环状RNA circ0515通过调控SDHB重编程线粒体琥珀酸代谢促进肺腺癌进展的机制研究

本研究揭示了circ0515在非小细胞肺癌(NSCLC)中的关键作用：通过海绵吸附miR-328-3p上调YWHAZ激活PI3K/AKT通路，同时招募RBM45稳定SDHB mRNA，双重机制促进肿瘤增殖和顺铂耐药。重庆医科大学团队运用RNA pull-down、PAR-CLIP、代谢组学等技术，首次阐明circ0515通过重塑线粒体氧化磷酸化(OXPHOS)和琥珀酸代谢驱动肺腺癌进展，为NSCLC治疗提供新靶点。

肺癌是全球死亡率最高的恶性肿瘤之一，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占比达85%。尽管诊疗技术不断进步，晚期患者5年生存率仍低于20%，主要归因于肿瘤转移和化疗耐药。近年来，环状RNA(circRNA)因其稳定性和组织特异性成为癌症研究热点，但其在肺癌代谢重编程中的作用机制尚不明确。

重庆医科大学附属第一医院团队在《Cell Death and Disease》发表的研究，首次揭示circ0515通过双重机制驱动肺腺癌进展。研究人员发现，circ0515在肺癌组织中显著高表达，通过"分子海绵"作用吸附miR-328-3p，解除其对YWHAZ的抑制，激活PI3K/AKT信号通路促进肿瘤增殖；同时circ0515招募RNA结合蛋白RBM45稳定SDHB mRNA，增强线粒体复合体II活性，重塑琥珀酸代谢并诱导顺铂耐药。这项研究为NSCLC的靶向治疗提供了新思路。

关键技术方法包括：1) 临床样本分析：收集25对肺癌/癌旁组织验证circ0515表达；2) 分子互作检测：RNA pull-down和RIP验证circ0515与miR-328-3p/RBM45的相互作用；3) 代谢分析：Seahorse能量代谢仪检测氧耗率(OCR)，UHPLC-HRMS进行非靶向代谢组学；4) 体内验证：裸鼠移植瘤模型评估circ0515 ASO(反义寡核苷酸)与顺铂联用效果。

circ0515在肺癌组织中显著上调
通过高通量测序(GSE158695)筛选出109个差异表达circRNA，其中circ0515在NSCLC中上调最显著。qPCR证实circ0515在25对临床样本和多种肺癌细胞系(A549/H1975等)中高表达，且与患者不良预后相关。RNA核质分离和FISH显示circ0515主要定位于胞质，RNase R消化实验证实其环状结构稳定性。

circ0515促进肿瘤生长
功能实验显示，circ0515过表达增强A549细胞增殖、迁移和EMT(上皮-间质转化)过程，shRNA敲除则抑制这些表型。裸鼠实验证实circ0515敲除可减小肿瘤体积和重量。机制上，circ0515作为miR-328-3p的海绵，解除其对YWHAZ的抑制，激活PI3K/AKT/mTOR通路，ELISA检测显示circ0515过表达增加PIP₃产生。

circ0515/RBM45调控线粒体代谢
质谱分析鉴定出RBM45是circ0515结合蛋白，PAR-CLIP测序发现RBM45靶向SDHB等线粒体相关基因。circ0515通过RRM1结构域增强RBM45对SDHB mRNA的稳定作用，敲除后导致线粒体复合体II-IV活性降低，琥珀酸积累而ATP减少。代谢组学显示circ0515显著影响三羧酸循环代谢物。

靶向circ0515逆转顺铂耐药
circ0515敲除增加 cisplatin 诱导的凋亡(BAX上调/BCL-2下调)。设计的ASO在体内外均能抑制肿瘤生长，与顺铂联用可协同抑制裸鼠移植瘤，免疫组化显示联合治疗组Ki67降低而CC3升高。

该研究首次阐明circ0515通过"miRNA海绵"和"蛋白支架"双重功能促进肺癌进展：一方面通过miR-328-3p/YWHAZ/AKT轴驱动增殖，另一方面通过RBM45/SDHB轴重编程线粒体代谢。这不仅揭示了circRNA在肿瘤代谢中的新机制，更为重要的是，证实靶向circ0515可同时抑制肿瘤生长并克服化疗耐药，为NSCLC的联合治疗提供了理论依据。未来需进一步探索circ0515上游调控机制及其在不同癌种中的普适性。