在细胞的炎症和死亡过程中，受体相互作用蛋白激酶 1（RIPK1）和受体相互作用蛋白激酶 3（RIPK3）扮演着至关重要的角色。RIPK1 参与激活核因子 κB（NF-κB），促进炎症因子的合成与释放，同时它还能通过激酶活性触发细胞坏死性凋亡或凋亡。RIPK3 则可激活混合谱系激酶结构域样蛋白（MLKL），诱导细胞膜通透性改变，引发坏死性凋亡，还能影响线粒体相关代谢酶，加剧炎症反应。然而，对于 UVB 诱导的角质形成细胞死亡是否涉及 RIPK1 介导的坏死性凋亡，以及 RIPK1 和 RIPK3 在 UVB 辐射诱导的表皮损伤中的具体作用和相互关系，科学界仍知之甚少。

为了揭开这些谜团，中国医学科学院整形外科医院的研究人员展开了深入研究。他们的研究成果发表在《Cell Death Discovery》上，为理解 UVB 对皮肤的损伤机制以及寻找潜在治疗靶点提供了重要线索。

研究人员在此次研究中运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，他们培养了 HaCaT 角质形成细胞系，通过转染构建稳定表达细胞系，利用 CCK-8、ATP 检测等实验评估细胞活力，借助 ELISA 测定细胞培养上清液中的炎症因子水平，运用蛋白质免疫印迹（Western blot）检测蛋白表达和磷酸化水平，采用 PI 染色和流式细胞术分析细胞死亡和凋亡情况。在动物实验中，选用野生型（WT）C57BL/6J 小鼠和 RIPK3 基因敲除（RIPK3-KO）小鼠，对其进行 UVB 照射，通过组织病理学分析、TUNEL 凋亡检测等方法评估皮肤损伤和细胞凋亡情况。

RIPK1 促进 UVB 诱导的炎症：研究人员对体外培养的 HaCaT 细胞进行不同剂量的 UVB 照射，发现随着 UVB 剂量增加，RIPK1 和 IκBα 蛋白水平下降。用 RIPK1 激酶抑制剂 Nec-1 预处理细胞，无法抑制 UVB 诱导的炎症因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）增加；敲低 RIPK1 则显著抑制了 IL-1β 和 TNF-α 的分泌。这表明 RIPK1 的蛋白水平而非激酶活性，在 UVB 诱导的 HaCaT 细胞炎症中发挥作用，它通过下调 IκBα 蛋白水平，激活 NF-κB，促进炎症因子的产生。

RIPK1 不参与 UVB 诱导的细胞死亡：研究人员发现，用 Nec-1 预处理或敲低 RIPK1，都无法改善 UVB 照射导致的 HaCaT 细胞活力下降、细胞死亡增加和凋亡率上升。且 UVB 照射后，RIPK1 激酶未被激活。这说明 RIPK1 的激酶活性和蛋白水平均与 UVB 诱导的 HaCaT 细胞死亡无关。

RIPK3 促进 UVB 诱导的细胞死亡：UVB 照射 HaCaT 细胞后，研究人员检测到 RIPK3 和 MLKL 的磷酸化水平在 12 小时后显著增加。用 RIPK3 激酶抑制剂 GSK’872 预处理或敲低 RIPK3，可提高细胞存活率，减少细胞凋亡；而过表达 RIPK3 则加剧细胞死亡。这表明 RIPK3 在 UVB 诱导的细胞死亡中起促进作用。

RIPK3 介导 UVB 诱导的炎症：研究发现，Nec-1 不能抑制 UVB 诱导的 RIPK3 和 MLKL 磷酸化，而 RIPK3 抑制剂可显著降低 MLKL 磷酸化水平。此外，GSK’872 预处理或敲低 RIPK3，可减少 UVB 诱导的炎症因子分泌；过表达 RIPK3 则增强炎症因子分泌。这表明 RIPK3 通过坏死性凋亡介导 UVB 诱导的炎症，且独立于 RIPK1 激酶活性。

RIPK3 促进 UVB 激活的线粒体凋亡途径：UVB 照射 HaCaT 细胞后，caspase-9 和 caspase-3 的活性增加，而 GSK’872 预处理可抑制这一现象。同时，UVB 照射降低了 Bcl-2/Bax 蛋白比值，抑制 RIPK3 激酶活性则可提高该比值。这说明 RIPK3 促进了 UVB 诱导的线粒体凋亡途径的激活。

RIPK3 调节 UVB 诱导的小鼠表皮坏死性凋亡：对 WT 小鼠进行 UVB 照射后，其皮肤出现明显炎症，角质形成细胞大量坏死和凋亡，同时 p-RIPK3、p-MLKL 和 p-NFκB 水平升高。而 RIPK3-KO 小鼠在 UVB 照射后，皮肤损伤明显减轻，角质形成细胞的坏死和凋亡减少，p-MLKL 和 p-p65 水平降低。这表明 RIPK3 在 UVB 诱导的小鼠表皮坏死性凋亡中起重要调节作用。

综合研究结果与讨论部分可知，UVB 照射 HaCaT 细胞后，会诱导 RIPK1 介导的 IκBα 降解，激活 NF-κB 通路，产生炎症因子。同时，UVB 可独立于 RIPK1 激活 RIPK3，引发下游 MLKL 磷酸化，诱导坏死性凋亡，增强炎症反应。RIPK3 还参与了 UVB 诱导的 HaCaT 细胞线粒体凋亡途径的激活。该研究揭示了 UVB 诱导皮肤细胞死亡和炎症的新机制，为皮肤光损伤的防治提供了潜在靶点，RIPK3 激酶抑制剂 GSK’872 展现出了治疗皮肤光损伤的潜力。未来，进一步探究 UVB 照射导致 RIPK1 泛素化的机制，以及 UVB 激活 RIPK3 激酶的具体途径，将有助于更深入地理解皮肤光损伤的病理过程，为开发更有效的治疗方法奠定基础。