提高内在蛋白质无序性可增强SARS CoV2疫苗候选抗原的CD8+免疫原性

李婉|谢冰娴|末田正宏|Maura E. O'Malley|卡洛斯·J·卡马乔|格雷格·M·德尔戈夫|袁畅|帕特里克·S·摩尔

美国宾夕法尼亚州匹兹堡大学希尔曼癌症中心癌症病毒学项目，邮编15232

摘要

CD8+ T细胞可靶向SARS CoV2中保守的RNA依赖性RNA聚合酶（RdRp，nsp12），这一机制或许能为抵御多种冠状病毒株提供交叉保护作用。然而，天然形式的RdRp具有初级序列免疫逃逸特性，会抑制RdRp衍生的多肽在MHC I类分子上的呈递。我们发现这与RdRp的高度有序结构有关，而将RdRp分解为两个内在无序且互补的亚片段后，这一问题便可得到解决（RdRp^Frag）。RdRp^Frag几乎拥有全长蛋白中的所有抗原表位。通过同基因MC38癌细胞小鼠模型实验，发现细胞内表达RdRp^Frag能够抑制肿瘤生长，并且通过四聚体检测方法显示，它能显著增加特异性肿瘤浸润效应T淋巴细胞的数量。使用WA-1毒株的RdRp^Frag进行mRNA疫苗接种，能比使用天然WA-1毒株的RdRp mRNA引发更强的CD8+ T细胞反应，但在转基因仓鼠感染实验中，未能有效预防奥密克戎株SARS CoV2的急性早期感染。这些研究结果表明，蛋白质的高度有序结构可能是病毒用于逃避T细胞识别的一种未被发现的免疫逃逸机制。通过蛋白质亚片段化增加抗原的内在无序性，或许可以提高抗病毒或抗肿瘤疫苗候选物的抗原性。