在人口老龄化加剧的当下，眼部疾病逐渐成为影响人们生活质量的重要因素。年龄相关性黄斑变性（AMD）作为一种常见的致盲性眼病，正困扰着众多老年人。其中，干性 AMD 由于缺乏有效的治疗手段，更是让患者和医生们头疼不已。目前，针对湿性 AMD 的抗血管内皮生长因子（VEGF）治疗虽有一定效果，但对干性 AMD 却束手无策。而随着再生医学的发展，细胞替代疗法为干性 AMD 的治疗带来了新的曙光。在此背景下，来自印度的研究团队开展了一项极具意义的研究，他们致力于探索诱导多能干细胞（iPSC）衍生的视网膜色素上皮（RPE）细胞悬液治疗干性 AMD 的可行性，相关研究成果发表在《npj Regenerative Medicine》上。
为了深入探究 iPSC-RPE 细胞悬液治疗干性 AMD 的潜力，研究人员开展了一系列研究。他们主要采用了细胞培养与分化、多种检测技术、动物实验等关键技术方法。在细胞培养与分化方面，利用人 iPSC 系 TC-1133 进行 RPE 细胞分化培养；检测技术上，运用流式细胞术、免疫细胞化学、定量实时聚合酶链反应（qPCR）等对细胞进行全面分析；动物实验则选用新西兰白兔、SD 大鼠、RCS 大鼠、RNU 大鼠以及食蟹猴等，评估细胞悬液的安全性和有效性。
研究结果如下：
- 改良分化方案制备临床级 RPE 细胞：通过对分化方案的改良，在良好生产规范（GMP）方案中去除了玫瑰花结选择步骤，增加了两个富集步骤，成功制备出高纯度、成熟的临床级 RPE 细胞（Eyecyte-RPE）。经检测，其关键 RPE 特异性标记物表达水平高，功能活性强，且在 12 个月内稳定性良好。
- 转录组分析揭示独特分子特征：通过 RNA 测序和分析，发现 GMP 方案制备的 RPE 细胞具有独特的分子特征，与研究级和非临床研究规范（GLP）方案制备的细胞差异显著。其与眼发育和视网膜功能相关的基因上调，与细胞周期等相关的基因下调。
- 体外安全性评估：对增殖细胞和非 RPE 细胞的评估显示，Eyecyte-RPE 中增殖细胞和未分化干细胞的比例极低，且几乎不存在其他谱系的细胞，大大降低了肿瘤形成的风险，保障了体外安全性。
- GLP 毒理学研究：GLP 毒理学研究表明，在新西兰白兔和 SD 大鼠实验中，未观察到严重的不良事件，仅在部分眼睛注射部位出现局部炎症变化，未发现全身或眼部毒性。
- 体内安全性和非致瘤性：在 RNU 大鼠模型中，Eyecyte-RPE 细胞移植 9 个月后未形成肿瘤，细胞存活良好，且生物分布研究排除了脱靶效应，证明了其体内安全性。
- 体内疗效研究：在 RCS 大鼠模型中，Eyecyte-RPE 细胞移植后能够整合到宿主视网膜，提供神经保护，改善视力。不同剂量的细胞均表现出一定的治疗效果，其中 150K 剂量组效果最佳。
- 非人灵长类动物研究：在食蟹猴实验中，优化了细胞注射技术，减少了手术差异。移植的 Eyecyte-RPE 细胞在猴眼中耐受性良好，未出现肿瘤形成和免疫排斥反应，但部分眼睛出现了视网膜前膜（ERM）这一并发症。
研究结论和讨论部分指出，该研究成功开发了一种高效的临床级 RPE 制造工艺，Eyecyte-RPE 细胞悬液在临床前研究中展现出良好的安全性和有效性，为干性 AMD 的治疗提供了新的选择。尽管在细胞递送和潜在并发症方面仍面临挑战，但该研究为干细胞治疗黄斑变性领域奠定了坚实基础，推动了相关研究的进一步发展，有望为广大干性 AMD 患者带来恢复视力的新希望。
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