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摘要富含高质量蛋白质的海洋微藻在生物活性肽的开发中备受青睐。然而，由于缺乏有效的制备方法，其在健康改善方面的应用仍受到限制。本研究旨在通过UPLC-Q-Exactive MS鉴定结合计算机模拟技术，从微藻Porphyridium cruentum (P. cruentum)中寻找
富含高质量蛋白质的海洋微藻在生物活性肽的开发中备受青睐。然而，由于缺乏有效的制备方法，其在健康改善方面的应用仍受到限制。本研究旨在通过UPLC-Q-Exactive MS鉴定结合计算机模拟技术，从微藻Porphyridium cruentum (P. cruentum)中寻找有效的天然抗氧化肽，以保护皮肤细胞免受慢性氧化应激的损害。在425种肽中，鉴定出一种名为Threonyltyrosine (TY)的抗氧化二肽。在ABTS自由基清除实验中，TY的抗氧化能力略高于维生素C，其IC50值为(11.37 ± 1.32) ×103 µg/L。研究发现，TY对由百草枯引起的人类角质形成细胞（HaCaT）的细胞毒性具有显著的保护作用：细胞存活率提高（+10.1%，P < 0.001），MDA水平降低（-23.6%，P < 0.0001），以及相关酶活性增强，包括超氧化物歧化酶（SOD，+17.1%，P < 0.001）和过氧化氢酶（CAT，+20.5%，P < 0.001）。此外，TY在30–100 µg/mL的剂量范围内能够上调受百草枯损伤的HaCaT细胞的增殖活性。通过分子对接和分子动力学模拟分析，发现TY能够稳定结合Keap1的Kelch结构域（ΔG = -5.13 kcal/mol），这为TY可能激活Nrf2信号通路提供了线索。总体而言，TY展现了自由基清除和抗氧化酶激活的双重作用机制。这些发现加深了我们对TY的认知，为其进一步的研究和应用奠定了基础。
富含高质量蛋白质的海洋微藻在生物活性肽的开发中备受青睐。然而，由于缺乏有效的制备方法，其在健康改善方面的应用仍受到限制。本研究旨在通过UPLC-Q-Exactive MS鉴定结合计算机模拟技术，从微藻Porphyridium cruentum (P. cruentum)中寻找有效的天然抗氧化肽，以保护皮肤细胞免受慢性氧化应激的损害。在425种肽中，鉴定出一种名为Threonyltyrosine (TY)的抗氧化二肽。在ABTS自由基清除实验中，TY的抗氧化能力略高于维生素C，其IC50值为(11.37 ± 1.32) ×103 µg/L。研究发现，TY对由百草枯引起的人类角质形成细胞（HaCaT）的细胞毒性具有显著的保护作用：细胞存活率提高（+10.1%，P < 0.001），MDA水平降低（-23.6%，P < 0.0001），以及相关酶活性增强，包括超氧化物歧化酶（SOD，+17.1%，P < 0.001）和过氧化氢酶（CAT，+20.5%，P < 0.001）。此外，TY在30–100 µg/mL的剂量范围内能够上调受百草枯损伤的HaCaT细胞的增殖活性。通过分子对接和分子动力学模拟分析，发现TY能够稳定结合Keap1的Kelch结构域（ΔG = -5.13 kcal/mol），这为TY可能激活Nrf2信号通路提供了线索。总体而言，TY展现了自由基清除和抗氧化酶激活的双重作用机制。这些发现加深了我们对TY的认知，为其进一步的研究和应用奠定了基础。
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