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基于 ChromInst 的 PGT-A/-SR 技术：精准助力辅助生殖遗传检测

编辑推荐：

为解决 PGT-A/-SR 技术准确性和适用性问题，郑州大学第一附属医院等机构研究人员开展相关研究，结果表明 ChromInst -based PGT-A/-SR 检测性能稳定准确，能为遗传咨询提供数据支持。

一、研究背景

二、研究方法

1. 研究设计与患者选择：这是一项大规模、多中心、真实世界的临床研究。研究人员招募了 2018 年至 2022 年在五家生殖中心接受 PGT-A/SR 的患者。纳入标准包括进行卵胞浆内单精子注射（ICSI）且首次取卵至少有两个可用囊胚，同时满足如染色体结构重排、有染色体异常患儿等多种条件。排除标准涵盖卵巢反应不良、不适合妊娠的全身性疾病等。
2. 辅助生殖技术（ART）治疗：详细规范了取卵、受精、胚胎评估和活检的操作流程。取卵在注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）36（±2）小时后进行，通过 ICSI 技术受精，采用 Gardner 分级系统评估胚胎，对可用囊胚进行滋养外胚层（TE）活检，活检后囊胚进行玻璃化冷冻。
3. 全基因组扩增、文库制备和测序：使用 ChromInst™试剂盒，基于多重退火和成环循环扩增（MALBAC）方法对收集的细胞进行全基因组扩增和文库制备，之后在 Ion Torrent 平台测序。
4. 拷贝数变异（CNV）分析和 MAPD 值计算：利用 R 包‘DNACopy’进行 CNV 分析和可视化，计算 MAPD 值评估数据质量。
5. 荧光原位杂交（FISH）验证：对 TE 细胞进行固定、杂交等操作，在荧光显微镜下观察，以验证 PGT 结果。
6. 临床结局评估：主要临床结局为累积活产率，即活产婴儿数与取卵周期数的比值。
7. 统计分析：运用 SPSS 25.0 软件进行统计分析，计算敏感性、特异性等指标评估 PGT-A/-SR 的性能。

三、研究结果

1. Chrominst 的稳健性验证：不同中心的胚胎培养和活检方法存在差异。研究分析了参考样本和患者胚胎样本的测序数据，结果显示所有中心参考样本的 MAPD 值均小于 0.25，99.5%（5,699/5,730）的胚胎 MAPD 值小于 0.25，各中心胚胎检测成功率相似，表明 ChromInst 技术能有效应对样本差异，确保测序结果稳定可靠。
2. PGT-A/-SR 的准确性验证：以羊水穿刺、新生儿血液和流产样本结果为阴性金标准，FISH 检测结果为阳性金标准。PGT-A 阴性结果的一致性为 99.8%（506/507），阳性结果的一致性为 99.8%（1,123/1,125），表明该技术准确性高，假阳性和假阴性率低。
3. 胚胎的 CNV 分析：PGT-A/-SR 检测成功率为 99.3%（5,689/5,730）。正常核型夫妇胚胎的整倍体率为 45.9%（981/2,135），异常核型夫妇胚胎的整倍体 + 平衡率为 30.9%（1,099/3,554）。不同形态学等级和胚胎发育天数的胚胎整倍体 + 平衡率存在差异。此外，研究还分析了非整倍体胚胎中各染色体异常的频率，发现不同类型染色体结构重排夫妇的胚胎整倍体 + 平衡率和染色体异常情况不同。
4. 临床结局：1,015 对夫妇中 743 名患者进行了单囊胚移植。PGT-A 组和 PGT-SR 组的累积活产率分别为 66.0%（198/300）和 69.1%（306/443），两组在首次移植活产率和累积活产率上无显著差异。

四、研究结论与意义

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