引言
实体瘤因其免疫抑制性肿瘤微环境（TME）、广泛的抗原异质性以及阻碍免疫细胞有效浸润的结构屏障，使得免疫治疗难以奏效。尽管化疗和放疗等常规治疗手段在一定程度上能控制肿瘤进展，但常常伴随较高的医疗并发症、不良反应发生率和预期寿命缩短。基因工程过继性细胞疗法（ACT），如嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法，虽然在血液肿瘤治疗中取得了革命性成功，但其在实体瘤中的应用仍因毒性、抗原逃逸和T细胞耗竭等问题而受限。非基因修饰的ACT利用天然存在或体外激活的免疫细胞，提供了一种规避永久性基因修饰相关风险（如基因毒性、插入性肿瘤发生和产生自身反应性T细胞的潜在可能）的引人注目的替代方案。本综述旨在探讨如何增强非基因修饰ACT以克服实体瘤带来的独特挑战，并从机制驱动的疗效、临床可扩展性以及与多模式疗法的协同作用三个维度进行评估。
非基因修饰过继性细胞疗法发展简史
肿瘤免疫学在过去半个世纪的发展中，基于免疫细胞的研究推进已进入全面发展阶段。1968年，Miller认识到T细胞在免疫中的关键作用。1973年，树突状细胞（DC）被鉴定。NK细胞、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、γδ T细胞和自然杀伤T细胞（NKT）的发现逐步完善了肿瘤免疫学的细胞基础。20世纪80年代，Rosenberg及其同事的开创性工作实现了从基础科学到治疗应用的转变。在证实LAK细胞可介导肿瘤消退后，他们关键性地发现，在白细胞介素-2（IL-2）中扩增的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）比LAK细胞表现出显著增强的抗肿瘤活性。这一发现迅速转化为临床实践，Topalian等人于1988年证明TIL疗法可介导转移性黑色素瘤患者的肿瘤消退。20世纪90年代标志着其他细胞平台的涌现。Schmidt-Wolf等人于1991年首次描述了细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK），随后证明其比LAK细胞具有更优越的抗肿瘤活性。CIK细胞的临床转化于该十年末启动，确立了其安全性和可行性。同期发展还包括Hsu等人首次临床应用树突状细胞（DC）疫苗，以及人类γδ T细胞在小鼠模型中显示抗肿瘤作用。随着肿瘤免疫学的进步，研究表明DC与CIK细胞共培养可增强CIK细胞的细胞毒性活性。多个团队研究并证实了回输同种异体NK细胞或不变自然杀伤T细胞（iNKT）的安全性和可行性，这些细胞也显示出抗肿瘤作用。2007年，Hirohito等人开始对晚期肾细胞癌患者回输γδ T细胞，显示出良好的耐受性和抗肿瘤功效。随着免疫治疗的进展，美国食品药品监督管理局（FDA）已批准多种细胞治疗产品。2024年，FDA批准了首个TIL细胞疗法lifileucel用于黑色素瘤治疗。
非基因修饰过继性细胞疗法的进展
肿瘤浸润淋巴细胞
TIL是浸润到TME中的淋巴细胞，它们从血液迁移至TME，包括细胞毒性T细胞、辅助T细胞、调节性T细胞、γδ T细胞、NK细胞、B细胞和先天淋巴样细胞，均直接或间接参与肿瘤免疫反应。在动物模型中，细胞毒性T淋巴细胞（CTL）是通过TIL治疗过继转移介导肿瘤排斥的主要效应细胞。CTL通过释放肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和干扰素-γ（IFN-γ）等炎症细胞因子、凋亡诱导蛋白（如FAS配体（FASL）和TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL））以及细胞毒性颗粒导致穿孔素介导的裂解，诱导靶细胞死亡。研究发现，间质TIL的增加与接受新辅助化疗的三阴性乳腺癌（TNBC）和HER2阳性乳腺癌患者的更长无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）相关。TIL的数量和功能状态与患者预后相关，尤其在黑色素瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌和头颈癌中。这些发现为TIL疗法提供了理论基础。
