抑制盐诱导激酶通过促进巨噬细胞胞葬作用缓解自身免疫性关节炎

本研究发现盐诱导激酶（SIKs）尤其是SIK3在类风湿关节炎（RA）中抑制巨噬细胞胞葬作用（efferocytosis），使用泛SIK抑制剂YKL-05-099可显著改善胶原诱导关节炎（CIA）小鼠的关节破坏和炎症，并揭示其通过p300-PPARγ通路促进胞葬作用和M2极化，同时诱导Treg分化，为RA治疗提供新靶点。

类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis, RA）是一种慢性自身免疫性疾病，以关节滑膜炎症和骨破坏为主要特征，目前尚缺乏能同时控制炎症和诱导免疫耐受的理想疗法。胞葬作用（efferocytosis）即巨噬细胞对凋亡细胞和碎片的清除过程，被认为是炎症消退和组织修复的关键环节，但其在RA中的调控机制仍不明确。盐诱导激酶（Salt-inducible kinases, SIKs）作为细胞内信号传导和转录调控的重要分子，此前未被深入研究其在RA免疫应答中的作用。

为解决上述问题，研究人员通过分析公共数据库和实验验证，首次揭示了SIKs（尤其是SIK3）在RA病理中对巨噬细胞胞葬功能的抑制作用，并探讨了靶向SIKs的治疗潜力。相关研究成果发表于《Signal Transduction and Targeted Therapy》。

本研究主要运用了以下关键技术方法：利用公共单细胞RNA测序（scRNA-seq）数据集（GSE13071、GSE180638、E-MTAB-8322）进行生物信息学分析；建立胶原诱导关节炎（CIA）小鼠模型并进行药理学干预；采用免疫组化、免疫荧光和μCT扫描评价关节病理变化；通过体外巨噬细胞—凋亡细胞共培养系统评估胞葬效率；运用Ingenuity Pathway Analysis（IPA）进行通路富集分析；通过荧光素酶报告基因实验检测PPARγ转录活性；利用基因敲降技术验证p300在信号通路中的作用；采用流式细胞术分析T细胞亚群分化。

Gene expression pattern of SIKs and efferocytosis-related transcripts in synovial tissue during collagen-induced arthritis (CIA) progression

通过分析CIA小鼠滑膜组织转录组数据，发现SIK1/3表达随疾病严重程度上升，而胞葬功能标志物Sgk1和CD36下降，凋亡细胞标志物AnnexinV增加。使用泛SIK抑制剂YKL-05-099干预后，关节破坏和炎症显著减轻，巨噬细胞与凋亡细胞接触增多，表明SIK抑制可能通过促进胞葬作用改善RA。

Expression of SIKs in non-efferocytic and efferocytic BMDMs

scRNA-seq分析显示，胞葬性巨噬细胞中SIK3表达显著低于非胞葬性巨噬细胞。体外实验中，YKL-05-099显著提升巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬能力。IPA分析提示SIK抑制可能通过激活PKA、cAMP和14-3-3信号通路促进胞葬作用，并刺激M2极化和PPARγ信号。

Relative average expression of SIKs, MERTK, and TIMD4, and the frequency of expressing cells according to disease status

在RA患者滑膜组织巨噬细胞中，SIK3表达与胞葬受体MERTK、TIMD4呈负相关。健康人中MERTK^HighSIK3^Low表型占主导，而RA患者中MERTK^LowSIK3^High表型增多且与抗原呈递和T_H17免疫应答相关。治疗后缓解的患者中SIK3^High群体减少。

SIK3 expression in BMDMs challenged with each cytokine or LPS

细胞因子刺激可上调SIK3表达，而凋亡细胞共培养则降低其水平。YKL-05-099处理不仅提高胞葬效率，还上调巨噬细胞PD-L1/2表达，促进CD4⁺ T细胞中PTEN活化和T_reg分化，该效应可被PD-L1/2抗体阻断。

本研究首次阐明SIKs（特别是SIK3）在抑制巨噬细胞胞葬作用和延缓RA炎症消退中的关键作用。SIK抑制剂通过p300-PPARγ依赖的机制促进胞葬作用和M2极化，同时通过PD-L1/2–PTEN轴诱导调节性T细胞分化，从而实现免疫耐受。这些发现不仅揭示了RA疾病进展的新机制，也为开发以SIK为靶点的治疗策略提供了坚实理论基础，尤其对难治性RA患者具有重要临床意义。