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本研究针对脑出血(ICH)后白质损伤修复机制不明的临床难题，通过单细胞测序(scRNA-seq)发现THBS1+巨噬细胞亚群在修复期的持续聚集现象。研究人员揭示降钙素基因相关肽(CGRP)通过调控骨髓源性THBS1+巨噬细胞极化，促进髓鞘再生（降低g-ratio）和神经功能恢复（改善FA/RD值），为靶向神经免疫轴治疗脑出血提供了新策略。
脑出血(Intracerebral hemorrhage, ICH)作为最致命的卒中类型，其致残率高达80%，但现有治疗手段对血肿清除后的神经修复束手无策。尤其令人困扰的是，脑出血后白质纤维的持续性损伤直接导致患者运动功能障碍，而传统观点认为巨噬细胞在脑损伤中主要扮演"破坏者"角色。这种认知局限使得临床治疗陷入僵局——如何在抑制急性期炎症的同时，激活内源性修复机制？浙江大学医学院附属第二医院的研究团队在《Journal of Neuroinflammation》发表的突破性研究，首次揭示了CGRP-THBS1+巨噬细胞轴在脑出血后白质修复中的核心作用，为破解这一临床难题提供了全新视角。
研究团队运用多组学联用技术，首先通过整合GSE167593和GSE230414单细胞数据集，发现CD45+免疫细胞中THBS1+巨噬细胞亚群在损伤14天后仍持续增加。行为学测试（转棒实验和胶带去除实验）结合扩散张量成像(DTI)显示，这类细胞比例与白质完整性指标（FA值升高、RD值降低）及运动功能恢复呈显著正相关。骨髓移植实验证实颅骨骨髓是THBS1+细胞的主要来源，而ELISA检测发现ICH后脑膜CGRP表达显著上调。通过腹腔注射CGRP干预，研究团队成功增强THBS1+巨噬细胞浸润，电镜观察证实治疗组g-ratio（轴突直径/有髓纤维总直径）显著改善，实现从分子机制到功能恢复的全链条验证。
动态免疫景观图谱绘制
通过单细胞转录组分析，研究人员在ICH后14天的大脑CD45+细胞中鉴定出5个主要免疫细胞群。不同于中性粒细胞和T细胞的瞬时浸润，Ly6Chi单核细胞衍生的巨噬细胞呈现持续增长趋势（3天占比12.7%增至14天28.3%），流式细胞术验证其表面标志物CD11b+F4/80+表达特征。亚群分析揭示这群巨噬细胞存在4种功能表型，其中THBS1+亚型高表达Arg1、Tgm2等修复相关基因，GO分析显示其显著富集于"髓鞘形成"（P=3.2×10-8）和"轴突再生"（P=1.7×10-5）通路。
骨髓-脑轴通讯机制解析
伪时序分析显示THBS1+巨噬细胞位于分化轨迹起点，暗示其可能来自外周循环。令人惊讶的是，流式检测发现ICH后7天颅骨骨髓（而非脾脏）中THBS1+髓系细胞增加3.2倍，且呈现明显的偏侧性分布（患侧比健侧高68%）。免疫荧光三维重建显示这些细胞紧密聚集在颅骨骨髓腔，同时脑膜CGRP+神经纤维密度增加2.4倍（P<0.01），ELISA检测发现骨髓CGRP分泌量提升至 sham组的2.7倍。
CGRP的修复程序启动
转录组交叉分析发现，CGRP诱导的巨噬细胞与THBS1+亚群基因特征高度重叠（Jaccard指数=0.63）。体外实验显示CGRP处理使BMDM（骨髓源性巨噬细胞）中Thbs1表达上调4.1倍，同时促进Stat3、Osm等促髓鞘化因子分泌。过继转移实验证实，CGRP预处理的BMDM注射使脑内MBP+NF+髓鞘化轴突数量增加2.3倍（P<0.01），Western blot显示白质标志物MBP蛋白恢复至正常水平的76%。
治疗干预的功能验证
腹腔注射CGRP（1μg/g）使脑内THBS1+巨噬细胞比例从18.4%提升至34.7%。DTI显示治疗组EC区FA值提高27%（P<0.05），IC区RD值降低39%（P<0.01）。超微结构分析显示，CGRP组g-ratio从0.82降至0.76（P<0.001），符合成熟髓鞘的生理特征。行为学测试表明治疗组在转棒实验中的停留时间延长2.1倍，胶带去除潜伏期缩短68%（P<0.01）。
这项研究开创性地描绘了"CGRP-骨髓THBS1+巨噬细胞-白质修复"的神经免疫调控轴，突破性地证实：①颅骨骨髓作为特殊的免疫储备库，通过CGRP信号响应中枢损伤；②THBS1+巨噬细胞具有独特的促修复转录特征（Thbs1+Arg1+Tgm2+）；③靶向CGRP可时空特异性调控骨髓免疫细胞的重编程。该发现不仅为脑出血后神经修复提供新的治疗靶点，更启示神经系统疾病治疗应关注"骨-脑轴"的免疫调控作用。未来研究可进一步探索：①性别差异对THBS1+巨噬细胞功能的影响；②CGRP受体拮抗剂（如偏头痛治疗药物）是否干扰内源性修复过程；③THBS1是否通过CD36等受体直接作用于少突胶质前体细胞。这些问题的解答将推动神经免疫治疗从基础研究向临床转化迈进。
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