靶向N332gp120聚糖非依赖性V3表位的HIV-1广谱中和抗体007的鉴定与功能研究

本综述报道了新型抗HIV-1广谱中和抗体（bNAb）007的发现与表征，其靶向Env三聚体上不依赖N332gp120聚糖的V3表位。通过冷冻电镜（cryo-EM）结构解析，揭示007独特结合模式依赖于N156gp120与N301gp120聚糖，且双价IgG形式通过介导Env三聚体交联显著增强中和活性。在HIV-1ADA感染人源化小鼠模型中，007可短暂降低病毒载量并克服经典V3逃逸突变，为HIV-1治疗、预防及疫苗设计提供了新策略。

Identification of bNAb 007 with a distinct binding and neutralizing profile

研究团队从坦桑尼亚南部Mbaya地区的精英中和者EN01捐赠者中分离出单克隆抗体007。该抗体对多亚型HIV-1假病毒具有高广度（100%）和效力（GeoMean IC₅₀/IC₈₀= 0.008/0.069 μg ml⁻¹）。竞争ELISA显示007与CD4结合位点（CD4bs）抗体1-18、3BNC117及V3聚糖位点抗体10-1074存在结合干扰，但其表位不同于经典V3抗体。

007 targets an N332_gp120glycan-independent V3 epitope on Env

冷冻电镜结构表明007结合位点围绕N156_gp120与N301_gp120聚糖，但不依赖N332_gp120聚糖。其CDRH3与V3环的³²⁴GD/NIR³²⁷基序结合，其中K99_HC与D322_gp120形成静电相互作用。与类似抗体EPTC112相比，007对³²⁴GD/NIR³²⁷基序结合更全面，且对N156_gp120与N301_gp120聚糖的容纳性更优。

007 bivalency is required for potent neutralization

双价IgG1与IgG3形式的007中和效力显著高于单价Fab或双特异性抗体（bispecific IgG），表明其通过亲和力效应增强中和能力。冷冻电镜解析的007 IgG-Env复合物结构显示两个Env三聚体被三个IgG交联形成“三聚体-二聚体”结构，提示其可能通过病毒聚集机制发挥作用。

007 exhibits high levels of antiviral activity and a complementary neutralization profile to canonical V3-specific bNAbs

在119株多亚型假病毒面板中，007中和广度达66%，对缺乏N332_gp120聚糖的病毒仍保持71%活性。深度突变扫描（DMS）显示007逃逸突变集中于V1/V2环（如N156_gp120、N301_gp120）及V3环非聚糖区（如D322_gp120），而经典V3抗体逃逸位点（如N332_gp120）不影响007活性。

Deep mutational scanning reveals a distinct escape profile

DMS分析证实007逃逸路径与10-1074等抗体显著不同。例如，在Env_TRO.11中，007活性受N156_gp120、N188a_gp120和N301_gp120聚糖缺失影响，而对N332_gp120突变不敏感。

007 suppresses viremia in vivo, and dual targeting of the V3 glycan site affects viral rebound

在HIV-1_ADA感染人源化小鼠中，007单药治疗可使病毒载量下降0.78 log₁₀，但14天后出现反弹。测序显示逃逸突变位于gp120的139、146、303、322和341位点。007与10-1074联合治疗可延长病毒抑制时间至20天，并诱导复合逃逸突变。

Discussion

007代表了一类新型V3靶向bNAb，其独特表位和双价交联机制为HIV-1免疫治疗提供了新思路。其与经典V3抗体的互补性提示双靶向策略可增强中和广度并延缓耐药出现，对疫苗设计具有重要参考价值。