1 引言
多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的内分泌疾病，全球约10%-13%的女性受其影响，以月经不规律、不孕、高雄激素血症和卵巢形态异常为主要特征。目前PCOS的治疗主要包括诱导排卵和性激素疗法，但存在卵巢过度刺激综合征（OHSS）等风险。骨形态发生蛋白4（BMP4）作为转化生长因子-β（TGF-β）超家族成员，在卵泡发育和类固醇合成中起关键作用，其信号异常与PCOS病理机制相关。当归芍药散（TSS）作为一种传统日本汉方药，常用于妇科疾病治疗，但其对PCOS的作用机制尚不明确。本研究通过产前二氢睾酮（DHT）暴露构建PCOS大鼠模型，探讨TSS对卵巢形态、基因表达及类固醇合成的调节作用。
2 材料与方法
2.1 药物与动物
TSS提取物由TSUMURA & CO.提供，含6种符合日本药典标准的生药。妊娠Wistar大鼠随机分为Vehicle组、DHT组和DHT+TSS组。DHT组孕鼠从妊娠第16天起连续4天皮下注射DHT（3 mg/只），雌性子代3周龄时分组，DHT+TSS组饲喂含3% TSS的饲料（相当于人体等效剂量6倍）。动物实验经相关伦理委员会批准。
2.2 表型与分子分析
记录8-10周龄大鼠动情周期，采集卵巢组织进行组织学分析（卵泡分类依据标准形态学标准）。通过TaqMan阵列芯片筛选卵巢基因表达谱，Western blot检测BMP4和抑制素βA（Inhibin βA）蛋白水平。分离原代颗粒细胞（GCs），评估TSS和卵泡刺激素（FSH）对基因表达及孕酮分泌的影响。
3 结果
3.1 TSS改善PCOS大鼠卵巢形态与动情周期
DHT组大鼠动情周期紊乱，卵巢中闭锁囊肿样卵泡数量显著增加，而TSS干预后闭锁卵泡减少，动情周期规律性改善。各组间血清雌二醇（E2）、孕酮（P4）、睾酮（T）、黄体生成素（LH）和FSH水平无显著差异，但DHT组LH有升高趋势。
3.2 TSS调控卵巢BMP4与抑制素βA表达
基因表达热图及火山图分析显示，DHT+TSS组卵巢中Bmp4、Bmp5和Inhba表达下调。Western blot证实BMP4和抑制素βA蛋白水平在DHT+TSS组显著降低。相关性分析表明，Bmp4表达与闭锁卵泡数量呈正相关，与排卵前卵泡数负相关。
3.3 TSS增强颗粒细胞类固醇合成
在DHT大鼠原代GCs中，TSS剂量依赖性抑制Bmp4和Inhba表达，并增强FSH诱导的类固醇合成急性调节蛋白（Star）和3β-羟基类固醇脱氢酶（Hsd3b）表达，促进孕酮分泌。TSS对正常GCs影响较小，提示其作用具有PCOS病理特异性。
4 讨论
本研究首次发现TSS可通过下调BMP4/抑制素βA通路改善PCOS大鼠卵巢病理变化。BMP4过高表达会抑制Star介导的孕酮合成，而TSS通过降低BMP4水平，解除对FSH信号的抑制，促进卵泡正常发育与类固醇生成。这一机制为TSS联合现有促排卵方案提供了理论依据，尤其适用于亚洲常见的瘦型PCOS患者。未来需进一步验证TSS对排卵率及生育功能的影响，并探索其与下丘脑-垂体-性腺轴、胰岛素抵抗等PCOS相关通路的交互作用。
5 结论
TSS能显著改善产前DHT暴露导致的PCOS样卵巢形态异常和动情周期紊乱，其作用与调控BMP4信号通路、降低抑制素βA表达、增强颗粒细胞孕酮合成能力密切相关。研究表明TSS可能成为PCOS治疗的补充策略，尤其适用于BMP4信号异常相关的病理类型。
