J.W.T. 范德威尔 | S.M. 恩斯特 | M. 杰宾克 | D. 范登布鲁克 | S.K. 巴德赖辛 | L.C. 斯坦布施 | G. 鲁伊特 | W.S.M.E. 蒂伦 | B.A.M.H. 范维格尔 | J. 斯米特 | A.M. 丁根曼斯 | M.S. 帕茨 | H.J. 杜宾克 | S.M.S. 哈希米 | T. 拉多尼奇 | D. 科恩 | A.J. 范德韦肯 | A. 特尔埃尔斯特 | W. 蒂门斯 | L.E. 亨德里克斯 | A.J. 德朗根
荷兰阿姆斯特丹荷兰癌症研究所胸部肿瘤科
摘要
背景
在EGFR突变阳性（EGFRm+）的非小细胞肺癌（NSCLC）患者中，奥西替尼治疗期间不可避免地会出现耐药机制（RMs），这些机制可能会影响后续的治疗方案。我们假设，要全面分析耐药机制，需要对一线奥西替尼治疗期间疾病进展（PD）患者的肿瘤组织和血浆进行下一代测序（NGS）。
方法
在奥西替尼治疗期间出现疾病进展时，患者接受了血浆和组织的NGS分析。血浆分析使用AVENIO ctDNA扩展面板进行，组织分析则按照当地标准进行DNA和RNA的NGS。成功的测序结果需要能够识别EGFRm突变。
结果
2020年2月至2024年1月期间，共有150名患者参与了研究。其中84%的患者血浆测序成功，94%的患者组织测序成功，81%的患者同时完成了两种方法的测序。总共检测到159种耐药机制，其中76%在组织中，59%在血浆中。两种方法之间的结果一致性为34%。
在54名患者中，检测到了EGFR、MET和/或ERBB2的扩增。有17名患者的两种样本中均检测到至少一种扩增，25名患者仅在组织中检测到扩增。这些组别中血浆中的EGFRm变异等位基因频率（VAF）存在差异（25.9% vs 3.0%，P < 0.05）。
结论
当血浆中的EGFRm VAF较低时，结合肿瘤组织和血浆的测序可以发现更多的耐药机制。因此，建议使用这两种方法进行全面的耐药机制评估。
Clinicaltrials.gov 识别码：NCT04737382
引言
奥西替尼是一种第三代不可逆的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR TKI），能够选择性抑制具有EGFR TKI敏感性和EGFR T790M突变的肿瘤的生长[[1], [2], [3]]。与一代EGFR TKIs相比，奥西替尼治疗未经治疗的EGFR突变非小细胞肺癌（NSCLC）患者的无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）显著延长[1,4]。然而，疾病仍可能进展，这可能是由多种耐药机制（RMs）引起的，而这些机制的发生模式与接受过早期EGFR TKIs治疗的患者不同[5,6]。针对这些耐药机制进行干预非常重要[7]。
耐药机制可以通过分析肿瘤活检和/或血浆来检测。尽管目前IASLC指南推荐“先检测血浆”，但同时分析肿瘤活检和血浆样本可能提供更全面的耐药机制信息[9]。
在OSIRIS试验（
Clinicaltrials.gov 识别码：NCT04737382）中，我们前瞻性地评估了一线奥西替尼治疗期间疾病进展患者的血浆和肿瘤活检中的耐药机制。由于患者体内耐药机制的异质性，我们认为全面的耐药机制分析需要结合肿瘤活检和血浆测序。因此，我们的主要目标是：评估血浆和组织双模态耐药机制分析相对于单一模态分析的价值，并根据多学科分子肿瘤委员会（MTB）的建议提出后续治疗建议。
研究设计
在这项多中心前瞻性研究中，我们计划招募150名接受每日80毫克奥西替尼单药治疗的转移性NSCLC患者。纳入标准为组织学上确诊的转移性NSCLC，且根据治疗医生的评估，患者的疾病处于进展阶段。未明确具体的疾病进展标准。
结果
2020年2月至2024年1月期间，共有160名患者在荷兰的不同医疗机构（NKI [N=100]、Erasmus MC [N=31]、Amsterdam UMC [N=8]、LUMC [N=4]、Maastricht UMC [N=9] 和 UMCG [N=8]）签署了知情同意书。最终共有150名患者符合纳入条件并接受了分析（流程图1，表1）。
讨论
我们证明了在荷兰进行的一项前瞻性多中心研究中，对一线奥西替尼治疗期间疾病进展患者的ctDNA和肿瘤组织进行并行分子分析的可行性。尽管两种方法的一致性仅为34%，但为了全面分析奥西替尼的耐药机制，仍需要同时分析肿瘤组织和ctDNA。然而，使用单一方法进行预筛选也是必要的。
资金信息
这项由研究者发起的研究得到了阿斯利康公司以及荷兰癌症协会和荷兰卫生、福利与体育部对荷兰癌症研究所（NKI）的资助。资助方未参与研究设计、数据收集、分析或论文撰写。
CRediT作者贡献声明
J.W.T. 范德威尔：撰写——初稿编写、数据可视化、资源协调、实验设计、数据分析、数据整理。
S.M. 恩斯特：撰写——审稿与编辑、资源协调、实验设计、概念构思。
M. 杰宾克：撰写——审稿与编辑、资源协调、实验设计、概念构思。
D. 范登布鲁克：撰写——审稿与编辑、数据整理、概念构思。
S.K. 巴德赖辛：撰写——审稿与编辑、数据整理。
L.C. 斯坦布施：撰写——审稿与编辑、数据整理。
伦理批准和参与同意
所有患者均提供了书面知情同意书。与研究相关的所有文件，包括研究方案、知情同意书、信息函及其后续修订版本，均获得了参与中心的机构审查委员会（IRB）和/或医学伦理评估委员会（METC）的批准。该研究已在
Clinicaltrials.gov注册，识别码：NCT04737382。
在Erasmus医学癌症中心（EMC）纳入的患者是通过START-TKI平台（
ClinicalTrials.gov）纳入的。
利益冲突声明
作者声明以下可能被视为潜在利益冲突的情况：Badrising从詹森（Janssen）和辉瑞（Pfizer）获得了演讲费用，并在BMS和詹森担任顾问职务；Dingemans从安进（Amgen）、荷兰癌症协会（Dutch Cancer Society）和HANART获得了资助或合同；从安进（Amgen）、拜耳（Bayer）、勃林格殷格海姆（Boehringer Ingelheim）、赛诺菲（Sanofi）、强生（Johnson & Johnson）、阿斯利康（AstraZeneca）和Mirati获得了咨询费用；从詹森（Janssen）和辉瑞（Pfizer）获得了演讲费等报酬。
致谢
我们感谢M.M. Smeenk绘制了图2。
