木质素纳米颗粒作为抗菌剂对水处理过程中生物膜组成的影响

时间:2026年2月9日
来源:Water Research

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木质素纳米颗粒(NPs)通过协同作用抑制生物膜,低浓度(1 mg C/L)即可减少细菌和真菌98%以上,并降低胞外聚合物(EPS)含量。其机理包括亲水基团与EPS形成氢键直接抑制微生物,以及氧化后疏水基团增强抑菌效果。研究为绿色生物杀灭剂开发提供新思路。

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Jiesi Zhang | Yufei Li | Nigel Graham | Minmin Liu | Wenzheng Yu
东北林业大学林业学院,哈尔滨市和平路26号,150040,中华人民共和国

摘要

开发绿色、高效的杀菌剂对于有效控制水处理过程中的微生物生物膜至关重要。在本研究中,通过“绿色”工艺合成了平均粒径约为30纳米的木质素纳米颗粒(NPs),并将其用作杀菌剂。采用重力驱动的超滤膜系统来研究其对生物膜组成的影响。结果表明,当木质素NPs的用量仅为1 mg C/L时,膜生物膜中的细菌和真菌数量减少了98%以上,细胞外聚合物物质(EPS)中的总蛋白质和多糖含量也显著下降,显示出显著的优势。其核心抗菌机制涉及两种协同效应:(1)木质素NPs上的亲水羧基与微生物细胞壁的EPS成分之间形成氢键,直接抑制微生物的生存和繁殖,同时减少EPS的分泌;(2)木质素NPs被氧化为芳香衍生物,苯环转化为富含羟基的酚类结构,同时细胞外蛋白质中的羰基(C=O)含量增加,从而增强疏水性。氧化后的木质素NPs通过与这些改性芳香化合物和蛋白质的疏水结合来增强抗菌效果。这项工作为绿色杀菌剂的合理设计及生物膜调控提供了新的方法和见解。

引言

传统的废水消毒方法会产生有毒副产物和残留的微生物代谢物,对水质安全构成重大威胁。典型的有害物质包括致癌的亚硝胺(Li等人,2021年;Ma等人,2012年)以及由代谢物衍生的毒素,如生物胺和内毒素(Ceyhan和Celik,2011年;Roje等人,2024年)。此外,饮用水被致病细菌污染仍然是全球公共卫生问题。Moraxellaceae家族的病原体可导致儿童急性中耳炎和成人慢性阻塞性肺疾病,并具有高度的抗生素抗性(Wang等人,2024年)。Legionella pneumophila是军团病的致病菌,对免疫系统较弱的人群具有特别高的死亡风险(Chen等人,2025年)。然而,现有的病原体去除和消毒技术在处理水中存在显著局限性。基于氯的消毒方法虽然有效,但会产生一系列卤化副产物,其中一些可能具有毒性。高级氧化工艺(如臭氧氧化和紫外线(UV)照射)虽然能提高消毒效率,但需要较高的能量投入并导致较高的运营成本(Lai等人,2024年)。膜过滤技术受到通量和成本的限制(Hashmi等人,2025年;Yin等人,2022年),而生物处理过程则常常面临膜污染(MBR工艺)和操作复杂性等问题(Murshid等人,2023年)。因此,迫切需要开发高效、安全且经济可行的新型消毒技术,以有效控制饮用水中的微生物及其代谢物。
在最近关于水消毒的研究中,已经研究了改性或未改性的纳米颗粒的抗菌性能。例如,单宁酸–Fe³⁺复合磁性石墨烯支持的AgNPs在20 mg/L的用量下几乎实现了100%的大肠杆菌灭活(Khan等人,2022年),而ZnO NPs在50–150 mg/L的用量下对霍乱弧菌肺炎克雷伯菌的去除效率达到75%–88%(Mukherjee等人,2025年)。然而,在富含有机碳(DOC)和胶体颗粒的河口环境中,AgNPs倾向于聚集并被DOC包裹或吸附,这显著降低了它们与微生物的接触反应性。即使将用量增加到1.8 mg/L,消毒效率仍仅为10%–15%(Yi和Cheng,2017年)。相比之下,木质素由于其独特的分子结构和官能团而表现出天然的强抗菌活性(Su等人,2024年)。具体而言,酚羟基和羧基对木质素的杀菌活性至关重要(Li等人,2023年),因为它们可以酸化环境、破坏膜电位、穿透细胞膜、抑制代谢酶并产生活性氧物种,从而损害DNA并抑制微生物生长(Erguden,2021年)。木质素NPs的纳米级特性提供了额外的优势。由于其小的颗粒尺寸和大的比表面积,木质素NPs能够暴露更多的反应性官能团,并可以通过“特洛伊木马”机制穿透生物膜的多孔EPS基质,甚至进入微生物细胞,通过内吞作用被微生物吸收后释放到细胞内,导致ATP耗尽和细胞死亡(Morena和Tzanov,2022年)。值得注意的是,较小的颗粒通常表现出更高的杀菌活性(Yang等人,2018年)。
除了抗菌性能外,木质素还具有生物降解性、环境友好性,并且比传统化学消毒剂更安全(Peng等人,2025年)。其内在的抗氧化和成膜能力进一步增强了抗菌效果,并具有抗炎作用。最近的研究证实了其对革兰氏阴性细菌(如大肠杆菌)和革兰氏阳性细菌(如金黄色葡萄球菌)的强抑制作用(Huet等人,2024年)。此外,木质素还表现出广谱抗病毒活性,通过稳定病毒结构或破坏病毒包膜和复制有效抑制无包膜肠道病毒(如脊髓灰质炎病毒)和有包膜病毒(如SARS-CoV-2)(Okabe等人,2024年)。综上所述,木质素及其纳米结构衍生物是“下一代”绿色抗菌和抗病毒材料的有希望的候选者,具有在消毒产品、智能敷料和抗菌涂层中的潜在应用。
然而,现有关于木质素基抗菌材料的研究存在明显局限性,阻碍了其在实际水处理中的应用。大多数研究集中在实验室控制溶液中的抗菌活性,对其在实际膜系统中对复杂生物膜的调控作用缺乏系统研究。水生生物膜由多种微生物群落和EPS组成,形成了一层保护屏障,降低了抗菌效果,木质素纳米结构与生物膜成分之间的相互作用机制仍不清楚。此外,尽管报道了木质素纳米颗粒(NPs)的抗菌活性,但其在复杂微生物群落中的剂量-效应关系和结构变化尚未得到充分阐明,限制了对其实际潜力的准确评估。
这些研究空白突显了本研究的必要性。在本研究中,木质素NPs被用作抗菌剂,用于调节重力驱动的超滤系统膜表面形成的生物膜,模拟实际的水处理过程。这项工作有三个关键创新:(1)针对膜生物膜控制,以衔接实验室规模的抗菌研究和实际工程应用;(2)通过比较实验系统研究木质素NPs对微生物群落组成和EPS性质的影响,而不仅仅是关注抗菌活性;(3)整合微观、微生物群落和代谢组学分析,全面阐明核心机制(即木质素NPs与生物膜成分的相互作用以及木质素和蛋白质衍生物的结构变化)。因此,本研究评估了木质素NPs在水生环境中控制病原微生物和有毒副产物的有效性,从而提供了一种改善饮用水安全的新技术策略。