TIL可从切除的肿瘤组织中提取并在体外培养。通常从皮下部位或淋巴结获取肿瘤组织，在含有IL-2的培养基中消化或碎片化培养。在添加抗CD3单克隆抗体、同种异体饲养细胞和IL-2以促进T细胞增殖后，提取并浓缩TIL。在回输TIL产品前，患者接受非清髓性淋巴细胞清除以改善回输环境。1986年，Rosenberg基于LAK疗法的肿瘤根除特性提出了TIL疗法。研究表明，在IL-2中扩增的TIL，当重新引入荷瘤小鼠时，表现出比LAK细胞更优的治疗效果。此外，涉及环磷酰胺、IL-2和过继性TIL的联合疗法提高了疗效。1988年，Topalian等人进行了一项使用TIL疗法联合重组IL-2治疗晚期癌症患者的初步临床研究，证实了TIL疗法的安全性和可行性。Rosenberg等人报告称，在TIL疗法之前进行包含环磷酰胺和氟达拉滨的非清髓性淋巴细胞清除（NMA-LD）化疗可能会改善治疗结果。Dudley等人进行的一项研究显示，在接受过继性T细胞免疫治疗前接受环磷酰胺和氟达拉滨淋巴细胞清除化疗7天的转移性黑色素瘤患者中，功能性抗肿瘤淋巴细胞快速增殖，表现出增强的持久性并介导了显著的肿瘤破坏。NMA-LD增加了血清细胞因子IL-7和IL-15的水平，耗竭了调节性T细胞（Treg）介导的免疫抑制，并消除了消耗这些细胞因子的竞争性免疫细胞亚群，从而增强了CD8+T细胞的效应功能。
目前TIL疗法的常规NMA-LD方案包括60–120 mg/kg环磷酰胺和75–125 mg/m2氟达拉滨。传统的TIL疗法需要从切除的肿瘤组织中分离T细胞，在IL-2中扩增，随后根据肿瘤反应性进行选择后再扩增。长时间的体外培养会导致TIL耗竭。Rosenberg等人开发了一种“年轻TIL”快速扩增前（pre-REP）方案，消除了对基于IFN-γ的肿瘤反应性选择的依赖，显著缩短了实验室时间，使其适用于更广泛的患者群体，且临床反应相似。在培养方案中同时处理多种细胞因子可以增强某些实体瘤中TIL的增殖，从而增加CD8+T细胞的百分比。
由Iovance Biotherapeutics公司开发的用于黑色素瘤的自体TIL疗法lifileucel，基于C-144-01试验的阳性结果，对153名在接受免疫检查点抑制剂（ICI）和靶向治疗后进展的晚期黑色素瘤患者进行了治疗，客观缓解率（ORR）为31.4%，其中41.7%的缓解持续时间≥18个月。FDA已批准lifileucel用于治疗在接受ICI和靶向治疗后进展的晚期黑色素瘤患者。在另一项II期多中心研究中，lifileucel用于治疗28名对先前治疗无效的难治性转移性非小细胞肺癌（mNSCLC）患者，总缓解率（ORR）为21.4%，包括对标准免疫治疗耐药的患者产生反应。治疗中出现的不良事件（TEAE）与NMA-LD、IL-2输注和晚期疾病进展相关，这些都是预期且可管理的。
TIL疗法在其他实体瘤中也显示出初步疗效，包括乳腺癌、宫颈癌、胰腺癌和结直肠癌。在TIL疗法中，临床抗肿瘤反应与输注的TIL总数呈正相关。数量越多，临床反应越显著。为了提高TIL疗法的疗效和持久性，必须选择适合扩增且具有高反应率的TIL亚群。输注TIL中CD8+T细胞的比例与临床反应显著相关；然而，CD4+T细胞也可能通过分泌Th1细胞因子诱导抗肿瘤活性、招募和增强CD8+T细胞的抗肿瘤活性或直接介导抗肿瘤作用。最佳的CD8+T细胞比例需要进一步研究。另一种方法是将TIL疗法与ICI结合，因为效应T细胞上CTLA-4和PD-1分子的上调会与抗原呈递细胞或肿瘤细胞上的B7-1/B7-2和PD-L1相互作用，导致T细胞功能障碍。使用抗CTLA-4和抗PD-1抗体可以减轻这种抑制，从而增强T细胞毒性。