狂犬病，一种由狂犬病病毒（RABV）引发的人畜共患疾病，如同隐藏在暗处的 “杀手”，一旦发病，致死率几乎高达 100%。它主要破坏人类和动物的中枢神经系统，给全球公共卫生带来了巨大威胁。目前，市面上的狂犬病疫苗主要包括灭活狂犬病病毒疫苗（IRV）、减毒活疫苗和病毒载体疫苗等。IRV 虽广泛应用，但存在诸多问题，比如需要多次注射，这不仅增加了接种者的负担，还导致依从性较低，成本也相对较高。而且，其生产过程中残留的宿主细胞 DNA 也引发了人们对安全性的担忧。减毒活疫苗虽能单剂提供持久保护，却有回复致病性和潜在生物组分相互作用的风险。因此，开发一种安全、高效且成本效益高的狂犬病疫苗迫在眉睫。
吉林大学的研究人员为了解决这些问题，开展了一项关于优化狂犬病 mRNA 疫苗效能的研究。他们的研究成果发表在《npj Vaccines》上，为狂犬病的预防带来了新的希望。
在这项研究中，研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：首先是 mRNA 合成与体外表达技术，通过构建一系列编码不同 RABV-G 结构域的 mRNA 来进行后续实验；其次是动物实验，利用 BALB/c 小鼠模型评估疫苗的免疫原性和保护效率；还有转录组分析技术，用于探究疫苗对小鼠免疫微环境的影响 。
下面来看具体的研究结果：
- RABV-G mRNA 疫苗的制备与表征：研究人员成功合成了编码 RABV-G 全长（RABV-Full）、胞外区 - 跨膜区（RABV-TE）、胞外区（RABV-E）和 RABV-R333Q 的 mRNA，并将其封装到脂质纳米颗粒（LNPs）中。这些 mRNA 疫苗在长度、蛋白表达量、LNP 粒径、多分散指数（PDI）和封装效率等方面均符合实验要求。
- 疫苗诱导的免疫反应：通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和快速荧光灶抑制试验（RFFIT）检测发现，RABV-Full 和 RABV-R333Q 诱导的结合抗体和中和抗体水平较高，RABV-TE 诱导的水平较低，RABV-E 几乎不能诱导中和抗体。在细胞免疫反应方面，RABV-Full 和 RABV-R333Q 诱导产生的干扰素 -γ（IFN-γ）分泌型脾细胞数量最多，细胞免疫反应较强。
- 疫苗的保护效率：对小鼠进行脑内病毒攻击实验后发现，RABV-R333Q 和 RABV-Full 能为小鼠提供最佳保护，使小鼠存活率达到 100%；RABV-TE 的保护效果次之；RABV-E 则几乎不能提供有效保护。
- 异源初免 - 加强免疫的免疫评估：研究人员探究了 RABV-Full 和 IRV 的异源初免 - 加强免疫策略，发现 IRV > RABV-Full 或混合制剂能引发更高的短期抗体水平，而 mRNA 初免方案（2×RABV-Full 和 RABV-Full>IRV）在加强免疫后中和抗体水平更高。在保护效率上，IRV > RABV-Full 比 RABV-Full>IRV 更高。
- 狂犬病 mRNA 疫苗和 IRV 的转录组分析：转录组分析显示，狂犬病 mRNA 疫苗能比 IRV 更强烈地激活免疫相关信号通路。mRNA 疫苗不仅激活了 MHCII 相关基因，还刺激了 MHCI 通路，增强了细胞免疫；而 IRV 主要通过经典 MHCII 途径增强体液免疫。
综合研究结果与讨论部分，这项研究意义重大。研究证明了编码全长 RABV-G 的 mRNA 疫苗，无论是否带有 R333Q 突变，都能诱导强大的体液免疫和细胞免疫反应，为抵御致死性狂犬病病毒攻击提供完全保护。同时发现 RABV-G 的胞质结构域（CD）虽不是产生中和抗体所必需的，但对增强 mRNA 疫苗的免疫原性和保护效力起着关键作用。此外，异源初免 - 加强免疫策略为优化狂犬病疫苗接种方案提供了新方向，尤其是 “IRV 初免和 RABV-Full 加强” 的策略展现出巨大潜力。这些发现为设计更有效的狂犬病 mRNA 疫苗提供了重要依据，有助于推动狂犬病预防领域的发展，有望为全球狂犬病防控带来新的突破 。
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