险。潜在病原体如猪内源性逆转录病毒(PERV)、猪巨细胞病毒(PCMV)等,但无活体传播证据。监管机构如WHO和IXA已制定指南,韩国和中国已启动临床试验,生物安全措施有效减少微生物污染。该技术风险低于其他器官异种移植,未来研究将验证长期安全性和有效性。
来源:Xenotransplantation
时间:2025-11-11
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基于结构的CRISPR/Cas9蛋白分类:一种用于阐明Cas9别构效应的机器学习方法
本研究采用结构基机器学习系统识别CRISPR/Cas9的长程调理性网络,筛选出28对关键Lys-Arg残基对,揭示其介导的“电负性山谷”对SpCas9稳定性和特异性的调控机制,并通过分子动力学验证其作用路径,为理性设计高保真Cas9变体提供新框架。
来源:Journal of Molecular Biology
时间:2025-11-11
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综述:SOX9:一种在免疫系统中具有双重功能的新型调节因子,及其作为治疗靶点的潜力
SOX9作为转录因子在肿瘤免疫逃逸中通过抑制T/NK细胞功能、促进M2巨噬细胞极化及调控免疫检查点分子发挥关键作用,而在炎症和修复过程中则通过维持巨噬细胞功能促进组织再生,呈现双功能特性,为癌症治疗和免疫相关疾病提供了新靶点。
来源:Frontiers in Molecular Biosciences
时间:2025-11-11
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CRISPR/Cas9介导的基因组编辑研究发现,10个在睾丸中表达丰富的基因以及1个在睾丸中表达不丰富的基因对小鼠的繁殖能力并非必需
本研究通过CRISPR/Cas9技术敲除11个候选基因(10个睾丸富集基因及1个非富集基因),评估其对小鼠精子生成及生育能力的影响。结果显示,所有基因敲除小鼠均保持正常生育能力及精子形态与运动功能,提示这些基因可能并非精子生成必需。分隔符
来源:Andrology
时间:2025-11-11
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HIGD2通过改善线粒体功能赋予水稻耐缺氧胁迫的能力
水稻OsHIGD2基因通过维持线粒体呼吸复合体IV活性及细胞膜完整性,增强植株缺氧适应能力。过表达OsHIGD2的转基因水稻在7天缺氧处理后恢复期叶数、长度及面积分别提升2-3倍,而敲除突变体则出现生长迟滞和膜透性增加。免疫印迹证实OsHIGD2蛋白在过表达株系中显著积累,且线粒体复合体IV活性在过表达株中提升2倍,突变体降低30%。研究显示OsHIGD2介导的缺氧适应机制主要依赖线粒体功能维持而非糖酵解途径调整,为抗洪水稻育种提供新靶点。
来源:Plant Physiology and Biochemistry
时间:2025-11-11
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基于地图的克隆技术及功能验证:研究ClChlH基因对西瓜(Citrullus lanatus)果皮黄色的调控作用
水melon黄皮表型由单一显性基因ClYR控制,该基因位于染色体4的325.37 Kb区间,包含ClChlH基因的启动子区InDels变异,导致转录抑制和黄皮表型。CRISPR验证显示ClChlH功能突变与黄-绿皮及叶色嵌合表达相关。摘要结束分隔符:
来源:Theoretical and Applied Genetics
时间:2025-11-11
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Kluyvera ascorbata的CRISPR-cas系统:来自基因组数据的见解
Kluyvera属作为机会致病菌及耐药基因载体受到关注,研究通过基因组挖掘分析13种Kluyvera的CRISPR-Cas系统,发现仅K. ascorbata具有完整型I-E系统及多簇阵列,spacer序列揭示与噬菌体/质粒的互作历史,系统发育树显示其与沙门氏菌等Enterobacteriaceae亲缘关系近,首次构建该属CRISPR-Cas架构图谱,为诊断技术革新提供依据。
来源:Current Genetics
时间:2025-11-11
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CRISPR/Cas12b介导的一管式活细胞检测方法有助于在禽肉中检测沙门氏菌(Salmonella Typhimurium)
CRISPR/Cas12b结合酶切重组扩增(ERA)的一管式快速检测方法,通过PMA预处理抑制死菌DNA干扰,37℃扩增结合60℃Cas12b活化的温度分区设计,实现沙门氏菌Typhimurium的高灵敏度检测(1pg/μL DNA,1.43×10² CFU/mL鸡肉,1×10² CFU/mL鸭肉),适用于食品样本现场筛查。
来源:Food Bioscience
时间:2025-11-11