在巴西马术运动领域，夸特马（Quarter Horse, QH）作为注册数量第三的品种，以其在多科目运动中的卓越能力备受瞩目。然而，关于马匹健康与运动表现参数的研究却相对匮乏，特别是在分子标记层面。随着马术产业对经济贡献的日益凸显（巴西农业企业年产值达数十亿雷亚尔），如何科学评估和提升赛马运动性能成为重要课题。高强度运动会导致氧化应激、热应激等多重生理反应，进而影响代谢、免疫等功能。传统血液生物标志物虽可用于训练监控，但分子层面的调控机制尚不明确。
为深入探索运动调控的分子机制，研究人员将目光投向microRNA（miRNA）——一类约22个核苷酸的非编码RNA，它们通过降解信使RNA（mRNA）或抑制翻译过程，在基因转录后调控中扮演关键角色。这类小RNA分子已被视为筛选优良运动性能动物的潜在生物标志物。在此背景下，来自巴西亚马逊联邦大学的研究团队在《Journal of Equine Veterinary Science》发表论文，首次系统研究亚马逊地区夸特赛马在训练前后microRNA与靶基因的调控规律。
研究团队选取10匹6岁夸特马（2雄8雌），在30天统一管理条件下进行障碍赛训练。通过对比训练前（T0）与训练后（T1）的临床参数、血液学指标以及分子表达变化，发现运动后呼吸频率（从28.3次/分升至113.8次/分）、心率（从48.9次/分升至105.9次/分）和直肠温度（从37.2°C升至40.5°C）均显著升高（p<0.0001）。血液分析显示红细胞、血红蛋白、淋巴细胞等9项参数发生显著变化，表明运动诱发脾脏收缩和炎症反应，从而增强氧气运输能力。
在分子层面，研究人员聚焦于肌肉代谢关键基因ALDOA（醛缩酶A）和肌肉重塑相关基因EGFR（表皮生长因子受体），以及其调控miRNA：miR-133b（已报道的运动响应标志物）和miR-1260b（首次关联运动代谢）。通过实时荧光定量PCR（qPCR）技术分析发现，运动后ALDOA和EGFR表达分别下调0.5倍和3倍，而miR-133b和miR-1260b也呈现0.5倍下调。值得注意的是，ALDOA与EGFR表达呈强正相关（rho=0.90），提示这两个基因在运动代谢中协同作用。
关键技术方法包括：①采集训练前后外周血样本并添加RNAlater保护RNA完整性；②使用全自动血液分析仪检测14项血液参数；③通过TRIZOL法提取RNA并经 spectrophotometric analysis（分光光度分析）质检；④采用SYBR Green One-Step RT-qPCR（一步法实时荧光定量PCR）检测miRNA和靶基因表达，以let-7-5p和ACTB/GAPDH作为内参基因，通过2−ΔΔCT 法计算表达量；⑤使用Shapiro-Wilk检验数据正态性，辅以ANOVA（方差分析）或Kruskal-Wallis（克鲁斯卡尔-瓦利斯检验）进行统计学分析。
3.1 临床检查结果
通过三次重复测量发现，所有临床参数（呼吸率、心率、直肠温度）在运动后均显著升高（p<0.05），其中心率最大值达184次/分，呼吸率峰值达176次/分。这表明夸特马在爆发式运动中通过心血管系统调节体温，符合其生理适应性特征。
3.2 血液学检查结果
14项血液参数中有9项出现显著变化，包括红细胞、血红蛋白、血细胞比容等携氧指标上升，以及淋巴细胞和血小板增多。这些变化与运动诱导的脾脏收缩和炎症反应直接相关，可作为评估马匹运动负荷的可靠指标。
3.3 miRNA与靶基因差异表达
qPCR熔解曲线显示所有引物扩增效率为100%。靶基因ALDOA和EGFR在运动后显著下调，分别参与葡萄糖代谢和肌肉修复过程；miR-133b和miR-1260b的同步下调提示其可能通过抑制靶基因表达参与运动后恢复调控。特别值得注意的是，此前仅与癌症代谢相关的miR-1260b首次被发现在运动调控中发挥作用。
研究结论强调，运动诱导的生理应激激活了多重分子响应机制：ALDOA下调可能源于运动时机体优先采用有氧代谢途径，而静息时则依赖该基因参与的糖酵解过程补充能量；EGFR下调则与运动后炎症反应引发的肌肉修复相关。miR-133b作为已知的肌肉调节因子，其表达变化进一步证实了它在运动适应性中的作用；而miR-1260b的关联性提示新的代谢调控通路可能存在于运动生理中。
这项研究首次建立了亚马逊地区夸特赛马的分子生理学数据库，不仅为优化马匹训练方案提供了科学依据，更开创性地将miR-1260b纳入运动代谢调控网络。研究人员指出，这些生物标志物未来可用于早期诊断运动性代谢疾病，尤其在热带气候条件下对马匹热应激的监控具有重要意义。该成果为马术产业的精准健康管理提供了分子层面支持，同时为比较医学研究提供了大型动物运动生理学的宝贵模型。
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