多种转移因子对禽网状内皮组织增生病毒的抑制作用：蛋白质组学分析

REV感染鸡脾脏转移因子抑制病毒机制研究。比较REV感染鸡、ND疫苗免疫鸡和SPF鸡脾脏提取的TFs对REV复制的抑制作用，发现感染源TFs通过激活NOD样受体信号通路及形成STAT1-OASL-PARP9-IRF7蛋白相互作用网络显著抑制病毒，疫苗免疫组TFs效果有限，SPF组TFs无效，为高效TF制备提供机制依据。

王新莉|宋梦宇|吴青月|任志豪|崔文平|常双|王一鑫|赵鹏

中国山东省泰安市山东农业大学兽医学院，271018

摘要

为了研究不同来源的转移因子（TFs）对鸡禽网状内皮组织病毒（REV）感染的抑制效果及其潜在的免疫机制差异，本研究首先比较了感染REV的鸡、接种新城疫（ND）疫苗的鸡以及无特定病原体（SPF）鸡的脾脏蛋白质表达谱。随后从这些组的脾脏中提取TFs，并监测了这些TFs施用于鸡后脾脏蛋白质组学的变化。此外，还测定了CD4⁺/CD8⁺ T细胞亚群以及IFN-γ和IL-2等细胞因子的水平，并进行了REV挑战实验。结果表明，来自感染REV的脾脏的TFs富集了STAT1和OASL等与免疫相关的蛋白质，通过激活NOD样受体信号通路并建立有效的STAT1-OASL-PARP9-IRF7蛋白-蛋白相互作用网络，显著增强了细胞免疫反应，从而有效抑制了REV的复制。而来自接种疫苗的脾脏的TFs仅增强了体液免疫作用，但对REV的抑制效果有限；来自SPF脾脏的TFs则没有明显的免疫调节活性。值得注意的是，来自感染REV的脾脏提取的TFs具有更强的抗REV效果。本研究为高效TF制剂的选择及其分子机制分析提供了关键证据。

引言

禽网状内皮组织病毒（REV）是一种常见的免疫抑制病毒，可通过水平传播和垂直传播感染鸡，导致生长迟缓、免疫器官萎缩和继发感染。感染REV的鸡通常表现出多种病理表现，包括淋巴组织增生、淋巴瘤以及对其他病原体的易感性增加，这会严重影响家禽生产和健康管理策略。目前尚无商业疫苗可用于预防和控制REV（Zhai等人，2016；Fadly和García，2006；Payne和Venugopal，2000）。因此，继续研究潜在的疫苗开发和治疗干预措施是保障禽类健康的关键。

转移因子（TF）是一种由免疫活性T淋巴细胞释放的生物活性小分子物质，主要由肽和核苷酸组成。它将供体的细胞免疫记忆信息传递给受体细胞，帮助其识别和清除特定病原体，具有免疫记忆持久且无副作用等优点（Bravo Blas等人，2010；Guo等人，1986；Lawrence，1955；Levine等人，2011；Wang等人，1995）。此外，TF在多种疾病中的治疗潜力也得到了研究，因为它可能有助于恢复免疫系统平衡，同时增强对病原体的防御能力，而不会引发过度炎症反应。

我们之前的研究表明TFs能有效抑制REV感染（Wang等人，2025），但其具体机制尚不清楚。本研究通过蛋白质组学分析和多种免疫指标的评估，比较了三种来源（感染REV的鸡脾脏、空白对照鸡脾脏以及接种新城疫疫苗的鸡脾脏）的差异，并分析了施用于鸡后从中提取的TFs的效果，旨在阐明TFs发挥作用的免疫机制。

病毒与SPF鸡

REV LN1201株（GenBank登录号：KU641115.1）于2012年从中国疑似患有禽肿瘤疾病的肉鸡中分离得到，病毒滴度为10^4.9 50%组织培养感染剂量（TCID₅₀）/100μL。ND La Sota疫苗购自青岛一邦有限公司。一天大的无特定病原体（SPF）鸡购自山东斯帕法斯禽业有限公司，并饲养在山东农业大学动物设施的负压隔离环境中。

不同刺激下SPF鸡脾脏中差异表达蛋白质的蛋白质组学分析

如图1所示，感染REV的鸡脾脏、接种ND疫苗的鸡脾脏和空白对照SPF鸡脾脏之间存在显著差异，共有10,000种蛋白质符合无标记定量实验的严格质量控制标准（蛋白质FDR=0.008，肽FDR=0.005）。感染REV的鸡脾脏中三种关键抗病毒蛋白（STAT1、OASL和PARP9）的表达水平显著高于接种疫苗的鸡脾脏和空白对照组。

讨论

REV是一种免疫抑制性逆转录病毒，可引发持续的复杂免疫紊乱。目前尚无有效的疫苗或药物可以治疗或缓解REV引起的免疫抑制。TF是一类低分子量的肽-核苷酸复合物，主要参与免疫信息传递和细胞免疫调节（Viza等人，2013）。TF能够将供体淋巴细胞的精确免疫信息传递给

资助

本研究得到了中国山东省重点研发计划（项目编号2022TZXD0019）的资助。

CRediT作者贡献声明

常双：方法学研究。任志豪：方法学研究。崔文平：方法学研究。宋梦宇：方法学研究。吴青月：方法学研究、正式数据分析。王新莉：撰写初稿、方法学研究、正式数据分析、数据管理、概念构思。王一鑫：撰写、审稿与编辑。赵鹏：撰写、审稿与编辑、资源协调、项目管理、资金争取、数据管理、概念构思。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。