章节片段

水源预处理和木质素NPs制备

从中国海淀奥林匹克公园收集的再生湖水(总有机碳含量约为15 mg/L)通过500 μm纱布(Fulongkai,中国)过滤,以去除大的悬浮固体(如植物残渣)而不保留目标微生物,然后储存在4°C下,作为进水使用。木质素NPs的制备方法见支持信息(文本S1)。实验中使用的木质素NPs浓度为1 mg C/L。

实验材料和设备

实验装置见补充信息

木质素NPs的表征

对木质素NPs的形态和结构特征进行了表征。图1a显示了木质素NPs的SEM图像,呈现出均匀的球形形态,平均直径为30 ± 0.5 nm。图1b显示了木质素NPs的荧光光谱,主要峰出现在区域V(Ex 275–300 nm,Em 380–480 nm)和区域III(Ex 220–250 nm,Em 380–480 nm)(Aparicio等人,2025年),分别对应于类腐殖酸和类富里酸物质(图

结论

本研究的结果突显了木质素NPs作为可持续且高效的杀菌剂在水处理应用中的巨大潜力。与可能产生有毒副产物(如三卤甲烷和亚硝胺)的传统化学消毒剂不同,木质素NPs来源于可再生生物质资源,是一种环境友好的替代品。木质素NPs在超低浓度(1 mg C/L)下表现出强烈的抗菌活性,有效

作者贡献声明

Jiesi Zhang:正式分析、数据管理、概念化。Yufei Li:正式分析、数据管理。Nigel Graham:审稿与编辑。Minmin Liu:数据管理、概念化。Wenzheng Yu:写作 – 审稿与编辑、研究、资金获取。 数据可用性:数据可根据请求提供。

附录A. 补充数据

补充信息包含3个文本部分和9个图表,内容如下:木质素的制备方法(文本S1);FT-ICR MS分析的详细信息(文本S2);CLSM染色方法(文本S3);实验装置示意图(图S1);地表水的荧光光谱和表观分子量分布(图S2);第0天和第90天木质素纳米颗粒(NPs)的Zeta电位和粒径(图S3);生物膜形态

CRediT作者贡献声明

Jiesi Zhang:写作 – 原稿撰写、研究、数据管理。Yufei Li:监督、研究。Nigel Graham:写作 – 审稿与编辑、方法学。Minmin Liu:写作 – 审稿与编辑、监督。Wenzheng Yu:写作 – 审稿与编辑、监督、研究。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文工作的竞争性财务利益或个人关系。

致谢

本工作得到了国家自然科学基金(资助编号:52200027)和中国科学院国际合作伙伴计划(资助编号:032GJHZ2023063)的支持。

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