IOV-COM-202试验是一项开放标签、前瞻性、多中心、多队列II期研究，结果表明，在接受lifileucel联合帕博利珠单抗治疗的未接受过ICI治疗的转移性NSCLC患者中，ORR达到47.1%。在EGFR野生型且PD-L1阴性的肿瘤患者中，ORR显著更高，8例EGFR野生型PD-L1阴性患者中有4例达到缓解。此外，一项多中心III期试验正在进行中，旨在评估LN-145 TIL疗法联合或不联合帕博利珠单抗治疗不可切除或转移性黑色素瘤、晚期、复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌以及局部晚期或转移性NSCLC患者。
TIL疗法需要从患者身上获取足够的肿瘤样本，这对于多种肿瘤类型来说常常是一个挑战。患者选择对TIL疗法的疗效至关重要。Radvanyi等人发现，CD8+TIL浸润≥10%的肿瘤表现出显著更高的反应率（ORR=45%对12%，P<0.01），而TIL疗法对微小残留病灶（包括切除后的黑色素瘤）显示出增强的疗效。从肿瘤培养TIL的程序缺乏严格的科学标准，因此使质量控制复杂化。Gohen等人报告称，新抗原特异性T细胞可以从患者的外周血淋巴细胞（PBL）中提取。Li等人开发了一种方法，从患者PD-1+的PBL中收获并快速增殖新抗原特异性T细胞。该方法用于治疗经过多线治疗并产生抗PD-1治疗获得性耐药的四名患者。用该方法增殖T细胞并与抗PD-1抗体联合给药治疗，三名患者产生客观反应。基于这些结果，相关的临床试验正在进行中（ClinicalTrials.gov标识符：NCT04268108），这种方法可能作为TIL疗法的替代方案治疗更多癌症患者。此外，TIL生产周期长，对于快速进展的肿瘤患者是一个挑战。Lovance开发了一种创新的简化扩增方案（Gen-2），将扩增时间缩短至22天。这种新方案产生的TIL在体外比内源性TIL具有更强的抗肿瘤功效。此外，在培养方案中加入不同的细胞因子可能对TIL疗法的疗效产生不同影响。尽管TIL疗法已获得FDA批准用于晚期黑色素瘤，但其在上皮性癌症中的疗效仍然不一致。最近的单细胞研究表明，干细胞样TCF7+CD8+TIL在输注后表现出更优的持久性，而终末耗竭亚群与复发相关。这强调了需要新的TIL方案来保留前体表型，并分离和增加干细胞样新抗原特异性T细胞，这可能有助于开发更有效的T细胞免疫疗法。我们认为TIL扩增应整合代谢启动（补充甘露糖以增强氧化磷酸化）和空间靶向（联合局部放疗以增强归巢）。TIL疗法的一个基本挑战是对输注的T细胞库识别的特定肿瘤抗原了解不足。TIL被假定为富含肿瘤反应性，但它们代表了一个多克隆混合物，靶向来自体细胞突变的新抗原和常见的肿瘤相关抗原。高通量TCR测序和新抗原鉴定技术的进步正在开始阐明这种复杂性。将输注产品的TCR克隆性与临床反应相关联可能有助于识别真正肿瘤反应性的克隆，并为选择更有效的TIL产品提供信息。
细胞因子诱导的杀伤细胞与树突状细胞-CIK
CIK细胞疗法是一种利用患者血液来源的淋巴细胞的免疫治疗策略。这些细胞通过依次添加IFN-γ、抗CD3抗体（OKT3）和大剂量重组人IL-2（rhIL-2）在体外扩增和激活，然后回输给患者以增强抗肿瘤效果。CIK细胞是一群异质性细胞，具有T淋巴细胞和NK细胞的特征，以CD3+CD56+为标志，具有显著的抗肿瘤活性和广泛的治疗潜力。
CIK细胞通过多种机制识别和杀死肿瘤细胞。CIK细胞拥有多克隆T细胞受体（TCR），使其能够以MHC限制性方式识别肿瘤。此外，CIK细胞表达NK受体（NKG2D、NKp30和DNAM-1），促进其以MHC非限制性方式识别肿瘤。NKG2D是促进CIK细胞抗肿瘤活性的关键分子。CIK细胞可以通过颗粒酶和穿孔素介导的细胞毒性直接杀死肿瘤细胞，并分泌IFN-γ、TNF-α和IL-2等细胞因子来调节免疫反应，间接杀死肿瘤细胞。此外，CIK细胞可以通过与肿瘤细胞膜上的Fas受体结合，激活程序性细胞死亡，诱导肿瘤细胞凋亡。
