1. 引言
随着气候变化、人口老龄化及消费趋势转变,西瓜(Citrullus lanatus )的品种与栽培模式日趋多样化。现代育种聚焦高甜度、功能化及紧凑型品种,并通过无分枝、短节间类型提升劳动效率。传统土壤栽培(匍匐式)已延续约4000年,易导致劳作者肌肉骨骼疾病,而垂直栽培通过牵引茎蔓竖直生长,显著降低了劳动强度。进一步发展的垂直-水培模式致力于解决土壤连作障碍,并已成为温室自动化、省力化与规模化的核心技术。西瓜栽培研究已扩展至番茄、草莓、甜椒等作物,但在温室条件下针对西瓜的水培与补光管理研究仍较为有限。
实现温室周年生产需精准控制环境因子,尤其是光——它既是光合作用的关键能量来源,也是植物发育的核心信号因子。在众多环境因子中,光作为主要能源与信号转导因子,对提高作物产量与品质至关重要。西瓜作为高光饱和点(PPFD 1520 μmol·m−2 ·s−1 )作物,对光条件尤为敏感。光照不足(冬季)或过量(夏季)均会导致坐果率与果实品质下降,凸显了光管理对稳定生产的重要性。冬季低日照条件下,即使通过温室加温维持最低生长温度,坐果仍不理想;蒸腾作用减弱导致非商品果率升高,果实内部甚至可能冻伤,难以产出优质果实。因此,针对作物特性,光相关研究对实现周年生产不可或缺。
尽管已有研究关注可见光下的采后品质,但关于红蓝发光二极管(LED)用于优质嫁接苗生产的研究仍显不足。需进一步探讨红、蓝及远红(FR)LED辐照、红蓝白LED下嫁接苗的叶绿素与光系统II(PSII)活性,以及基于LED辐照嫁接苗户外栽培的果实品质维持。上述研究均在采后或营养生长期实施短期(少于10天)LED辐照,以生产优质嫁接苗。然而,关于温室LED辐照下西瓜生殖生长(果实发育)的研究仍较为缺乏。
在可见光范围内,红光(R)与蓝光(B)波长分别主要被叶绿素a与b吸收,并被植物有效用于光合作用。红光通过促进光合器官发育与淀粉积累有效促进作物生长,并参与种子萌发、花芽分化及色素表达。蓝光诱导叶肉组织分化与叶绿素形成以增加叶片厚度,并参与向光性、气孔开闭及胁迫防御机制。多项研究报道,混合红蓝LED光(RB)在促进生长方面优于单色红光LED。白光(W)是包含红、蓝、绿(G)光的光源,成本低于单色LED。白光中包含的绿光具有高透射性,可穿透叶肉组织以提高整叶光合效率,并有助于提高作物鲜重与品质。远红光(FR)(≥700 nm)虽不能直接作为光合作用的能源,但参与植物生长与形态建成反应。近期研究表明,它可调节植物花期、增强生物量,并调控酚类化合物合成的生物合成途径。多数光质研究集中于叶菜类,针对西瓜等果菜的数据有限。
因此,本研究旨在评估冬季补光条件下,红、蓝、白及远红LED对西瓜生长与果实品质的影响,以支持稳定、优质、周年温室西瓜生产技术的发展。
2. 材料与方法
2.1. 植物材料与生长条件
研究于2022年2月至11月在西瓜研究所农业研究推广服务中心(37° N, 127° E)进行,旨在实现西瓜温室周年生产。共开展三茬栽培:春茬(第1茬)生长期86天[2月21日(定植)→3月24日(开花)→5月18日(采收)];夏茬(第2茬)生长期55天[6月9日(定植)→6月30日(开花)→8月3日(采收)];秋茬(第3茬)生长期73天[8月29日(定植)→9月26日(开花)→11月10日(采收)]。
在单斜面玻璃温室(32 × 9 × 4 m,长×宽×高)中,安装了四套由西瓜研究所开发并专利注册(No. 10-2359307)的垂直水培装置[拱形垂直支架(高2 m,宽0.4 m)以1.5 m间隔安装,水培床置于垂直支架下部,内部1 m高处用管道水平连接制作果架,外部安装茎蔓诱引网]。温室中心两条线用于研究,每条线水培床上放置24个珍珠岩种植袋(100 × 20 × 12 cm;Kyungdong-One Co., Ltd., Seoul, Republic of Korea),并配有排水板。供试西瓜品种为‘Royal-Black’(Jinandosinongbu Co., Ltd., Jinan, Republic of Korea;黑皮黄瓤),嫁接于葫芦砧木(Lagenaria siceraria )品种‘Sibjangsaeng’(Syngenta Co., Basel, Switzerland)。嫁接苗以25 cm间距定植,每袋4株(珍珠岩种植袋,100 × 20 × 12 cm;Kyungdong-One Co., Ltd.)。总计定植192株。定植5天后,对第一侧蔓留5片正常叶摘心;摘心7天后,选取两条第二侧蔓垂直牵引至诱引网上。当第3雌花(5n ± 2节位,n = 花数)开花时利用熊蜂授粉,当果实长至鸡蛋大小时,每株仅留1果,疏除多余果实。
