世界上最快的细菌转化[新品推荐]

时间:2009年5月6日
来源:生物通

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ECOS感受态细胞是由台湾Yeastern Biotech(益生生技)开发的,目前由Sigma-Aldrich公司代理销售。ECOS是E.Coli. One-Step transformation的缩写,换言之,它是一步法的转化。与传统的转化过程相比,最大的不同是省却了复苏的步骤。一般的转化都需要复苏,整个过程约需1-2小时。而ECOS跳过了复苏这一步,在1分钟转化过后直接涂板,因此过程大大简化。

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细菌转化的操作已经成为最常规的实验了,不肖多说,生物人都知道。但是,转化过程也是在不断地进化。从前,大家都是自己制备感受态细胞,但转化效率不太高,而且每次的差异较大。渐渐地,一部分先富起来的实验室开始购买商业化的感受态细胞。商业化的感受态细胞也有很多种,今天我们要介绍的是能够实现快速转化的ECOS感受态细胞。

ECOS感受态细胞是由台湾Yeastern Biotech(益生生技)开发的,目前由Sigma-Aldrich公司代理销售。ECOS是E.Coli. One-Step transformation的缩写,换言之,它是一步法的转化。与传统的转化过程相比,最大的不同是省却了复苏的步骤。一般的转化都需要复苏,整个过程约需1-2小时。而ECOS跳过了复苏这一步,在1分钟转化过后直接涂板,因此过程大大简化。

如果你希望转化效率更高,可以选择45秒的热击,不用冰浴,马上涂布在预冷的平板上;如果你赶时间的话,连热击都可省略。


与传统的市售感受态细胞相比,ECOS感受态细胞的优势在于:

  • 革命性的1分钟转化,取代了原先的1-2小时
  • 操作步骤大为简化
  • 无需添加LB/SOC
  • 根据你对效率和便利性的要求,可选择不同的操作步骤
  • 严格的质控过程,确保每个批次的效率

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ECOS系列感受态细胞有5种,分别适合于不同的应用,比如大质粒、单链DNA的克隆,蓝白斑筛选和蛋白表达。DH5a、BL21这些都是耳熟能详的,而ECOS C41和C43是后来推出的,因为这两种菌株在毒性蛋白的表达方面比BL 21更佳。具体的选择指南详见下表。

克隆应用

ECOS 101

DH5a

ECOS 9-5

JM109

ECOS Blue

XL1-Blue

ECOS 21

BL 21

ECOS C41/C43

大质粒 > 6 kb

最佳选择

*

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亚克隆

最佳选择

合适

合适

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*

cDNA 文库

合适

合适

合适

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单链DNA

*

最佳选择

*

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快速生长

*

合适

*

合适

合适

突变

合适

*

*

不行

不行

蛋白表达

*

*

*

最佳选择

最佳选择

毒性蛋白的表达

不行

不行

不行

不行

最佳选择

蓝白斑筛选

合适

最佳选择

最佳选择

最佳选择

不行

*表示可应用于此范围,但表现未必最佳

(生物通 余亮)

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