CIK细胞疗法已广泛用于治疗多种实体瘤，包括肝癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌、鼻咽癌、胃癌和肾癌。CIK细胞治疗在术后或放化疗后的患者中显示出显著疗效。它可以清除残留的微小转移病灶，防止癌细胞的扩散和复发，并增强免疫力。Liu等人进行了一项多中心、开放标签、随机对照II期临床试验，评估CIK细胞疗法联合化疗对晚期鳞状非小细胞肺癌（NSCLC）的效果；在化疗基础上加用CIK治疗将PFS延长了4.7个月，OS延长了10.7个月，且加用CIK细胞治疗并未导致不良事件（AE）增加。在一项涉及85例原发性肝细胞癌（HCC）患者的研究中，CIK细胞疗法与经动脉化疗栓塞（TACE）和射频消融联合使用。结果显示，CIK治疗组的无复发生存率为68.9%，显著高于对照组（20.0%）。在一项CIK细胞疗法联合一线化疗治疗不可切除结直肠癌的临床试验中，联合治疗显著提高了OS和PFS，中位总生存期从24.1个月增加到54.7个月，中位无病生存期（DFS）从14.6个月增加到25.7个月。多项随机对照试验（RCT）证实了CIK细胞疗法的临床疗效，尤其是在HCC的辅助治疗中。根据美国国家综合癌症网络（NCCN）指南，Lee等人进行的关键III期临床试验表明，接受术后辅助自体CIK细胞疗法（≥ 5 × 109细胞/次输注，六个疗程）的HCC患者，与单纯手术对照组相比，中位无复发生存期（RFS）显著延长（44.0个月对30.0个月，P=0.01），5年总生存率（OS）提高了21%（66%对45%，P=0.008）。亚组分析显示，接受≥9次CIK输注的患者获得了显著更大的生存获益（风险比=0.59，95%置信区间[CI] 0.43–0.81），且未增加≥3级AE的风险。这项研究为HCC管理中标准化CIK方案提供了高水平证据，并且是NCCN指南中唯一包含的与CIK相关的推荐。此外，临床研究表明，PD-L1阳性患者可能对基于CIK的联合疗法表现出更好的反应。
CIK细胞通常来源于自体外周血单核细胞（PBMC）。然而，免疫反应性差的癌症患者通常无法获得足够的抗肿瘤淋巴细胞，老年患者可能难以承受反复抽血。脐带血和同种异体来源提供了“现货”潜力。临床前研究表明，同种异体CIK细胞表现出细胞毒性活性而不诱导移植物抗宿主病（GvHD），并显示出增强的抗肿瘤功效。临床研究表明，在接受CB-CIK细胞治疗的15名患者中，1名HCC患者和1名食管癌患者达到完全缓解（CR），2名卵巢癌患者达到部分缓解（PR），10名患者保持疾病稳定（SD），1名HCC患者出现疾病进展（PD）。观察到的安全性和可行性表明CB-CIK可能是一种有前景的治疗选择。另一项研究表明，CB-CIK联合二线化疗显著改善了在一线化疗后进展的晚期实体瘤患者的PFS和中位生存期。目前关于同种异体CIK细胞的研究有限，其可扩展性受到方案变异性的阻碍。需要进一步研究来探讨同种异体CIK细胞的疗效和安全性。
DC-CIK疗法是一种结合DC和CIK的免疫治疗方法。该疗法利用DC的抗原呈递能力和CIK的细胞毒性协同靶向肿瘤细胞，从而增强机体的抗肿瘤免疫反应。DC-CIK细胞识别肿瘤细胞表面的抗原并刺激T细胞反应，而CIK细胞直接杀死肿瘤细胞。DC与CIK细胞共培养增强了CIK细胞的抗肿瘤功效，使其更具杀伤力。DC与CIK细胞之间的相互作用改变了两种细胞类型的表面分子表达，导致IL-12分泌增加和细胞毒性活性增强。DC-CIK疗法已用于多种实体瘤的治疗，包括NSCLC、结直肠癌、肝癌和胰腺癌。研究表明，DC-CIK疗法可以增强化疗效果，增强患者的免疫反应，并降低肿瘤复发风险。一项包含12项RCT、涉及826例实体癌患者的荟萃分析表明，与单纯化疗相比，DC-CIK治疗联合化疗显著改善了OS、DFS和ORR。另一项比较10项CIK单药治疗试验和16项DC-CIK联合治疗试验的荟萃分析显示，与CIK单药治疗组相比，DC-CIK组并未达到统计学上更高的客观缓解率（ORR）（42.5%对38.1%，P=0.12）。