温室环境控制系统(MAGMAPLUS-1000, Green Control System Co., Ltd., Damyang, Republic of Korea)用于调控温室环境,栽培环境数据每分钟记录一次。根据各生长阶段温度(30–38 °C)调节通风窗开闭,并根据温度与太阳辐射组合控制垂直与水平保温幕开闭。温室内最低温度设为15°C(关闭),最高室内温度18°C(开启)。温室外部温度≥20°C时开启,外部太阳辐射≥100 W·m−2 时开启,≥2000 W·m−2 时关闭。遮阳幕与保温幕的温室内外设定温度相同,幕布开启的太阳辐射设定值也一致。但关闭设定条件调整为温室内达到西瓜光饱和点的40%以上(室内太阳辐射525 W·m−2 ,外部太阳辐射≥800 W·m−2 )。当温室内夜间温度低于15°C时启动加热器。
水培营养液采用先前开发的专用配方。营养液与灌溉控制系统采用营养液机(NMC-PRO PERTIKIT3G; Netafim, Negev, Israel)。各生长阶段营养液浓度(EC)调整为1.0(幼龄期)→2.0(成龄期)→1.5(衰老期)dS·m−1 ,供应pH设为6.0。从日出后2小时至日落前2小时,利用基质含水量传感器(NetaSence, Netafim)监测生长阶段并进行反馈式灌溉控制。基质含水量控制在13–30%。排水率设定为80–40%(幼龄期)→30%(成龄期)→10%或以下(衰老期),利用基于重量-水分的根区水分测量装置(RM Farm, IReis Co., Ltd., Gangneung, Republic of Korea)进行反馈控制供液量,排水EC与pH每分钟记录一次。
2.2. 温室光环境与补光LED处理
为探究适宜改善西瓜果实品质的日累积光积分(DLI),通过安装在温室地面2米高的气象站收集全年光环境信息(PPFD:943(第1茬)、937(第2茬)、757(第3茬)μmol·m−2 ·s−1 ;DLI:32(第1茬)、24(第2茬)、21(第3茬)mol·m−2 ·d−1 )。在定植30天后,对三茬中日照条件最低的秋茬西瓜[第3茬,8月29日(定植)→9月26日(开花)→11月10日(采收)]进行光处理。选择此起始时间点(定植后30天),是因为在秋季条件下,此时恰好与生殖生长开始期一致,即完成营养生长训练(摘心与垂直牵引)后,通常第3雌花(坐果节位;5n ± 2节位,n = 花数)出现(约定植后28–32天)。在此阶段开始补光,可针对坐果与早期果实发育的关键窗口期,此时光合产物需求迅速增加,而秋季栽培的自然太阳辐射开始下降。
跟随作为坐果花的第3雌花花期,施加四种LED处理——红+蓝(RB)、白(W)、红+蓝+远红(RB + FR)及白+远红(W + FR)——持续43天,以评估光质影响。在专用于西瓜的垂直水培装置的拱形管道两侧,以60°角安装三层约20 cm管道(第1层:地面约80 cm高;第2层:第1层上方50 cm;第3层:第2层上方50 cm)。附着不锈钢板(5 × 300 cm,长×宽)后,安装60根LED灯条(60 × 3 × 3.7 cm,长×宽×高;D&W Co., Ltd., Seoul, Republic of Korea),通过在两套水培装置线上重复单侧每层10根条形LED,实现单一光质处理。为防止各光质混合,处理光质间保持1.5–3 m或以上距离。
