非洲猪瘟（African swine fever, ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）引起的高度致死性、烈性传染病，对全球养猪业造成了难以估量的经济损失，被世界动物卫生组织列为法定报告动物疫病。然而，即便在生物安全水平极高的现代化猪场，ASF的暴发也时有发生，这不禁让人疑惑：病毒究竟是如何“突破”重重防线，精准入侵的？传统的认识聚焦于软蜱（Ornithodoros属）在野猪与疣猪间建立的森林循环传播模式，但近年来，一些季节性暴发和高生物安全农场的“破防”案例，促使科学家们将目光投向了其他可能扮演“特洛伊木马”角色的节肢动物。在印度米佐拉姆邦，一种常见的体外寄生虫——猪血虱（Haematopinus suis, H. suis），进入了研究人员的视野。这种长期寄生在猪体表的吸血虱子，是否会是ASFV传播链条中一个被长期忽略的关键环节？为了揭开这个谜团，一项聚焦于自然暴发病例的研究就此展开，相关成果发表在国际期刊《Transboundary and Emerging Diseases》上。
为了探究猪血虱在ASF传播中的潜在作用，研究人员采用了多种关键技术方法。研究对象来源于印度米佐拉姆邦一家猪场中自然暴发急性、重症ASF死亡的两头怀孕母猪。形态学鉴定：对从死亡母猪体表收集的虱子进行形态学观察，鉴定为猪血虱（H. suis）。样本采集与孵化：不仅采集了成年虱，还收集了粘附在猪毛上的成熟虱卵，在实验室条件下成功孵化出若虫。分子检测：对死亡母猪的组织（肺、肝、脾、肾、淋巴结、心脏）以及采集到的成年虱和孵化若虫，提取总DNA，采用聚合酶链式反应和实时荧光定量PCR，靶向ASFV的p72基因进行病毒检测和绝对定量，以评估病毒载量。测序与系统发育分析：对来自母猪组织、成年虱和若虫的p72基因片段进行测序，并通过构建系统发育树分析其基因型，以确认病毒来源的一致性。
研究结果部分通过详实的数据，逐步揭示了猪血虱与ASFV之间的关联。
3.1 病例与病理学发现：两头怀孕母猪出现高热、呼吸困难和严重抑郁，并在出现临床症状后48小时内死亡。尸检发现典型的ASF病变，包括皮肤出血点、脾脏肿大梗死、肺水肿出血、肝脏严重充血肿大等。值得注意的是，在两头死亡母猪的皮肤上，特别是腹部、大腿内侧和耳内，观察到严重的虱子侵染。虱子被鉴定为猪血虱（H. suis），其卵（虱卵）也广泛附着在猪毛上。
3.2 ASFV在猪血虱及其若虫中的检测：分子检测结果显示，不仅死亡母猪的多种组织样本（脾、肾、淋巴结、肺、肝、心）ASFV检测呈阳性，从这些母猪身上收集的成年猪血虱以及从虱卵成功孵化出的新生若虫，其DNA中也均检出了ASFV。实时荧光定量PCR的扩增曲线和病毒载量数据为此提供了直接证据。
3.3 病毒载量与基因型分析：对单个成年虱的病毒载量定量分析显示，病毒拷贝数在1000至24,100 copies/μL总DNA之间，表明虱体内存在可观的病毒量。对p72基因片段的测序结果表明，来自母猪组织、成年虱和若虫的ASFV序列具有100%的核苷酸同一性。系统发育分析进一步证实，所有这些序列都与当前在亚洲和欧洲流行的ASFV基因II型参考毒株聚为一簇。
基于以上发现，研究在讨论与结论部分进行了深入阐述。本研究的核心发现是首次在自然暴发ASF死亡的猪体表寄生虫——猪血虱及其孵化若虫中检测到ASFV。这一结果具有多重重要意义。首先，它提供了猪血虱可作为ASFV潜在生物媒介的直接分子证据。猪血虱是一种严格寄生于猪的永久性寄生虫，其所有生命周期阶段（三个若虫期和成虫期）均依赖吸血为生，频繁的叮咬行为为病毒传播创造了条件。其次，在从未接触过感染猪血液的孵化若虫中检出病毒，虽然不能直接证明病毒在虱体内复制或经卵（transovarial）传播，但强烈提示病毒可能通过某种方式（如污染卵壳表面）从感染的母虱传递至下一代，这增加了病毒在虱种群和猪群中持续存在的可能性。研究者回顾了1960年的一项实验研究，该研究已证实感染ASFV的猪血虱能够将病毒传播给健康猪并导致其死亡。结合本研究的自然病例发现，猪血虱在ASF流行病学中的作用不容忽视。
研究特别指出了猪血虱可能促成一种新的森林传播循环的潜力。传统的ASFV森林循环涉及软蜱和野生猪科动物（如疣猪）。而猪血虱-家猪体系可能形成一种类似的、但完全在家养环境或“人控森林”（即养殖场及其周边）中运行的循环。在生物安全措施无法完全杜绝虱子存在的传统或后院式养猪场，尤其是在气候凉爽潮湿、适合虱子生存的地区（如本研究所在的印度东北部），这种循环可能成为病毒持续存在和季节性暴发的重要原因。猪血虱活动能力虽弱，但在猪只密集接触（如交配、哺乳、争食）时，极易在个体间迁移，从而促进病毒在猪群内的传播。
综上所述，本研究通过对自然病例的深入调查，揭示了猪血虱作为ASFV潜在生物媒介和病毒储存库的角色。这一发现拓宽了我们对ASFV复杂传播途径的理解，特别是为解释高生物安全猪场的神秘暴发和某些地区的季节性流行提供了新的视角。它强调了在ASF综合防控策略中，体外寄生虫（如虱子）的管理应成为一个不可忽视的环节。未来的研究需要进一步通过动物实验，阐明猪血虱传播ASFV的效能、病毒在其体内的存活与复制动态、以及是否存在真正的经卵传播，从而更精确地评估其在ASF流行病学中的实际权重，并为制定更有效的阻断措施提供科学依据。