这种看似违反直觉的结果——理论上改进的DC-CIK未能显示出显著的治疗益处——可归因于三个主要因素：DC-CIK制备中非标准化的抗原加载方案：在特定试验中，DC未能充分加载肿瘤特异性抗原，削弱了其抗原呈递功效。患者群体异质性：CIK单药试验主要招募术后有微小残留病灶的患者（在HCC辅助治疗中将中位无复发生存期显著延长至44.0个月对30.0个月），而DC-CIK试验包括了更晚期阶段的患者。晚期疾病中严重的免疫抑制性TME可能抑制了免疫细胞的激活。DC-CIK生产过程中细胞扩增效率的可变性：DC-CIK产品中CD3+CD56+细胞（必要的效应元件）的百分比显示出显著的研究间波动（范围：15–40%）。这种生产可变性可能直接影响疗效、可重复性和跨试验可比性。DC疫苗是一种新兴的免疫疗法，加载到DC上的肿瘤介入抗原包括肽、重组蛋白以及整个肿瘤细胞或其裂解物。DC-CIK方案的多样性，包括所使用的特定肿瘤抗原，需要额外的临床试验来验证DC-CIK和CIK细胞疗法在实体瘤治疗中的疗效。DC通过增强IL-12分泌来增强CIK细胞的免疫反应。DC-CIK疗法的益处在于其非MHC限制性，允许跨不同患者群体广泛适用。此外，CIK细胞的体外倍增和激活相对容易且成本效益高，使其成为一种成本效益高的治疗选择。DC-CIK疗法可与其他治疗方法联合使用，包括化疗、放疗和靶向治疗，以提高治疗效果。在一项临床III期试验中，开发了一种新的PD-1阻断激活的DC-CIK细胞PD1-T，并将PD1-T细胞加入一线XELOX联合贝伐珠单抗方案中。研究表明，在先前未治疗的转移性结直肠癌患者中，PD1-T细胞治疗方案联合显著改善了PFS和OS，且耐受性良好。
尽管CIK细胞疗法在若干临床研究中显示出治疗潜力，但它也有一些局限性。一项研究表明，体外扩增的CIK细胞群体中CD4+T细胞、调节性T细胞（Treg）和CD3+CD56+T细胞比例的改变显著影响CIK细胞的抗肿瘤活性。CD4+T细胞的Th1/Th17细胞亚群通过抑制CIK抑制受体的表达对CIK治疗有显著贡献。它通过IL-17A增强CIK细胞的抗肿瘤功效，并通过IFN-γ/CXCL9-11/CXCR3通路促进CIK细胞的迁移和运动；然而，CIK细胞扩增的效果可能因患者而异。目前，大多数临床试验对CIK细胞的量化不足，并且由于培养方案的差异，不同研究间的CIK细胞存在显著异质性。需要进一步研究以确定负责CIK细胞浸润肿瘤并介导细胞毒性的主要效应细胞亚群。与TIL相比，CIK细胞的抗原特异性仍然不太明确。它们多克隆的TCR库和通过NKG2D的激活提供了广泛的、MHC非限制性的肿瘤识别。然而，这使识别负责其细胞毒性的特定肿瘤配体变得复杂。未来利用配体筛选平台和单细胞分析的研究可能会阐明CIK细胞识别的主要抗原，从而有助于开发更具靶向性和有效性的CIK产品。
自然杀伤细胞
NK细胞是先天淋巴细胞，通过直接的细胞介导的细胞毒性和分泌细胞因子及趋化因子来识别和杀死病毒感染的细胞和肿瘤细胞，从而与常规αβT细胞，特别是CD8细胞毒性T淋巴细胞（CTL）共享效应功能。NK细胞来源于CD34+常见淋巴祖细胞，半衰期约为7-10天，并通过与DC的相互作用参与免疫调节。NK细胞的活性受其细胞表面表达的多种激活和抑制受体的调节，使其能够快速分泌多种细胞因子和趋化因子，招募额外的免疫细胞，并增强T细胞和B细胞的适应性免疫反应。
