1 引言
老龄化伴随免疫应答进行性衰退，导致流感等呼吸道感染性疾病在老年群体中易感性及严重程度显著升高。尽管高剂量或佐剂流感疫苗可部分改善老年人群保护效果，但疫苗诱导的抗体滴度、B细胞应答及T细胞增殖能力仍显不足。研究表明，衰老微环境通过慢性低度炎症（即“炎症衰老”）及细胞衰老积累，直接抑制CD4 T细胞分化、滤泡辅助T细胞（Tfh）功能及生发中心形成，并削弱CD8 T细胞增殖与细胞毒性。细胞衰老作为应激诱导的增殖停滞状态，通过分泌SASP驱动组织微环境紊乱。近年研究发现，senolytics（如达沙替尼D与槲皮素Q联用）可清除衰老细胞并改善年龄相关病变，但其对疫苗应答的调节作用尚未明确。
2 结果
2.1 D+Q对疫苗诱导血清IgG及CD4 T细胞应答的影响
在老年小鼠疫苗接种前给予D+Q处理，未显著提升血清流感核蛋白（NP）特异性IgG抗体滴度或脾脏NP特异性CD4 T细胞数量。尽管D+Q对NP特异性CD4 T细胞频率存在主效应，但整体疫苗诱导的体液与细胞免疫应答未获增强。
2.2 D+Q对流感感染后体重变化的影响
NP疫苗接种可完全预防年轻小鼠流感诱导的体重下降，并对老年小鼠产生部分保护作用。D+Q处理仅在未接种疫苗的老年组中短暂缓解感染后体重损失（15 DPI），但对疫苗接种组的保护效果无显著改善。
2.3 D+Q对感染期CD4 T细胞及抗体应答的调节
在纵隔淋巴结（MLN）中，D+Q处理的疫苗接种老年小鼠表现为NP特异性CD4 T细胞亚群（如Treg、Tfh、Th2、Tfr）动态变化，但变化幅度较小且未影响肺部T细胞应答。未接种疫苗的老年组中，D+Q可短暂提升血清NP IgG抗体水平（12 DPI），但15 DPI时全病毒（PR8）IgG抗体滴度反而下降。
2.4 D+Q对CD8 T细胞应答的重编程
D+Q处理的疫苗接种老年小鼠在感染后期（12 DPI）肺部NP特异性CD8 T细胞频率显著降低，而流感酸性聚合酶（PA）特异性CD8 T细胞频率与数量呈上升趋势，表明免疫优势格局由NP主导转向PA参与。未接种疫苗的老年组中，D+Q同样抑制PA特异性CD8 T细胞应答，提示其对初次感染免疫格局的广泛影响。
2.5 Senolytics对肺病毒载量与病理结局的影响
D+Q未改善疫苗接种老年小鼠的肺病毒清除能力或病理损伤，但未接种疫苗的老年组中D+Q处理导致病毒清除延迟（15 DPI）。年轻未接种组中，D+Q反而加重肺组织病理损伤，可能与衰老细胞在肺修复中的作用被干扰有关。值得注意的是，D+Q处理的疫苗接种老年组在感染后期（20 DPI）血清全病毒IgG抗体水平升高，提示其或促进感染诱导的de novo抗体生成。
3 讨论
本研究首次揭示D+Q虽未能增强老年小鼠流感疫苗的直接保护效力，但显著改变感染期间CD8 T细胞免疫优势 hierarchy，即抑制疫苗预存的NP特异性应答同时增强PA特异性应答。这种免疫格局重塑未影响病毒清除或肺病理结局，但伴随后期全病毒抗体水平升高，暗示senolytics可能通过调节抗原呈递或T细胞激活通路（如NF-κB）间接影响免疫应答广度。此外，D+Q在未接种老年小鼠中削弱CD8 T细胞应答并延迟病毒清除，提示其效果受治疗时机与感染间隔影响。年轻小鼠中D+Q加重肺损伤的结果进一步强调需审慎评估senolytics在不同年龄及组织修复中的双重作用。
4 方法
实验采用18–20月龄C57BL/6JN老年雄性小鼠，以5 mg/kg达沙替尼与50 mg/kg槲皮素联用（口服灌胃）或载体对照处理。疫苗接种采用重组PR8流感核蛋白（NP）加铝佐剂腹腔注射，感染阶段以500 EID50PR8病毒滴鼻攻击。病毒载量通过RT-qPCR检测PA基因拷贝数，抗体滴度采用ELISA测定，细胞应答通过流式细胞术结合MHC I/II类四聚体染色分析，肺组织病理经H&E染色后由盲法评分。
（注：以上内容严格依据原文数据与结论缩编，未添加非文献支持信息。）