在低日照条件的秋茬(第3茬),为补偿相比第1茬不足的DLI 11 mol·m−2 ·d−1 ,基于DLI图表实施15小时(上午6:00–下午9:00)LED辐照,PPFD为200 μmol·m−2 ·s−1 。15小时光照窗口(06:00–21:00)旨在提供约11 mol m−2 d−1 的补充DLI(PPFD 200 μmol m−2 s−1 × 15 h × 3600/106 ≈ 10.8 mol m−2 d−1 )。在专用于西瓜的垂直水培装置拱形管道顶部上方30 cm处安装室内太阳辐射传感器。在15小时昼间曝光时间内,当温室内日照达到西瓜光饱和点(322 W·m−2 )或更高时,LED自动调节关闭以节省能源(晴天约上午11:00–下午3:00,LED关闭)。温室内的自然日光作为对照,与四种LED处理比较。
各LED光源的光谱与强度使用光谱仪(LI-180, Li-Cor, Lincoln, NE, USA)在西瓜叶片上、中、下位置(距光源15 cm)测量。光谱测量范围380–780 nm,以分数形式表达,并标记峰值。光量通过每种处理36个点的平均值调整为PPFD 200 ± 3 μmol·m−2 ·s−1 。为匹配可见光处理区(RB和W)与含不可见远红光处理区(RB + FR和W + FR)之间的光量,调整为PFD 200 ± 3 μmol·m−2 ·s−1 。
2.3. 植物生长特性
西瓜生长特性调查三次:定植后3周(光处理前)、6周(光处理后12天)及9周(光处理后33天)。通过测量摘心后两条生长均匀的第二侧蔓,调查八项参数:株高、节位数、叶片数、叶长、叶宽、叶柄长、节间长及茎粗。节位数测量生长点以下叶长>5 cm的叶片节位,叶片数测量生长点以下叶长>3 cm的叶片数。叶长、叶宽、叶柄长等叶片相关特性调查西瓜坐果(第3雌花)所着生叶片,节间长与茎粗调查坐果(第3雌花)紧邻的下方节位。
2.4. 光合速率、气孔导度与胞间CO2 浓度
在定植后8周(光质处理后24天),选择一个外部日累积太阳辐射较低(1269 J·cm−2 )的阴天,于昼间和夜间测定光合速率、气孔导度与胞间CO2 浓度。利用光合分析仪(LI-6800, Li-Cor)研究西瓜坐果(第3雌花)所着生叶片的光化学反应。使用开放型透明叶室(1 × 3 cm)测量各光源下的光合速率。昼间光合速率在灯开启后3小时(上午9:30至12:30)测量。夜间光合速率在日落后、LED灯关闭前3小时(下午6:30至9:30)测量。测量条件设定为类似玻璃温室西瓜生长条件(流速700 μmol·s−1 ,H2 O 70%,CO2 400 μmol·mol−1 ,气温25 °C,入射光强500 ± 15 μmol·m−2 ·s−1 )。
2.5. 叶绿素荧光
定植后10周(光质处理后34天),使用手持叶绿素荧光仪(FluorPen FP 110, Photon System Instruments Ltd., Drasov, Czech Republic)测量西瓜叶片(着生于第3雌花)的OJIP荧光响应。各光源处理下,每日从上午10:00至日落后下午7:00,每隔3小时测量四次。测量前,用可拆卸叶夹夹住西瓜第3雌花所着生叶片,暗适应30分钟稳定后测量,测量数据采用JIP测试法分析。
2.6. 叶绿素与类胡萝卜素含量
定植后10周(光质处理后34天),使用便携式叶绿素计(SPAD-502, Minolta Co., Ltd., Osaka, Japan)测量西瓜第3雌花所着生叶片的叶绿素含量。在定植后11周(光质处理后41天)的西瓜果实采收日,取样整枝叶片(去除叶柄与茎)分析总叶绿素与类胡萝卜素含量。枝条叶片在冷冻干燥机(LP10, 1ShinBioBase Co., Ltd., Dongducheon, Republic of Korea)中于-40°C、55 mmHg真空下冻干7天。干燥后,加液氮,用研钵研磨粉碎叶片,储存于-20°C freezer直至分析。总叶绿素与类胡萝卜素含量测定参考相关方法并稍作修改。叶样(30 mg)在3 mL 80%丙酮中超声20分钟,离心(FC5515R, Ohaus Co., Ltd., Newark, NJ, USA)5分钟(13,000 RCF,4°C),上清液用80%丙酮稀释4倍。使用分光光度计(Cary UV-Vis, Agilent Co., Santa Clara, CA, USA)测量上清液在663、645和470 nm的吸光度。总叶绿素与类胡萝卜素浓度(μg g−1 DW)通过公式计算:
叶绿素a = 12.72 × A663 − 2.59 × A645
叶绿素b = 22.88 × A645 − 4.67 × A663
总叶绿素 (a + b) = 20.3 × A645 + 7.22 × A663
类胡萝卜素 = (1000 × A470 − 3.27 × 叶绿素a − 104 × 叶绿素b)/229
2.7. 果实特性
通过对雌花进行光处理后,在定植后11周(光质处理后43天)采收西瓜果实,调查果实特性。调查包括八项:单果重、果周、果长、果宽、果皮厚、甜度、硬度(果肉与果皮)。甜度通过数字糖度计(PAL-1; ATAGO Co., Ltd., Tokyo, Japan)挤压果肉测量。硬度测定:将西瓜纵切为果梗与果蒂两部分,果肉中心横切面切成5 × 5 × 5 cm(宽×长×高 cm)大小;果皮切成5 × 5 × 果皮厚 cm(宽×长×高 cm),使用硬度计(TA-XT2, Stable Micro Systems Co., Ltd., Godalming, UK)以2 mm·s−1 速率从中心穿透5 mm深度探头测量。
2.8. 总酚含量与抗氧化能力
在定植后11周(光质处理后43天)西瓜果实采收日,取样西瓜整株(地上部与根区)分析总酚与抗氧化含量。西瓜植株分为五部分:叶片、茎、根、果肉、果皮,在冷冻干燥机(LP10, 1 ShinBioBase Co., Ltd., Dongducheon, Republic of Korea)中于-40°C或以下、55 mmHg真空下冻干7天。干燥后,加液氮,用研钵研磨粉碎,储存于-20°C freezer直至分析前。总酚含量与抗氧化水平分别采用Folin–Ciocalteu比色法与2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)法测定。粉碎的叶、茎样品(40 mg)加入4 mL 80%(v/v)丙酮于5 mL离心管中,超声提取15分钟。各提取液(1.5 mL)转移至2 mL离心管,分别于4°C和-20°C黑暗条件下储存超过12小时,用于测量总酚含量与抗氧化水平。离心(FC5515R, Ohaus Co., Ltd.)2分钟(3000 RCF),上清液用于分析。总酚含量与抗氧化能力吸光度分别用分光光度计在765 nm和730 nm测量。总酚浓度单位表示为每克干重果皮与果肉的没食子酸当量(GAE)(mg),抗氧化能力表示为每克干重果皮与果肉的6-羟基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸(Trolox)当量(TEAC)(mM)。
2.9. 统计分析
试验采用完全随机设计,每种光源处理分配24株植株。生长特性分析中,每种处理评估10株。生理参数(净光合速率、气孔导度、胞间CO2 浓度)每种处理测量3株。叶绿素荧光每种处理记录6株,SPAD值对这6株各进行四次重复测量。生化分析中,总叶绿素与类胡萝卜素浓度每种处理测量5株,各重复三次。生殖性状方面,单果重记录所有采收果实,而另外七项果实品质参数每种处理分析5株,可溶性固形物含量(甜度)重复测量三次。总酚含量与抗氧化能力每种处理分析5株,特别区分为叶片、茎、根、果皮、果肉五部分。统计分析采用SAS统计程序(Statistical Analysis System, 9.2 Version, SAS Institute, Cary, NC, USA)进行单因素方差分析,并通过Duncan多重比较检验确认处理组平均值的统计显著性。图表采用SigmaPlot(version 14.5, Systat Software Inc., San Jose, CA, USA)制作。
3 . 结 果
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