NK细胞约占人类外周血淋巴细胞的10–15%，通常通过CD16+CD56+CD3-表型来识别。它们的主要特征是合成I型细胞因子，包括IFN-γ和TNF。大多数健康细胞表达I类主要组织相容性复合体-I（MHC-I），这刺激强烈的抑制信号以抑制NK细胞活性。肿瘤细胞通常通过减少MHC-I表达来逃避CD8阳性细胞毒性T细胞的识别，而MHC-I配体的缺失和/或激活受体配体的表达将改变NK细胞内信号通路的平衡，导致NK细胞激活并攻击靶细胞。NK细胞参与癌症免疫监视，与T细胞相比，NK细胞是先天免疫系统的一部分，可以更快速地反应并杀死异常细胞。其次，NK细胞不依赖MHC分子来识别靶细胞，可以识别和杀死更广泛的肿瘤细胞。NK细胞通过几种机制杀死肿瘤细胞。首先，NK细胞可以通过分泌穿孔素和颗粒酶直接杀死肿瘤细胞。此外，NK细胞可以通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）杀死肿瘤细胞。NK细胞产生的细胞因子可以调节免疫反应并增强其他免疫细胞的活性。在NK细胞治疗中，自体NK细胞可能因与其自身MHC I分子相互作用的抑制效应而无法有效应对血液或实体癌症，而同种异体NK细胞通过杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）配体错配实现持续浸润。Miller等人用Hi-Cy/Flu诱导疗法治疗患者并输注扩增的同种异体NK细胞。过继转移的NK细胞在体内显示扩增且不诱导GvHD，细胞因子释放综合征（CRS）发生率低。
研究表明，NK细胞的分子水平和亚型与胃肠道间质瘤、结直肠癌和乳腺癌患者的预后相关。基于NK细胞的特性，利用NK细胞进行过继性细胞治疗以治疗实体瘤具有巨大潜力。
Hong等人用阿法替尼联合或不联合自体NK细胞疗法治疗了48名伴有或不伴有表皮生长因子受体（EGFR）突变的晚期肺腺癌患者。结果表明，在EGFR突变阳性肿瘤患者中，靶向药物阿法替尼联合自体NK细胞疗法显著提高了缓解率。Parkhurst等人用非清髓性化疗后进行自体NK细胞过继转移治疗了8名不适合TIL治疗的转移性黑色素瘤或肾细胞癌患者。尽管未观察到客观的临床反应，但输注的NK细胞持续存在了1周至数月。在一项I期临床试验中，Sakamoto等人将诱导T细胞刺激、外周血单核细胞（PBMC）扩增的自体NK细胞给予不可切除的局部晚期或转移性胃肠道肿瘤患者。自体NK细胞疗法显示出良好的安全性，外周血细胞毒性大约增加了两倍。尽管有这些安全优势，自体NK细胞疗法在实体瘤治疗中面临重大挑战。TME诱导NK细胞耗竭，损害其细胞毒性。此外，自体MHC-I分子通过KIR受体传递抑制信号，损害NK细胞介导的肿瘤识别。晚期癌症患者外周血中NK细胞的频率和增殖能力也降低。同种异体NK细胞疗法通过KIR配体错配提供了一种克服这些障碍的策略。该治疗原理最初在血液恶性肿瘤中确立。例如，在急性髓系白血病中，KIR错配的同种异体NK输注达到了47%的完全缓解（CR）率，而自体NK治疗观察到的CR率为5%。这些发现为应用同种异体NK策略对抗实体瘤中抑制性自体MHC-I环境提供了强有力的理论依据。目前，同种异体NK细胞主要用于避免NK细胞的变化。除外周血外，NK细胞还可来源于脐带血、NK-92细胞和诱导多能干细胞。在一项Liang等人的研究中，36名复发性乳腺癌患者接受了自体或同种异体NK细胞治疗。两组的不良反应相似；然而，接受同种异体NK治疗的患者表现出T细胞和NK细胞总数增加，与接受自体NK细胞治疗的患者相比，肿瘤直径和计算机断层扫描（CT）衰减值减少更显著。
过继性NK细胞治疗必须克服三大障碍：临床反应持久性有限、TME内细胞因子/趋化因子介导的抑制以及长期免疫记忆不足。最近研究表明，IL-15信号通过XBP1s-PIM-2正反馈环路维持NK细胞功能，该环路调节生存和效应活性。为了应对这些限制，工程化NK细胞偶联物通过同时结合肿瘤特异性表面抗原和共激活NK受体（CD16和NKG2D），显示出增强的抗肿瘤功效，从而刺激针对实体瘤的有效细胞毒性反应。基因编辑和分子工程方法可能进一步减轻这些障碍，修饰NK细胞表达CAR可以显著增强其肿瘤靶向能力。
此外，iNKT细胞是一类独特的T淋巴细胞亚群，以表达半不变T细胞受体（TCR）为特征，在人类中由Vα24-Jα18链组成。这些细胞识别由CD1d分子呈递的特定脂质抗原，并表达激活性和抑制性NK受体，从而连接先天免疫和适应性免疫。此外，iN
