基于亲和超滤-UPLC-QE-Orbitrap-MS技术平台的菟丝子靶向雌激素受体β抗绝经后骨质疏松活性成分高效筛选研究

为解决绝经后骨质疏松(PMOP)的治疗难题，研究人员通过亲和超滤(Ultrafiltration)结合超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-QE-Orbitrap-MS)技术，系统筛选了菟丝子(Cuscutae semen)中与雌激素受体β(ESR2)结合的活性成分。研究发现100%甲醇洗脱组分具有显著抗骨质疏松活性，并鉴定出紫云英苷(Astragalin)、异鼠李素(Isorhamnetin)和槲皮苷(Quercitrin)三种黄酮类化合物，为PMOP创新药物开发提供了新思路。

雌激素缺乏引发的绝经后骨质疏松(Postmenopausal osteoporosis, PMOP)是临床常见骨骼疾病，传统中药菟丝子(Cuscutae semen)及其复方制剂展现出显著疗效。为揭示其作用机制，研究团队建立了一套创新技术路线：首先采用C₁₈色谱柱对菟丝子提取物进行极性分级，通过检测MC3T3-E1细胞中骨保护素(OPG)表达水平初步评估抗骨质疏松活性。随后运用亲和超滤(Affinity Ultrafiltration)耦合超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-QE-Orbitrap-MS)技术平台，高效筛选出与雌激素受体β(ESR2)特异性结合的活性分子，并通过分子对接验证相互作用机制。

研究取得突破性发现：100%甲醇洗脱组分表现出最强的促骨形成活性，从中鉴定出紫云英苷(Astragalin)、异鼠李素(Isorhamnetin)和槲皮苷(Quercitrin)三种黄酮类化合物能特异性结合ESR2。体外实验通过CCK-8增殖检测、OPG定量和碱性磷酸酶(ALP)活性分析三重验证，证实这些化合物可显著促进成骨细胞功能。该研究不仅建立了"成分筛选-靶点验证-功能评价"的完整研究体系，更为开发靶向ESR2的抗PMOP创新药物提供了重要候选分子。