J.C. Caro|C. Bucchi|N. Ponce|J. Villena|A. Palacios-Muñoz|I.E. García
瓦尔帕莱索大学医学院医学科学硕士项目
摘要
引言
成牙本质细胞的分化是一个细胞过程，需要由牙本质-牙髓微环境提供的信号分子和细胞外基质成分。已经提出了几种支架来诱导成牙本质细胞的分化，以促进牙髓再生。本研究评估了胶原海绵和去细胞牙髓（以及牙本质）促进来自根尖乳头（SCAPs）的干细胞表达成牙本质细胞标记物的能力。
方法
实验组包括两种不同的生物基质：1）在有无牙本质盘的情况下，用SCAP细胞接种的人类去细胞牙髓（n = 3）；2）在有无牙本质盘的情况下，用SCAP细胞接种的商业胶原海绵（n = 3），以及各自的对照组（未接种细胞的基质）。培养物被放置在牙本质盘模型上，并在三维细胞培养环境中维持四周。之后，样本被用于组织学分析。通过苏木精-伊红染色和免疫组化方法，使用抗牙本质唾液酸磷酸蛋白（DSPP）、抗牙本质基质蛋白1（DMP1）和抗碱性磷酸酶（ALPL）抗体来检测细胞中成牙本质细胞标记物的表达。进行了定性和探索性定量分析。
结果
在去细胞人类牙髓基质和胶原海绵中培养的SCAPs表达了DSPP、DMP1和ALPL标记物。根据定性分析和探索性数值数据，牙本质盘的存在似乎增强了去细胞基质和胶原海绵组中DMP-1的表达，同时降低了去细胞基质组中的ALPL水平。
结论
在本研究的限制范围内，去细胞牙髓支架和胶原支架均支持SCAPs中成牙本质细胞标记物的表达。考虑到其成本效益和广泛的可用性，商业胶原可能被认为是适用于再生应用的合适支架。然而，需要进一步的研究来确认这些发现。
部分摘录
引言
牙髓位于牙齿最内层的组织中，含有成牙本质细胞、血管、神经和结缔组织，这些都是牙齿活力和功能所必需的（1）。由创伤或龋齿引起的慢性炎症会导致不可逆的牙髓损伤、坏死和根尖病变的发展。传统上，患有牙髓坏死的牙齿通过常规根管治疗进行治疗，这可以使牙齿存活，但使其永久失去活力（2）。在过去
材料与方法
本实验室研究的手稿遵循2021年《牙髓病学实验室研究优先报告项目》（PRILE）指南编写（见补充图1）。该研究获得了经过认证的生物伦理委员会的批准。来自根尖乳头的干细胞（SCAPs）的初次培养是从三名患者随机提取的第三磨牙中获得的，而牙本质盘和人类牙髓的细胞外基质（ECM-HDP）则来自
根尖乳头组织和SCAP细胞具有未分化间充质细胞的蛋白质表达特征
我们使用从第三磨牙中提取的根尖乳头作为干细胞来源。首先通过苏木精-伊红染色对根尖乳头和牙髓进行了表征，并通过免疫组化方法分析了根尖乳头的蛋白质表达谱。包含根尖乳头和牙髓的牙齿根部的代表性图像见补充图3 A。ALPL（补充图3 B）、DMP-1（补充图3 C）和DSSP（补充图3 D）的免疫标记结果均为阴性
讨论
本研究评估了两种生物基质（去细胞人类牙髓和胶原）以及牙本质诱导SCAPs中成牙本质细胞标记物表达的能力，假设不同生物基质在诱导SCAPs中成牙本质细胞标记物表达的能力上存在差异。去细胞人类牙髓被选作一种创新的替代生物支架，其细胞环境类似于天然环境，此前已在其他研究中进行了测试
结论
在本研究的限制范围内，去细胞牙髓支架和胶原支架均诱导了SCAPs中成牙本质细胞标记物的表达。考虑到其成本效益和广泛的可用性，商业胶原可能被认为是适用于再生应用的合适支架。然而，需要进一步的研究来确认这些发现。
附图
材料与方法
本实验室研究的手稿遵循2021年《牙髓病学实验室研究优先报告项目》（PRILE）指南编写（见补充图1）。该研究获得了经过认证的生物伦理委员会的批准。根尖乳头的干细胞初次培养是从三名患者随机提取的第三磨牙中获得的，而牙本质盘和人类牙髓的细胞外基质（ECM-HDP）则来自
根尖乳头组织和SCAP细胞具有未分化间充质细胞的蛋白质表达特征
我们使用从第三磨牙中提取的根尖乳头作为干细胞来源。首先通过苏木精-伊红染色对根尖乳头和牙髓进行了表征，并通过免疫组化方法分析了根尖乳头的蛋白质表达谱。包含根尖乳头和牙髓的牙齿根部的代表性图像见补充图3 A。ALPL（补充图3 B）、DMP-1（补充图3 C）和DSSP（补充图3 D）的免疫标记结果均为阴性
讨论
本研究评估了两种生物基质（去细胞人类牙髓和胶原）以及牙本质诱导SCAPs中成牙本质细胞标记物表达的能力，假设不同生物基质在诱导SCAPs中成牙本质细胞标记物表达的能力上存在差异。去细胞人类牙髓被选作一种创新的替代生物支架，其细胞环境类似于天然环境，此前已在其他研究中进行了测试
结论
在本研究的限制范围内，去细胞牙髓支架和胶原支架均诱导了SCAPs中成牙本质细胞标记物的表达。考虑到其成本效益和广泛的可用性，商业胶原可能被认为是适用于再生应用的合适支架。然而，需要进一步的研究来确认这些发现。
附图1. 牙髓病学实验室研究优先报告项目（PRILE）流程图。
附图
致谢
本工作得到了CIDI#5-UV和Proyecto ICN2025_026（瓦尔帕莱索跨学科神经科学中心）的支持；以及La Frontera大学（智利）的ANID- FONDEQUIP EQM 200228项目的支持。
